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双价痢疾菌苗粘膜免疫保护机制及其作为基因治疗载体的初步探讨: 已知机体95﹪以上的感染发生在粘膜或由粘膜入侵,尤其是呼吸道和消化道粘膜,直接面对外界环境,时时刻刻接触大量繁杂的抗原,包括病原体.因此,粘膜是病原体感染和疫苗免疫最重要也是最常见的途径.和系统免疫相比,粘膜具有其独特的...; 石辛甫; 关键词：双价痢疾菌苗粘膜免疫基因治疗; 文献传递

双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后不同部位淋巴细胞表型的变化: 2003年; 目的:观测双价痢疾工程菌苗滴鼻免疫小鼠后,不同时间、不同部位淋巴组织细胞表型的变化,探讨痢疾菌苗滴鼻免疫对黏膜和系统免疫应答的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为3组,每组30只,分别以FSM-2117和FS-5416痢疾菌苗经滴鼻途径免疫小鼠4次,菌量依次为5×106、1×107、4×107和4×107CFU/只,对照组给予PBS,间隔2 wk。4次免疫后7、30和90 d活杀,分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP结淋巴细胞,采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化。结果:4次免疫后7 d,小鼠鼻相关淋巴组织(NALT)、鼻通道(NP)和Peyer’s结(PP)淋巴细胞中,CD3+T细胞数均显著增加,其中以CD4+T细胞增加为主。FSM-2117免疫组的脾细胞中B220+细胞显著增加;而FS+5416免疫组的脾细胞中CD3+T细胞显著增加。4次免疫后30 d,NALT、NP和脾淋巴细胞仍出现上述变化;而90 d,仅NALT和NP淋巴细胞出现上述同样变化。结论:两株双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后,能有效地诱导黏膜和系统免疫应答,且持续时间较长,但该免疫应答的减弱是从距免疫部位较远的部位而开始的。; 舒翠莉高杰英彭虹徐辉王华陈洁石辛甫; 关键词：滴鼻免疫淋巴细胞表型流式细胞术

不同表型双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后黏膜和系统记忆反应观测被引量：4: 2002年; 目的　观测 5株 2类不同表型的双价痢疾菌苗滴鼻免疫后所引起的黏膜和系统的记忆反应 ,为痢疾菌苗的构建提供理论依据。方法　以小鼠滴鼻免疫为模型 ,3次免疫 (间隔 2周 )后 ,2 0周再次免疫 ,分别于 3次免疫及 2 0周加强免疫后第 7天 ,收取鼻咽、肺、小肠及阴道冲洗液和血清 ,应用ELISA方法检测福氏、宋内氏特异性抗体。结果　 2类双价菌苗株滴鼻免疫 3次后 ,多个黏膜部位及血清均产生了抗原特异性sIgA、IgG ,较PBS对照组有明显升高 ;2 0周后再次加强免疫 ,仍可诱导黏膜及系统的免疫反应 ,但较 3次免疫后水平明显降低。结论　 2株双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后可诱导多个黏膜及系统的特异性抗体产生 ,并可产生一定时间的记忆反应。; 石辛甫邢丽彭虹高杰英; 关键词：双价痢疾菌苗特异性抗体滴鼻免疫

双价痢疾菌苗免疫小鼠后抗体记忆反应的观测被引量：2: 2001年; 目的 :FSM 2 117和FS 5 416是我室构建的具有不同生物表型的福氏、宋内氏双价痢疾菌苗株 ,前者不表达侵袭蛋白 ,无侵袭力 ,而后者表达侵袭蛋白 (Ipa) ,具有侵袭力。拟观测两株菌苗FSM 2 117(Ipa- )、FS 5 416 (Ipa+ )免疫后所引起的肠粘膜局部和系统中的免疫记忆反应 ,为研制痢疾菌苗提供理论依据。方法 :以小鼠灌胃免疫为模型 ,3次免疫后 ,间隔 3个月再次免疫 ,第 7天取血清和小肠冲洗夜 ,应用ELISA方法检测福氏、宋内氏特异性抗体。结果 :两菌苗株免疫组 ,血清中及局部抗原特异性sIgA、IgG抗体明显升高。两株菌苗与对照组相比 ,都具有显著差异。结论 :两株双价痢疾菌苗免疫小鼠后。; 石辛甫徐辉彭虹陈志华邢丽高杰英; 关键词：双价痢疾菌苗特异性抗体小鼠细菌性痢疾

