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家蚕几丁质去乙酰化酶BmCDA2的基因表达和免疫定位被引量:1
2023年
几丁质的去乙酰化修饰与昆虫的发育变态密切相关,几丁质去乙酰化酶(chitin deacetylase,CDA)是这个过程中的关键酶。家蚕(Bombyx mori)是鳞翅目昆虫的代表性昆虫,目前对家蚕CDAs的研究较少。为了更好地揭示BmCDAs对家蚕变态发育的作用,本研究采用生物信息学分析、蛋白表达纯化以及免疫荧光定位等方法对表皮中高量表达的BmCDA2进行了研究。结果发现,BmCDA2有两种mRNA拼接形式BmCDA2a和BmCDA2b,分别在幼虫眠期和化蛹期表皮高量表达,两个基因均有几丁质去乙酰化酶催化结构域(catalytic domain)、几丁质结合结构域(chitin binding domain)和低密度脂蛋白受体结构域(low density lipoprotein receptor domain);Western blotting结果显示,该蛋白在表皮存在,荧光免疫定位发现BmCDA2蛋白随着幼虫新表皮的生成而逐渐增多,推测BmCDA2可能参与了幼虫新表皮的形成。该结果丰富了家蚕CDAs的生物学功能信息,也为其他昆虫CDA的研究提供一些有价值的参考。
何允陈怡菲王清浪张自钰董浩南申太霞侯勇龚竞
关键词:家蚕原核表达免疫荧光定位
白蜡窄吉丁气味结合蛋白AplaOBP3的免疫定位及配体结合特性被引量:1
2021年
【目的】本研究旨在解析白蜡窄吉丁Agrilus planipennis气味结合蛋白AplaOBP3在触角中的定位及配体结合特性,同时比较AplaOBP3与已报道的AplaOBP1和AplaOBP2的功能异同。【方法】原核表达白蜡窄吉丁气味结合蛋白AplaOBP3,制备多克隆抗体并进行Western blot检测;采用免疫组织化学技术在白蜡窄吉丁触角感器中对AplaOBP3的表达进行定位;通过荧光竞争结合实验分析AplaOBP3重组蛋白与58种化合物的结合特性,并与前期报道的白蜡窄吉丁AplaOBP1和AplaOBP2蛋白的配体结合特性进行比较。【结果】原核表达系统中成功表达AplaOBP3重组蛋白;免疫定位结果显示AplaOBP3在白蜡窄吉丁触角的锥形感器类型I中表达。荧光竞争结合实验结果表明,重组AplaOBP3蛋白与反-2-己烯醛、苯甲醛、4′-乙基苯乙酮、β-紫罗兰酮和罗勒烯具有强的结合能力,其解离常数K D值分别为6.20,4.03,5.24,1.72和4.83μmol/L。AplaOBP3与AplaOBP2具有相似的表达及配体结合特性。【结论】白蜡窄吉丁气味结合蛋白AplaOBP3与AplaOBP2具有相似的表达及配体结合特性,它们可能共同参与白蜡窄吉丁的嗅觉感受,在白蜡窄吉丁寄主定位过程中发挥作用。
宋玄王泽华单双张永军王山宁
关键词:白蜡窄吉丁气味结合蛋白触角感器免疫组织化学
细粒棘球绦虫水通道蛋白9的多肽特征及免疫定位研究被引量:2
2021年
目的研制细粒棘球绦虫水通道蛋白9(EgAQP9)的特异性多肽抗体,并用于检测其在棘球蚴囊壁、生发细胞及原头蚴中的组织分布情况。方法根据EgAQP9特异氨基酸序列设计合成B细胞抗原多肽,再用合成的多肽偶联KLH作为免疫原注射免疫新西兰兔以制备多克隆抗体。酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测多肽抗体滴度,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定多肽抗体免疫活性,免疫荧光实验分析EgAQP9的亚细胞定位,免疫组化实验分析EgAQP9组织定位。