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鸡减 蛋 综合征 病毒SD-YS株的分离鉴定和免疫原性研究 2024年 为了解蛋 鸡群中鸡减 蛋 综合征 病毒(egg drop syndrome virus,EDSV)的流行特点,筛选免疫原性良好的疫苗毒株,将山东潍坊市某养鸡场疑似EDSV感染鸡的输卵管组织进行病毒分离,对分离毒株进行血清学特异性鉴定、PCR鉴定和攻毒试验。病毒分离培养结果显示:分离株SD-YS可在易感鸭胚中增殖,血凝效价为2^(15)~2^(18),病毒含量为10^(7.7) EID50/0.1 mL。交叉血凝抑制试验结果显示:分离病毒液呈EDSV阳性。PCR鉴定结果显示:分离株SD-YS可扩增出长约2000 bp的特异性目的条带,与标准株AV127株和6株EDSV参考毒株的序列98.9%~99.4%同源。攻毒试验结果显示:SPF鸡免疫由SD-YS株制备的灭活疫苗(0.2 mL/羽)后,可获得良好的HI抗体(8.9log2),当HI抗体效价≥7log2时,免疫鸡可获得有效的攻毒保护。结果表明,分离毒株SD-YS为EDSV,具有良好免疫原性,可作为EDSV灭活疫苗的候选毒株。 王秀丽 郑世磊 刘新文 吕希凤 刘慧芬关键词:鸡减蛋综合征病毒 免疫原性 靶向鸡减 蛋 综合征 病毒的抗体与检测鸡减 蛋 综合征 的试剂盒 本申请提供一种靶向鸡减 蛋 综合征 病毒的抗体与检测鸡减 蛋 综合征 的试剂盒。本申请的抗体可识别鸡减 蛋 综合征 病毒不同株,而不与禽腺病毒I群4型(FAdV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)等病毒发生交叉反应,因此可用于检测EDSV病... 毛娅卿 孔冬妮 王嘉 李俊平 薛麒 邓永 翟天舒 刘丹 侯力丹 黄小洁鸡减 蛋 综合征 病毒中和性单克隆抗体的制备、鉴定及在双抗体夹心ELISA中的应用 2024年 为了制备针对鸡减 蛋 综合征 病毒(EDSV)的中和性单克隆抗体,首先纯化得到重组EDSV纤维蛋 白,经血凝试验(HA)鉴定纤维蛋 白的血凝活性,HA效价为1∶2~7。之后将纤维蛋 白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,小鼠血清的间接酶联免疫吸附试验(iELISA)效价最高达到1∶409 600,间接免疫荧光试验(IFA)效价最高达到1∶12 800。取效价最高免疫小鼠脾细胞进行细胞融合制备杂交瘤细胞,结合iELISA和IFA检测,经过多轮亚克隆,最终成功获得了2株稳定分泌中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株9G12和10E11。iELISA结果显示,单克隆抗体9G12和10E11的腹水效价分别为1∶128 000和1∶1 020 000;IFA效价分别为1∶2 000和1∶8 000。Western blot检测结果显示,单克隆抗体9G12和10E11均不能识别变性的EDSV纤维蛋 白,表明二者识别纤维蛋 白的构象型表位。病毒中和试验结果表明,单克隆抗体9G12和10E11均具有中和活性,中和效价分别为1∶2~7和1∶2~4。亚型鉴定表明,这2种单克隆抗体的轻链均为Kappa型,重链均为IgG1亚型。将基于单克隆抗体9G12和10E11建立的双抗体夹心ELISA方法应用于临床检测EDSV抗原,与荧光定量PCR检测结果的符合率为91.7%。综上,成功筛选出9G12和10E11杂交瘤细胞株,二者分泌抗EDSV特异性抗体,且这2种抗体具有中和EDSV感染活性,可应用于EDSV的临床检测。 魏蔷 李青梅 金前跃 宋亚鹏 白怡霖 张改平关键词:减蛋综合征病毒 纤维蛋白 中和性单克隆抗体 双抗体夹心ELISA 减 蛋 综合征 病毒抗体胶体金免疫层析试纸条的研制及初步应用2024年 为建立快速检测减 蛋 综合征 病毒(EDSV)抗体的方法,基于EDSV的Fiber蛋 白,制备快速检测EDSV抗体的免疫层析试纸条,为养禽业提供针对病原微生物的感染预警及免疫评估。利用胶体金标记EDSV Fiber蛋 白抗原为探针,将羊抗鸡IgG和抗Fiber蛋 白的抗体包被到硝酸纤维膜上,分别作为质控线和检测线,对家禽EDSV抗体水平进行监测。结果表明,制备的EDSV免疫层析试纸条具有高度特异性,与其他家禽病毒抗体无交叉反应,仅与EDSV抗体反应,在试纸条上产生可见的检测线;并且制备的试纸条具有高度稳定性,在室温条件下可至少保存6个月。