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组分Ⅰ+Ⅲ沉淀结合亲和层析 法 制备人凝血因子Ⅸ的方法 亲和层析 法 制备人凝血因子Ⅸ的方法 ，涉及血液制品技术领域，包括以下步骤：取组分Ⅰ+Ⅲ沉淀，用溶解液溶解、搅拌、静置，收集上清液；向上清液中加入A50干粉凝胶或使用后再生的湿胶，搅拌、静置，收集...免疫亲和层析 法 对马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2)中猪细小病毒的去除效果评价 2024年 亲和层析 纯化工艺对猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)的去除效果.方法 分别采用首次装填和重复使用100次的层析 柱,对3批中试规模生产的中间品进行缩小规模的层析 工艺去除病毒效果评价.将PPV指示病毒加至层析 前的料液中,分别于层析 纯化上样前、流穿、洗脱、在位清洗阶段取样进行病毒滴度检测.结果新装填的免疫亲和层析 柱对PPV的去除效果符合要求,洗脱液病毒平均降低量≥4.30 lgTCID_(50)/0.1 ml.免疫亲和层析 柱重复使用100次,对PPV的去除效果仍符合要求,洗脱液病毒平均降低量≥4.33 lgTCID_(50)/0.1 ml.结论马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2)的免疫亲和层析 纯化工艺具有良好的PPV去除效果,层析 柱重复使用100次与首次使用的病毒去除效果无明显差别.关键词：猪细小病毒 莱克多巴胺单克隆抗体非亲和层析 法 纯化研究 2023年 法 (Ammonium sulfate precipitation,AS)及AS分别与阴离子交换层析 法 (Anion exchange chromatography,AEC)、阳离子交换层析 法 (Cation exchange chromatography,CEC)、疏水作用层析 法 (Hydrophobic interaction chromatography,HIC)和陶瓷羟基磷灰石法 (Ceramic hydroxyapatite,CHT)联合应用纯化腹水来源的莱克多巴胺单克隆抗体(Ractopamine monoclonal antibody,RAC-mAb)进行了研究。优化缓冲液pH、盐浓度及层析 介质,分别采用Bradford法 、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl-sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、间接竞争酶联免疫吸附试验(Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)和胶体金免疫层析 技术(Colloidal gold immunochromatography,CGIC)对抗体纯化后回收率、纯度及生物学活性进行评估。结果显示,采用AS+AEC法 纯化抗体回收率高、纯度和生物学活性好,抗体回收率为40.1%,纯度为75.1%,经icELISA平行测定3次所得灵敏度(IC_(50))最佳为1.73±0.22 ng/mL,CGIC测定其在PBS及猪尿样本添加cut-off值分别为5 ng/mL和60 ng/mL。本研究为单克隆抗体纯化提供了理论参考和必要的实验基础。基于串联亲和层析 法 纯化并鉴定猪初乳中SIgA 2023年 亲和层析 ,强阴离子柱和精细分子筛层析 进行纯化,从10 mL初乳中获得3 mg具有活性的SIgA。使用Western blot对纯化的SIgA进行鉴定,结果表明,纯化的SIgA与抗猪的重链蛋白单抗和抗SC单抗均具有良好的反应性。使用ELISA测试SIgA与抗猪的IgA重链单抗的反应性,结果发现使用本方法 纯化的SIgA较原先方法 (即硫酸铵沉淀,DEAE52弱阴离子层析 ,SephadexG-200凝胶层析 和多次亲和层析 的纯化方法 )具有更高的反应性。最后使用质谱鉴定纯化的蛋白,结果表明为猪的SIgA。本研究为从猪初乳中纯化SIgA建立了一种高效的纯化方法 ,也为其它来源的SIgA的纯化提供参考。关键词：SIGA 纯化 免疫亲和层析 法 制备马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2) 被引量：2 2022年 亲和层析 法 纯化制备马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2)。方法 破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)免疫马血浆经胃酶消化、加温变性、硫酸铵盐析、明矾吸附、超滤,获得破伤风抗毒素;再经CNBr activated Sepharose 4FF介质偶联TT制成的亲和层析 柱纯化,获得马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2)。检测其蛋白质含量、分子大小分布、纯度、效价、比活性,并与破伤风抗毒素进行比较。将马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2)置(25±2)℃分别保存1、2、3、6个月,测定效价。结果与破伤风抗毒素比较,马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2)的蛋白质含量平均值由45.6 mg/mL下降至20.03 mg/mL,降低了56%;F(ab')2含量变化较小,聚合物含量由2.92%下降至1.22%,降低了59%;纯度略有降低;效价平均值由2533 IU/mL升高至3733 IU/mL,提高了47%;比活性平均值由55563 IU/g升高至186277 IU/g,提高了335%。加速稳定性试验6个月,马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2)效价及F(ab')2含量均在合格范围之内。结论采用免疫亲和层析 方法 制备了高效价及高比活性的马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2),且稳定性良好。关键词：破伤风抗毒素 效价 一种使用蛋白A亲和层析 法 纯化生物活性肽的方法 亲和 基质的亲和 色谱柱纯化含有Fc的生物活性肽混合物的方法 ，其中，所述含有Fc的生物活性肽包含第一含有Fc的生物活性肽和第二含有Fc的生物活性肽，其中，与所述第一含有Fc的生物活性肽相...Ni离子螯合亲和层析 法 分离大叶海藻中的抗氧化多肽 2021年 亲和层析 柱分离纯化的方法 提取大叶海藻中的抗氧化多肽。对影响洗脱效果和抗氧化多肽乳化活性的因素进行探讨,并分析抗氧化多肽的洗脱曲线、组成成分和螯合率。对提取的抗氧化多肽的活性在O_(2)-·和·OH清除能力2个方面进行测定。结果表明,Ni离子螯合多肽的亲和层析 分离方法 有效,可获得较好的多肽纯度和活性。一种亲和层析 法 制备高纯度糜蛋白酶的工艺 亲和层析 法 制备高纯度糜蛋白酶的工艺，其主要步骤包括：(1)取糜蛋白酶原，用去离子水溶解并调节pH值，加入高比活性的胰蛋白酶，低温酶解后的溶液离心得到酶解液；(2)制备低分子尿蛋白酶抑制剂亲和层析 介质，然后...文献传递 蛋白A亲和层析 法 纯化抗体的方法 以及抗体的纯化方法 亲和层析 法 纯化抗体的方法 以及抗体的纯化方法 。蛋白A亲和层析 法 纯化抗体的方法 ：循环利用以下蛋白A亲和层析 柱纯化目标抗体：填料为MabSelect LX、Amsphere A3或Praesto Jett...文献传递 亲和层析 法 纯化重组大肠杆菌表达的亚油酸异构酶被引量：1 2018年 亲和层析 的方法 分离纯化重组大肠杆菌发酵液中的亚油酸异构酶。优化的亲和层析 条件:上样量10 m L,流速0.25 m L/min。酶被纯化了13.22倍,比活力达12.30 U/(mg蛋白),回收率为94.84%。经SDS-PAGE检测,该蛋白分子质量为55 ku。采用气相色谱检测该蛋白催化LA生成t10,c12-CLA,酶活为(34.775±0.07)U/m L,该酶为亚油酸异构酶。关键词：亚油酸异构酶 气相色谱 生物转化
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