双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠诱导粘膜和系统免疫反应的研究: 1.准确定位小鼠NALT,分离并鉴定NALT和NP淋巴细胞,纯度分别可达到90﹪、95﹪以上;二者与其它淋巴细胞形态和细胞表型均不同.NALT是滴鼻后的免疫诱导部位,而鼻通道粘膜则是其效应部位.2.滴鼻免疫能有效的诱导共...; 舒翠莉; 关键词：双价痢疾菌苗粘膜免疫滴鼻免疫特异性抗体; 文献传递

双价痢疾菌苗角结膜免疫豚鼠后泪液中特异性抗体的检测: 2001年; 目的 :研究痢疾杆菌侵袭蛋白与局部免疫反应的关系 ,为痢疾菌苗的研制提供理论依据。方法 :用表达和不表达侵袭蛋白 (Ipa+ /Ipa-)的两株福氏、宋内氏双价痢疾菌苗经角结膜免疫豚鼠 ,并分别用福氏、宋内氏毒株攻击 ,BA ELISA方法检测豚鼠泪液中特异性抗体升高情况。结果 :发现角结膜免疫后豚鼠泪液中特异性双价抗体水平较对照显著升高 ,差别具有统计学意义 ,Ipa+ 菌苗免疫组宋内氏抗体水平较Ipa-免疫组升高 ,差别具有统计学意义 ;攻击后 ,两免疫组局部抗体呈二次反应变化。结论 :侵袭蛋白的表达可加强痢疾菌苗诱导的局部抗体水平。两株双价痢疾菌苗均有较好的免疫原性。; 石辛甫邢丽陈志华彭虹高杰英; 关键词：双价痢疾菌苗特异性抗体免疫生物学

不同表型的双价痢疾菌苗的滴鼻免疫研究: 2001年; 为了探讨滴鼻免疫不同表型的双价痢疾菌苗的免疫效果 ,应用FSM 2 117(Ipa )及FS 5 40 2 (Ipa+)、FS 5 411(Ipa+)、FS 5 414(Ipa+)、FS 5 416 (Ipa+) 5株菌苗株分别滴鼻免疫小鼠 ,4× 10 7CFU/只 ,间隔 14d ,3次免疫后第 7天收集血清和小肠、鼻咽、肺、阴道冲洗液 ,ELISA法检测其中特异性福氏、宋内LPSIgA和IgG抗体水平 ,发现滴鼻免疫能够诱生血清中的双价IgA、IgG抗体显著升高 ,Ipa+株较Ipa 株升高显著 (P <0 0 1)。同时诱生鼻咽、肺、小肠内特异性抗体升高 ,尤其是生殖道冲冼液内抗体升高极为明显。表明鼻粘膜免疫不仅诱导多个粘膜部位 (特别是生殖道 )的抗体反应 ,且能诱导系统免疫反应 ,是一个安全有效的免疫途径。研究中发现侵袭蛋白表达在鼻粘膜部位能够显著加强系统特异性抗体生成。; 石辛甫邢丽徐辉陈志华舒翠莉彭虹高杰英; 关键词：滴鼻免疫

双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠诱导粘膜与系统免疫反应被引量：17: 2001年; 目的 :探讨双价痢疾菌苗滴鼻免疫后对小鼠不同粘膜部位和系统免疫部位的影响。方法 :BALB/c小鼠随机分为3组 ,每组 2 0只 ,FSM 2 117或FS 5 416 4× 10 7CFU/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔 2w ,3次免疫后 7d活杀 ,分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP及MLN淋巴细胞 ,采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化 ;收集鼻咽、肺、肠、生殖道冲洗液和血清 ,采用ELISA法检测其中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA和IgG。结果 :两株菌苗经鼻内免疫都诱发了鼻咽、肺、胃肠道和生殖道等不同粘膜部位及血清中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA、IgG的显著增加 (P <0 0 1) ;NALT、NP和PP淋巴细胞中CD3+ T细胞显著增加 ,其中以CD4+ T细胞增加为主 ;FSM 2 117免疫组的脾细胞中B2 2 0 + 细胞显著增加 ,而FS 5 416免疫组的脾细胞中CD3+ T细胞显著增加。结论 :两株菌苗经鼻粘膜免疫均可诱导不同粘膜部位及系统免疫反应的发生 ,鼻粘膜是一个安全有效的免疫途径。; 舒翠莉高杰英彭虹徐辉陈志华王华陈洁石辛甫邢丽; 关键词：滴鼻免疫淋巴细胞表型流式细胞术

