搜索到5225篇“ 体外培养乳鼠心肌细胞“的相关文章
- 银杏内酯B调控SENP2基因对体外培养心衰模型心肌细胞的保护作用被引量：3
- 2020年
- 目的:探讨银杏内酯B对体外培养心力衰竭模型心肌细胞的保护作用及相关机制研究。方法:通过体外培养原代大鼠心肌细胞,加入戊巴比妥钠构建心衰模型。MTT检测银杏内酯B对心肌细胞活力的影响;检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;检测细胞中离子转运相关酶活性。采用qRT⁃PCR与Western blot检测银杏内酯B对小型泛素相关修饰物(SUMO)特异性蛋白酶2(SENP2)表达的影响;观察沉默SENP2的表达、SENP2过表达对心肌细胞活力、LDH水平及离子转运相关酶活性的影响;Western blot检测磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路相关蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组心肌细胞活力显著降低,LDH、Na^(+)⁃K^(+)⁃ATP酶活性及SENP2表达显著升高,而Ca^(2+)⁃Mg^(2+)⁃ATP酶、T⁃ATP酶活性及p⁃PI3K、p⁃AKT表达显著降低。银杏内酯B作用后明显逆转上述变化;沉默SENP2增加心衰细胞活力、离子转运相关酶活性和抑制LDH释放;过表达SENP2部分逆转银杏内酯B对心衰细胞的保护作用。结论:银杏内酯B可能通过抑制SENP2的表达而改善心衰模型心肌细胞ATP酶活性及细胞膜通透性,其作用机制可能是通过激活PI3K/AKT信号通路从而对心肌细胞发挥保护作用。
- 郑波张艳敏马宝新张芳王震
- 关键词：银杏内酯B心衰模型心肌细胞
- 体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化被引量：2
- 2017年
- 目的探讨体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化。方法取孕19日SD胎鼠分离心肌细胞进行原代培养,采用0.8 g/L胰蛋白酶和0.4 g/L 2型胶原蛋白酶联合消化后,以多次差速分离,不同种类的动物血清(胎牛血清组、马血清组)改良心肌细胞培养条件。倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态及搏动频率、免疫荧光细胞化学染色分别检测α-横纹肌辅肌动蛋白(α-SA)与心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)鉴定胎鼠心肌细胞及培养24、48、72、96 h的心肌细胞纯度。结果心肌细胞接种24 h,可见大部分贴壁细胞和少量的悬浮细胞,亦见少许搏动的心肌细胞;48、72、96 h,马血清组心肌细胞α-肌动蛋白及cTnⅠ阳性率明显高于胎牛血清组。结论采用胰蛋白酶和2型胶原蛋白酶联合消化和马血清更易培养出胎鼠心肌细胞。
- 孙凤杰佟德民卢小炎董文斌邓长柏
- 关键词：细胞培养SD大鼠
- 人参皂苷Rg_1配伍乌头碱对体外培养心衰模型心肌细胞的保护作用被引量：17
- 2017年
- 目的:考察人参皂苷Rg_1配伍乌头碱对体外培养心衰模型心肌细胞的保护作用。方法:将新生大鼠心肌细胞分为正常对照组、模型组、阳性对照组(去乙酰毛花苷注射液,1×10^(-7)mol/L)、人参皂苷Rg_1组(1×10^(-8)mol/L)、乌头碱组(1×10^(-9)mol/L)以及人参皂苷Rg_1与乌头碱不同配比的配伍组(1∶1、2∶1、1∶2,V/V)。除正常对照组外,其余各组细胞均以0.8%戊巴比妥钠诱导心肌细胞心衰模型。成模后,各组细胞给予相应药物培养1 h,然后检测细胞总三磷酸腺苷(ATP)酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶和Na^+-K^+-ATP酶活力;检测细胞培养液中酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)活力和脑钠肽(BNP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量以及细胞中总糖原含量。