结果免疫新西兰兔成功制备出多肽抗体;间接ELISA检测其多肽抗体效价高达1∶256000;Western blot结果显示多肽抗体能够特异识别细粒棘球绦虫中36 kDa处的条带,与EgAQP9预测的相对分子量大小相符;免疫荧光实验结果显示EgAQP9分布于棘球蚴生发细胞的胞质、胞膜中;免疫组化实验显示该蛋白主要分布在原头蚴表面及棘球蚴囊泡生发层。结论本研究以制备的EgAQP9兔源多克隆抗体定位了AQP9在棘球蚴生发细胞、原头蚴及棘球蚴囊壁中的分布状况。
谭青青李锴张静张静高剑范俊杰陆合叶彬
关键词:细粒棘球绦虫水通道蛋白多肽抗体亚细胞定位
细粒棘球绦虫AQP-9多肽抗体的制备及免疫定位
目的:  建立经济、高效的非疫区实验室细粒棘球蚴生发细胞的原代培养方法。制备细粒棘球绦虫水通道蛋白 9 的多克隆抗体,确定其在细粒棘球蚴生发细胞内的细胞定位及在原头蚴、棘球蚴囊壁中的组织分布。为进一步研究细粒棘球蚴水通道...
李锴
关键词:细粒棘球蚴水通道蛋白9多肽抗体免疫定位
滤泡辅助性T细胞/B细胞/滤泡树突细胞免疫定位对血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤的辅助诊断意义被引量:1
2019年
目的探讨滤泡辅助性T细胞/B细胞/滤泡树突细胞(TFH/B/FDC)免疫定位对血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(AITL)的辅助诊断意义。方法选取2009年1月1日至2018年5月31日连云港市第一人民医院21例AITL、16例外周T细胞淋巴瘤,非特殊类型(PTCL,NOS)为研究对象,应用免疫组织化学法检测CD2、CD3、CD4、CD5、CD10、bcl-6、CD20、PAX5、CD21在AITL和PTCL,NOS中的表达情况;应用CD10/CD20/CD21抗体观察TFH/B/FDC细胞免疫定位;应用PAX5/CD21鸡尾酒抗体观察B/FDC细胞免疫定位。结果(1)在21例AITL中13例观察到CD10^+/CD20^+/CD21^+细胞位于同一场所、8例观察到CD10^-/PAX5^+/CD21^+细胞位于同一场所,但16例PTCL,NOS均未观察到此现象。(2)以"CD10^+/CD20^+/CD21^+或CD10^-/PAX5^+/CD21+细胞位于同一场所"判作阳性标准,AITL(100%)、PTCL,NOS(0)阳性率比较差异有统计学意义(χ^2=37.000,P<0.01)。此标准诊断AITL的敏感度和特异度均为100%,显著优于CD4(100.0%,31.3%)、CD5(100.0%,25.0%)、CD10(61.9%,100.0%)、bcl-6(42.9%,100.0%)。结论TFH/B/FDC细胞免疫定位在同一场所是AITL的一个相对特征性的改变,对AITL的诊断具有提示意义。
王红霞张昶张昶陈昊聂艳红江亚军
关键词:血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤辅助性T细胞免疫定位B细胞外周T细胞淋巴瘤
三疣梭子蟹卵巢发育过程中雌二醇的免疫定位和变化
2017年