双价痢疾菌苗不同途径免疫小鼠对脾细胞及GALT中ASC影响的实验研究被引量：3: 2001年; 目的：观察侵袭蛋白表达阴性（FSM-2117）和阳性（FS-5416）的两株双价痢疾菌苗经不同途径免疫小鼠后，脾细胞和粘膜相关淋巴组织（gut associated lymphoid tissues，GALT）中抗体分泌细胞（antibody secreting cell，ASC）的变化，以探讨免疫途径及侵袭蛋白表达与否对痢疾菌苗免疫效果的影响。方法： BALB／c小鼠随机分为 3组，每组 20只， FSM－2ll7或 FS-5416 4 x10^7CFU分别经滴鼻、灌胃及肠内注射3种途径免疫小鼠，间隔2w，第3次免疫后7d活杀分离脾、小肠pp及MIN淋巴细胞，采用BA－ELISASPOT法检测其中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA和IgG分泌细胞。结果：滴鼻途径及小肠内免疫都能够诱生脾细胞特异性IgA-ASC、IgG-ASC显著升高（P＜0．01）；仅滴鼻免疫组Ipa+株较Ipa-株升高显著（P＜0．01）。滴鼻和小肠内免疫同时诱生肠GALT中派伊尔小结（Payer's patch,PP)和肠系膜淋巴结（mesenteric lymph node,MLN)淋巴细胞ASC显著升高（P＜0．05，P＜0．01），但株间比较无统计学差异。而同等剂量的灌胃免疫未能诱发脾细胞及GALT特异性ASC升高。结论：鼻粘膜和小肠内免疫可以有效地诱导脾脏和GALT淋巴细胞的免疫反应，且显著降低免疫原用量（本实验滴鼻剂量为常规灌胃的1/20），是一个安全有效的免疫途径。研?; 徐辉高杰英彭虹舒翠莉邢丽石辛甫; 关键词：滴鼻免疫肠内免疫 GALT ASC

两株双价痢疾菌苗免疫小鼠后GALT中CD4^+、CD8^+ T细胞亚群的反应被引量：3: 1999年; 目的ＦＳＭ－２１１７和ＦＳ－５４１６是两株具有不同生物表型的福氏、宋内氏双价痢疾菌苗株，ＦＳＭ－２１１７无侵袭表型，无溶血活性，不表达侵袭蛋白抗原（Ｉｐａ－），ＦＳ－５４１６则为Ｉｐａ＋，本实验是为了观测两株菌苗（Ｉｐａ－，Ｉｐａ＋）免疫后引起的肠粘膜相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）中的细胞免疫反应，以探明痢疾菌苗在肠粘膜的免疫保护机制。方法以ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分成两组，每组２５只，灌胃免疫ＦＳＭ－２１１７及ＦＳ－５４１６，８×１０８ＣＦＵ／只，分别在１，４，７，１０，１３天随机取各组小鼠５只分离ＧＡＬＴ淋巴细胞；同时设一组ＰＢＳ对照组，以间接免疫荧光法检测ＧＡＬＴ中诱导部位〔派伊尔小结（ＰＰ）、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）〕及效应部位〔上皮间淋巴细胞（ＩＥＬ）、粘膜固有层（ＬＰＬ）〕Ｔ细胞亚群的变化，荧光显微镜计数２００个细胞计算阳性率。结果用ＳＡＳ软件，单因素方差分析，表明两株双价菌苗株均可引起肠粘膜ＧＡＬＴ中ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞亚群改变，不同粘膜部位免疫反应不同。诱导部位（派氏小结、肠系膜淋巴结）ＣＤ４＋细胞亚群明显升高，末次免疫后第７天达峰值，而后迅速下降；在效应部位，粘膜固有层表现为ＣＤ４＋细胞亚群明显?; 石辛甫高杰英彭红邢丽刘育红陈志华曾关富; 关键词：肠粘膜淋巴组织

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