结果:与正常对照组比较,模型组细胞总ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活力明显降低,Na^+-K^+-ATP酶活力明显升高,培养液中ACP、LDH活力及BNP含量均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组细胞总ATP酶活力显著升高,细胞培养液中LDH活力显著降低,且以人参皂苷Rg1与乌头碱2∶1配伍时作用最强;乌头碱组和各配伍组细胞Na^+-K^+-ATP酶活力均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);各给药组细胞培养液中ACP、BNP活力均有降低的趋势,细胞内总糖原含量和培养液中TNF-α含量无显著变化(P>0.05)。结论:人参皂苷Rg_1配伍乌头碱可改善大鼠心衰模型心肌细胞ATP酶活力和膜通透性,调节细胞分泌BNP,对心衰模型心肌细胞有一定保护作用,且以人参皂苷Rg_1与乌头碱2∶1配伍时作用最强。
- 董艳红谢晓芳李雪梅朱雅宁彭成
- 关键词：乌头碱配伍心衰模型心肌细胞细胞膜通透性
- 心肌康注射液对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤保护作用的实验研究
- 2016年
- 目的:探讨心肌康注射液对乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用。方法:实验分正常组、模型组、心肌康1.5 g/L组、心肌康3.0 g/L组4组,细胞培养3 d后,分别进行相应的处理,观察心肌细胞的搏动频率,分光光度法测定心肌细胞LDH(乳酸脱氢酶)含量,细胞化学染色观察心肌细胞LDH及SDH(琥珀酸脱氢酶)活性。结果:与正常组比较,模型组心肌细胞搏动频率明显减少;心肌康注射液2组心肌细胞搏动频率明显增加,与模型组比较,差异具统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,模型组心肌细胞LDH及SDH活性明显降低,LDH含量明显升高;心肌康2组心肌细胞LDH及SDH活性较模型组显著增强,LDH含量明显降低,统计学处理差异显著(P<0.05)。结论:心肌康注射液对心肌细胞缺氧缺糖性损伤具有保护作用。
- 孙伟夫刘洋康永亮孟亚楠于淼
- 关键词：体外研究
- 虎杖苷对体外培养乳鼠心肌细胞肥大及成纤维细胞增殖的影响被引量：5
- 2015年
- 目的研究虎杖苷对新生乳鼠离体培养心肌细胞和成纤维细胞增殖的影响及其抗氧化作用。方法剪取新生SD大鼠左心室,采用差速贴壁法分离并培养心肌细胞和成纤维细胞,将培养成功的成纤维细胞和心肌细胞均分为5组,即正常对照组、虎杖苷对照组(10-4mol/L)、模型组[10-6mol/L异丙肾上腺素(ISO)]、虎杖苷低浓度组(10-5mol/L+ISO 10-6mol/L)和虎杖苷高浓度组(10-4mol/L+ISO 10-6mol/L),进行相应干预。孵育2天后,采用考马斯亮兰法测定心肌细胞蛋白质含量,并测定其超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;测定成纤维细胞增殖及其培养液中SOD和GSH-Px及NO浓度。结果与正常对照组比较,模型组可诱导心肌细胞蛋白含量增多,明显降低SOD及GSH-Px活力(P<0.05);与模型组比较,虎杖苷高低浓度组心肌细胞蛋白含量明显降低,且SOD及GSH-Px活力明显升高(P<0.05);虎杖苷高浓度对GSH-Px活性的升高明显较低浓度强,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组可诱导成纤维细胞增殖,明显降低SOD及GSH-Px活力和NO含量(P<0.05);与模型组比较,虎杖苷高浓度组能抑制成纤维细胞的增殖,显著升高NO含量和SOD及GSH-Px活力(P<0.05)。结论虎杖苷对ISO诱导的乳鼠心肌细胞肥大和成纤维细胞增殖有一定对抗作用,其作用机制与其抗氧化作用以及影响NO生成有关。
- 武容郭娟王会琳高建平
- 关键词：虎杖苷心肌细胞成纤维细胞增殖
- 体外培养状态下心肌细胞有丝分裂的证据被引量：3
- 2015年
