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一种利用转分化乳腺上皮细胞制备转基因乳腺生物反应器的方法: 本发明提供了一种利用转分化乳腺上皮细胞制备转基因乳腺生物反应器的方法，包括如下步骤，1)制备携带外源基因的转分化乳腺上皮细胞；2)将步骤1)制备的携带外源基因的转分化乳腺上皮细胞注射到去除了乳腺芽的乳腺脂肪垫，注射细胞量...; 黄奔张丹丹刘权辉朱少倩叶升覃梁珊李梦梅胡吉刚谢小莲

乳腺生物反应器的表达优化策略: 2023年; 乳腺生物反应器是指将外源基因导入动物基因组并在动物乳腺中特异性表达,利用动物乳腺合成、分泌蛋白的功能,在其乳汁中获得外源蛋白的技术。乳腺生物反应器凭借其高表达、低成本以及合成蛋白质的结构接近天然蛋白质等优势而被视为药用和营养蛋白生产的一次技术革新,然而由于外源基因随机整合以及重组蛋白表达不稳定等问题极大地限制了其应用。本文结合乳腺生物反应器的发展现状,从利用基因编辑技术、筛选合适的外源基因整合位点以及改进外源基因调控序列3个方面对乳腺生物反应器优化策略进行了综述,以期为提高乳腺生物反应器生产重组蛋白的表达提供理论借鉴。; 刘晓燕祝振亮史广宇华梓宇杨晨张涌刘军; 关键词：乳腺生物反应器

利用乳腺生物反应器提高乳汁中褪黑素含量的方法: 本发明提供一种利用乳腺生物反应器提高乳汁中褪黑素含量的方法，其是将褪黑素关键合成酶AANAT和HIOMT基因的cDNA序列连接酪蛋白启动子，通过高效的CRISPR/Cas9系统，整合到羊的染色体基因中，通过乳腺反应器表达...; 刘国世连正兴马腾何长久张效生邓守龙宋玉坤张金龙姬鹏云富俊才韩红兵田秀芝陶景丽李岩; 文献传递

一种利用转分化乳腺上皮细胞制备转基因乳腺生物反应器的方法: 本发明提供了一种利用转分化乳腺上皮细胞制备转基因乳腺生物反应器的方法，包括如下步骤，1)制备携带外源基因的转分化乳腺上皮细胞；2)将步骤1)制备的携带外源基因的转分化乳腺上皮细胞注射到去除了乳腺芽的乳腺脂肪垫，注射细胞量...; 黄奔张丹丹刘权辉朱少倩叶升覃梁珊李梦梅胡吉刚谢小莲

抗p185erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器的制备与验证被引量：1: 2019年; 目的:构建抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因动物乳腺特异性表达载体并制备和验证抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器模型。方法:利用PCR法扩增出抗人p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的重链基因H和轻链基因L,然后分别将嵌合抗体重链基因H和嵌合抗体轻链基因L连接到乳腺特异性表达质粒pBC1,从而构建抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因动物乳腺特异性表达载体pBC1-H和pBC1-L。分别将抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26乳腺特异表达载体pBC1-H和pBC1-L线性化,然后使用原核显微共注射法获得8只转基因FVB小鼠,通过鼠尾直接PCR鉴定其转基因阳性。通过RT-PCR、荧光定量PCR鉴定转基因小鼠乳腺组织中抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的mRNA表达。使用小鼠乳汁采集器收集其乳汁并通过Western blot和夹心ELISA等实验鉴定抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26是否获得表达。结果:经测序验证,抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的嵌合重链基因H和嵌合轻链基因L分别与乳腺特异表达质粒pBC1正确正向连接。鼠尾直接PCR结果显示所获8只转基因FVB小鼠均为转基因双阳性小鼠,且抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的重链基因H和轻链基因L在它们的后代中稳定遗传,它们的后代中转基因小鼠双阳性率约为30%;RT-PCR和荧光定量PCR的结果显示,转基因双阳性小鼠及其双阳性后代的乳腺组织中存在抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的mRNA表达;Western blot和ELISA等实验结果显示,转基因双阳性小鼠乳汁中存在抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26的蛋白质表达,而且抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26与羊抗人κ链抗体和羊抗人IgG Fc-HRP抗体均能特异性结合。结论:成功构建抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因动物乳腺特异性表达载体pBC1-H和pBC1-L和制备了抗p185^erbB2人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器模型,为今后抗p185^erbB2人鼠嵌; 梁振鑫刘芳张玮刘庆友李力; 关键词：嵌合抗体转基因小鼠乳腺生物反应器

CRISPR/Cas9靶向整合轮状病毒VP6基因构建兔乳腺生物反应器模型的初步研究: 小儿腹泻是一种由轮状病毒导致的病毒性疾病，新生婴儿的致死率达80%，全球性危害较严重。VP6蛋白是轮状病毒的免疫原性的结构蛋白，如能在动物的乳腺中表达VP6蛋白，将有可能生产出抗轮状病毒的口服疫苗。为此，本研究拟应用CR...; 李红丽; 关键词：小儿腹泻轮状病毒 VP6基因口服疫苗乳腺生物反应器; 文献传递

动物乳腺生物反应器一种神奇的制药方式: 2018年; 人吃五谷杂粮,难免会生病,因此我们的生活离不开医药产业。纵观人类药物发展的历史,经历了三个不同的发展阶段。最初是天然药物,主要是利用中草药或提取中草药中的活性成分加工成中成药,用于疾病的治疗和预防。在这方面,我国中草药为世界医药的发展做出了巨大贡献,拥有绝对的发言权。随着西方科技的发展,化学药物渐成主流,药物合成逐渐兴起,与第一代药物相比,其活性更高、更有效。现在我们广泛使用的各类抗生素大部分属于这一类药物。20世纪70年代重组DNA技术的飞速发展,诞生了基因工程药物。由于基因药物的高产值、高效率、高收益,给制药产业带来了一场革命,推动了整个医药产业的发展。; 曾凡一薛燕; 关键词：动物乳腺生物反应器重组DNA技术天然药物药方医药产业基因工程药物

乳腺生物反应器在生物制药领域的研究进展被引量：5: 2018年; 乳腺生物反应器是利用转基因动物生产功能蛋白质的技术.这项技术开创了基因工程制药的新途径.而其具有的低成本、高质量,稳定的生物学活性、较短的生产周期、较高的经济效益等一系列研发特点,使得这一生产方式成为医药产业的主要手段.; 谢晶莹张勇张勇; 关键词：乳腺生物反应器转基因动物生物制药

乳汁中表达GP5-M蛋白的奶山羊乳腺生物反应器的制备方法: 本发明公开了乳汁中表达GP5‑M融合蛋白的羊乳腺生物反应器的制备方法，制备GP5‑M融合表达的基因打靶载体，敲入奶山羊β‑乳球蛋白第一外显子上，筛选中靶细胞，利用体细胞核移植技术制备转基因奶山羊，通过乳腺生物反应器生产含...; 张涌刘军葛恒涛苏建民王勇胜权富生; 文献传递

利用乳腺生物反应器提高乳汁中褪黑素含量的方法: 本发明提供一种利用乳腺生物反应器提高乳汁中褪黑素含量的方法，其是将褪黑素关键合成酶AANAT和HIOMT基因的cDNA序列连接酪蛋白启动子，通过高效的CRISPR/Cas9系统，整合到羊的染色体基因中，通过乳腺反应器表达...; 刘国世连正兴马腾何长久张效生邓守龙宋玉坤张金龙姬鹏云富俊才韩红兵田秀芝陶景丽李岩

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