雌二醇(estradiol,E_2)是甲壳动物体内重要的性类固醇激素,对其卵巢发育和卵黄发生起着十分重要的调控作用。本实验采用免疫组织化学方法系统研究了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)卵巢发育过程中E_2在卵巢、肝胰腺、胸神经节、脑神经节和大颚器中的分布及变化。结果表明:(1)蟹卵巢中E_2的免疫阳性主要分布于滤泡细胞和卵巢发育中后期的卵母细胞细胞质(II-V期),卵巢发育过程中卵母细胞细胞质和细胞核中的E_2免疫阳性均为先上升后下降的趋势,最大免疫阳性分别出现在IV期和II-III期,滤泡细胞中始终存在较强的E_2免疫阳性;(2)肝胰腺中的E_2免疫阳性主要分布于F细胞及R细胞细胞核中,R细胞细胞核中的E_2免疫阳性从III期开始显著下降,F细胞中始终存在较强的E_2免疫阳性;(3)卵巢发育(I-V期)的神经组织,E_2主要分布于胸神经团的神经细胞和神经髓质以及脑神经节神经细胞细胞核内,其中脑神经节神经细胞细胞核中始终保持着强免疫阳性,卵巢发育早期(I-II期)胸神经团中的神经髓质中为E_2中等免疫阳性,神经细胞中一直为弱免疫阳性;(4)就大颚器而言,E_2强免疫阳性始终存在于大颚器腺细胞的核仁以及细胞核周围的细胞质内。以上结果表明,E_2在三疣梭子蟹卵巢、肝胰腺、神经组织和大颚器中广泛分布,且免疫阳性与卵巢发育具有一定的相关性,E_2可能通过作用于多个靶器官来调控三疣梭子蟹的卵巢发育。
柳梅梅吴旭干潘杰成永旭
关键词:三疣梭子蟹卵巢发育雌二醇免疫定位作用靶点
膜型基质金属蛋白酶-1在类风湿关节炎滑膜血管翳中的免疫定位研究
研究背景及目的:  类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以侵蚀性关节滑膜炎症为主要表现的慢性、系统性自身免疫性疾病,血管翳是 RA病变过程中一个特征性的病理产物,主要是由新生血管、增生肥大...
秦思
关键词:膜型基质金属蛋白酶-1类风湿关节炎血管翳免疫定位
泛素以及半胱氨酸蛋白酶在泽漆乳汁管中的免疫定位
泽漆(Euphorbia helioscopia L.)为大戟科(Euphorbiaceae)大戟属(Euphorbia)一年生或两年生草本植物,作为民间草药可全草入药,目前也已应用于临床医学。泽漆乳汁管为无节分枝乳汁管...
田兰婷
关键词:泽漆乳汁管泛素半胱氨酸蛋白酶
文献传递
网格重链蛋白(CHC)和APs β-类衔接蛋白在泽漆乳汁管中的免疫定位
泽漆,是一种具有广泛应用价值的中草药,之前许多关于泽漆的研究主要集中于其生物学特征,化学成分,药理作用,营养生长,乳汁管的发育,乳汁管细胞的超微结构及其乳汁的蛋白组学等方面,目前还未见有关于乳汁管中原生质降解机理方面的详...
方晓艾
关键词:泽漆
文献传递
一种EOLA1多克隆抗体的制备及免疫定位方法
本发明公开了一种EOLA1多克隆抗体的制备及免疫定位方法,该方法采用构建重组质粒,转化大肠杆菌及诱导表达,抽提目的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,免疫组织化学法检测EOLA1在部分人体恶性肿瘤组织中的表达,本发明成功制备重组...
敖云霞
文献传递

相关作者

吴旭干
作品数:420被引量:1,278H指数:24
供职机构:上海海洋大学水产与生命学院
研究主题:中华绒螯蟹 三疣梭子蟹 养殖性能 卵巢发育 性腺发育
李明堂
作品数:14被引量:38H指数:3
供职机构:长春理工大学生命科学技术学院
研究主题:免疫定位 白血病抑制因子 多克隆抗体 水通道蛋白 LIF
康现江
作品数:237被引量:788H指数:14
供职机构:河北大学
研究主题:中华绒螯蟹 日本沼虾 精子发生 精子 三疣梭子蟹
王清爽
作品数:45被引量:60H指数:4
供职机构:长春理工大学
研究主题:储氢材料 免疫定位 放氢 金属有机骨架材料 氢化铝
翁强
作品数:37被引量:104H指数:8
供职机构:北京林业大学生物科学与技术学院
研究主题:繁殖期 动物生理学 野生貉 免疫定位 林蛙油