- 目的探讨体外培养状态下心肌细胞有丝分裂、增殖的证据。方法分离新生大鼠心肌细胞,分别原代培养0h至12d;免疫荧光分别双标心肌肌钙蛋白-T（c Tn T）、磷酸化组蛋白H3（H3P）和微管蛋白（tubulin）,利用活细胞工作站和荧光显微镜观察处于分裂期的心肌细胞。结果原代培养的心肌细胞生长状态好、纯度高,可观察到分裂各期的心肌细胞及其微管蛋白的变化。处于分裂各期的心肌细胞不隆起变圆仍维持扁平状。分裂前期细胞核形状规则,染色质凝集,H3P开始表达;前中期核膜破裂,纺锤体形成;中期染色体排列在赤道面,纺锤体呈典型纺锤样;后期染色单体分开并移向两极;末期子核形成,平行微管聚结在两子核之间;胞质分裂期形成两个子细胞,两个细胞分开后,可见有少量微管呈丝状连接。原代培养1～12d的心肌细胞在整个细胞分裂图像中很少见到双核心肌细胞。培养第3天开始发现分裂象的心肌细胞,占总心肌细胞数的2/127（1.57%）和1/92（1.09%）,培养第7天,分裂细胞比率达3/69（4.35%）和5/163（3.07%）,培养第12天有2/100（2%）和0/60（0）的心肌细胞处于分裂期。结论体外培养的心肌细胞存在一定数量的完全有丝分裂,是心肌增殖和心肌再生的细胞学证据。
- 李辞霞卢杏郭志坤
- 关键词：有丝分裂心肌细胞免疫荧光技术体外培养
- 去甲肾上腺素与CGRP对体外培养乳鼠心肌细胞αB——晶体蛋白表达的影响
- 目的：观察去甲肾上腺素(Norepinephrine，NE)与降钙素基因相关肽（Calcitonin gene-related peptide，CGRP）单独使用，以及NE与CGRP混合使用对体外培养乳鼠心肌细胞αB-晶...
- 孙韬
- 关键词：去甲肾上腺素降钙素基因相关肽心肌细胞
- 文献传递
- 七氟醚预处理和后处理在体外培养乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用
- 目的:评价七氟醚预处理、七氟醚后处理及两者联合对体外培养原代乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护效果,并探讨p38丝裂原活化蛋白激酶在其中的作用。方法:健康新生SD大鼠,日龄1-3d,处死后取心室肌组织,体外培养乳鼠心肌细胞,...
- 庄欣琪吕国义
- 关键词：七氟醚缺血预处理缺血后处理心肌细胞丝裂原活化蛋白激酶P38
- 文献传递
- X射线对体外培养乳鼠心肌细胞损伤的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究X射线对体外培养的心肌细胞活性及凋亡的影响。方法体外培养新生大鼠心肌细胞,分为对照组和放射组,放射组分别用X射线10Gy、20Gy、30Gy、40Gy单剂量照射心肌细胞,采用MTT法观察X射线对乳鼠心肌细胞活性的影响;血生化自动分析仪定量测定X射线作用后心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)的改变;吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)双染色法在激光扫描共聚焦显微镜下观察心肌细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪定量检测心肌细胞的凋亡率。结果①X射线剂量在10～40Gy均能抑制心肌细胞活性并成剂量依赖性;②细胞心肌酶谱检测到LDH释放量与X射线剂量相关;③流式细胞仪发现心肌细胞凋亡率与X射线照射剂量有相关性。结论本研究结果显示X射线对心肌细胞有毒性作用,可致心肌细胞损伤,表现为心肌细胞坏死和凋亡发生率增加。
- 张三典陆妙珍高耀明张军宁王建平徐九宏
- 关键词：X射线体外培养乳鼠心肌细胞凋亡
- X射线对体外培养乳鼠心肌细胞损伤的初步实验研究
- 2010年
- 目的:初步探讨一定剂量的X射线对体外培养乳鼠心肌细胞的损伤。方法:全自动生化分析仪定量测定不同剂量X射线照射后第24小时心肌细胞培养基乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的含量;激光扫描共聚焦显微镜观察心肌细胞经40GyX射线照射后第24h的形态学改变。结果:心肌细胞有较高的辐射抗性,在0Gy～30Gy的放射剂量下心肌细胞培养基乳酸脱氢酶的含量变化不是很明显(P>0.05);当放射剂量≥40Gy时培养基乳酸脱氢酶的含量显著升高(P<0.05);激光扫描共聚焦显微镜观察到经40GyX射线照射后第24h的典型的心肌细胞形态学改变。结论:一定剂量的X射线对心肌细胞有直接损伤作用。
- 周锋张三典
- 关键词：X射线乳鼠心肌细胞乳酸脱氢酶