应用制备的检测EDSV抗体的免疫层析试纸条对从河南、安徽、山东等地养鸡场采集的576份鸡血清样本检测,与血凝抑制试验(HI)结果进行平行比较,二者的Kappa值为0.878,具有良好一致性。综上,制备的检测ESDV抗体的免疫层析试纸条具有高度的特异性、敏感性、稳定性和易操作性,对EDSV抗体的临床检测具有实际应用价值。 宋亚鹏 孙亚宁 刘琳 杨继飞 李新生 魏蔷 张改平关键词:减蛋综合征病毒 血凝抑制试验 减 蛋 综合征 病毒Knob-S蛋 白的表达和免疫原性研究2024年 为研究减 蛋 综合征 病毒亚单位疫苗,构建了表达减 蛋 综合征 病毒(Egg drop syndrome virus,EDSV)Knob-S蛋 白的大肠杆菌重组菌株,成功表达出可溶性的Knob-S蛋 白,血凝(Hemagglutination,HA)和交叉血凝抑制(Hemagglutination inhibition,HI)试验结果表明,该蛋 白具有良好的生物学活性。分别以HA效价为1:32、1:64、1:128的Knob-S蛋 白制备油乳剂灭活疫苗,免疫147日龄SPF鸡21 d后的HI抗体检测结果显示,HA效价为1:64和1:128制备疫苗免疫组可产生良好的HI抗体(≥7.1log2),攻毒结果显示,当HI抗体效价≥6log2时可提供有效的攻毒保护。结果表明,表达的Knob-S蛋 白具有良好免疫原性,可作为减 蛋 综合征 病毒亚单位疫苗制备的候选毒株。 王秀丽 时宏超 刘新文 祝洪伟 刘大卫 于可超 夏娜关键词:免疫原性 蛋 鸡减 蛋 综合征 的诊断和防治2023年 减 蛋 综合征 是一种由腺病毒引起的以产蛋 量和蛋 品质降低为主要症状的传染性疾病。一旦发生本病,蛋 鸡群的生产性能会严重下降,给养殖场造成巨大的经济损失。1病原简介蛋 鸡减 蛋 综合征 (Egg drop syndrome,EDS)是一种由腺病毒引起的主要感染蛋 鸡的病毒性疾病,其特征 是蛋 鸡产蛋 量显著下降。腺病毒是一种非包膜的DNA病毒,直径约70~80 nm。 相丹丹关键词:减蛋综合征 病毒性疾病 蛋鸡群 DNA病毒 蛋品质 一种抗减 蛋 综合征 的单克隆抗体及其应用 本发明提供一种抗减 蛋 综合征 的单克隆抗体及其应用。分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株6F3H,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2021286,保藏地址为武汉大学,保藏时间为2021年10月20日。其... 余清卫 朱进华 王春笋 李清兰 孙静 苑述友 张洪文 申郑毅 赵逢冰 毛伟斌 杜勇杰 刘书平 刘家欣 刘长岗 张吉昌 戈林兴 王泽仁 马明扬 王金好 韩露 刘凡 张栓玲 李峥 王哲一种鸡传染性喉气管炎、减 蛋 综合征 二联多表位疫苗 本发明涉及一种用于预防鸡传染性喉气管炎和减 蛋 综合征 的融合蛋 白。具体地,利用基因重组技术,将8段与鸡传染性喉气管炎病毒gB、gD、gE蛋 白相关的抗原表位多肽以及6段与减 蛋 综合征 病毒Penton、Fiber蛋 白相关的抗原表位... 李殿明 蒲勤 张晓丹 田春辉 齐春梅 刘甜甜 任百亮 张导春 党将将一种检测鸡减 蛋 综合征 病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用 本发明涉及一种检测鸡减 蛋 综合征 病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。双抗体夹心ELISA试剂盒包括:包被有鼠抗EDSV Fiber蛋 白单克隆抗体5G4的酶标板、HRP标记的鼠抗EDSV Fiber蛋 白另一单克隆抗体6... 魏蔷 张改平 刘运超 宋亚鹏 柴书军禽减 蛋 综合征 病毒荧光RAA检测的引物探针组、试剂盒及检测方法 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及禽减 蛋 综合征 病毒荧光RAA检测的引物探针组、试剂盒及检测方法。本发明的引物探针组,包括上游引物、下游引物和探针;上游引物、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID... 王新卫 王浩千 刘华园 杨霞 陈陆 赵军 高航冉 王景景 何素芬 杨博达
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