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实时荧光定量反转录多聚链反应技术检测TEL-AML1融合基因阳性急性淋巴细胞白血病被引量:1
2012年
目的建立实时荧光定量反转录(qRT)-PCR方法检测小儿急性淋巴细胞白血病TEL-AML1融合基因的表达水平,探讨其临床意义。方法采用TaqMan探针qRT-PCR技术,2-△△ct相对定量法动态检测20例TEL-AML1融合基因阳性急性淋巴细胞白血病患儿初诊期(20例)、缓解期(20例)、复发期(2例),及15例骨髓形态学正常的非肿瘤非血液病儿童作为对照组的TEL-AML1融合基因表达水平。结果初诊期、缓解期、复发期及对照组的TEL-AML1中位数表达水平分别为0.62、0.31、0.76、0.23,初诊期和复发期基因表达水平均显著高于缓解期及对照组(Pa<0.05),初诊期和复发期的表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。诱导缓解第33天TEL-AML1水平高表达(>对照组的P75)患儿的复发率、无病生存率期间显著高于和低于低表达患儿(Pa<0.05)。20例患儿首次诱导治疗第33天骨髓均达完全缓解,高表达8例均在强化治疗、维持治疗后TEL-AML1水平下降,但其中1例患儿在维持治疗期间TEL-AML1水平又异常升高后复发,另1例患儿在停药后2个月TEL-AML1水平再上升后复发。诱导缓解第33天qRT-PCR检测8例微小残留病阳性,骨髓形态学、染色体核型分析均阴性,实时反转录-PCR检测5例阳性。结论 qRT-PCR是一种快速、灵敏度高、特异性好的方法,诱导缓解第33天TEL-AML1融合基因水平可用于早期判断预后,TEL-AML1水平的变化可用于监测微小残留病、预测复发,指导个体化治疗。
张熔廖静李戈孙怀强石毓君杨季云
关键词:TEL-AML1微小残留病白血病
反转录多聚链反应联合间接免疫荧光法对儿童下呼吸道非典型病原体感染早期诊断的意义被引量:4
2010年
目的评价实时反转录多聚链反应(RT-PCR)联合间接免疫荧光(IIF)法(联检法)对提高儿童下呼吸道非典型病原体感染检出率的效果。方法临床可疑非典型肺炎患儿152例采用联检法检测肺炎支原体(MP)、嗜肺军团菌(LP)、肺炎衣原体(CP)和Q热立克次体(QP)感染情况,同时采用间接血凝法、免疫荧光法或微量凝聚试验等多种方法进行验证。对比分析各种检测方法对MP、LP、CP和QP的检出率。并以此检验结果为依据,对所有检出的非典型病原菌感染病例使用敏感抗生素,观察治疗后患儿心率、呼吸、体温和WBC变化及临床症状改善情况。采用SPSS 13.0软件进行统计学分析。结果单独采用IIF法与RT-PCR法检测比较,对MP、LP、CP和QP的检出率差异均无统计学意义(Pa>0.05);采用联检法时,对MP和LP感染的检出率和总检出率均明显高于其余3种检测方法(Pa<0.05)。根据联检法结果选用敏感抗生素治疗,临床疗效较好。结论使用联检法可明显提高MP和LP感染的检出率和总的检出率,有效避免漏诊,但对能否提高CP和QP感染的检出率,仍有待进一步研究。
刘国英樊冒
关键词:反转录多聚酶链反应间接免疫荧光下呼吸道儿童
反转录多聚链反应核心抗原和抗体检测丙肝的方法比较
2008年
目的通过应用联免疫法(ELISA)分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),和反转录多聚链反应(RT-PCR)检测丙肝RNA,来了解三种方法对丙肝病毒(HCV)感染检测的优点和缺点。方法采用HCV游离核心抗原试剂盒、HCV-AbELISA试剂盒和丙肝病毒PCR检测试剂盒,对来自入院前或手术前筛查的180例临床样本和24例丙肝或疑似丙肝患者的血清样本进行HCV-cAg,HCV-Ab和HCV-RNA检测。结果200例筛查样本HCV-Ab均为阴性,HCV-cAg阳性3例,其中RT-RNA阳性1例;25例HCV-Ab阳性的样本检出HCV-cAg阳性13例,RT-RNA阳性15例。HCV-cAg与RT-RNA符合率为86.67%(13/15)。结论HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂,反转录多聚链反应(RT-PCR)是一个很敏感的方法,但其技术复杂,环境、条件要求较高,不易被多数实验室接受和推广,可用来对HCV感染作确证实验。
焦扬
关键词:丙肝病毒抗体丙肝病毒核心抗原反转录多聚酶链反应
评价反转录多聚链反应检测大肠癌患者血清人端粒反转录mRNA表达的敏感性及特异性:对照组比较被引量:1
2005年
目的:评价反转录多聚链反应检测大肠癌患者血清人端粒反转录mRNA的可行性研究。方法:收集2004-01/11解放军第二军医大学长海医院肿瘤内科和普外二科54例各期大肠癌患者外周静脉血,采用反转录多聚链反应方法检测血清中人端粒反转录mRNA的表达,并与同期20例炎症性肠病患者及20例健康者作对照。分析其敏感性和特异性。结果:①血清中人端粒反转录mRNA表达的敏感性:大肠癌患者63%(34/54),炎症性肠病患者10%(2/20),健康对照者0。②特异性:相对于炎症性肠病组,特异性为94%(34/36),相对于健康对照组特异性为100%(34/34)。结论:反转录多聚链反应方法从血清中检测人端粒反转录mR-NA是足够敏感的,并具有相对特异性。尽管结果产生于初步的实验条件下,但是为从肿瘤患者其他体液中扩增出肿瘤信使RNA提供了新的思路。
李开春王雅杰万涛
关键词:结直肠肿瘤血清学逆转录聚合酶链反应
罗氏沼虾病毒复合反转录多聚链反应检测的方法
本发明公开了一种罗氏沼虾病毒复合反转录多聚链反应检测的方法,其步骤是:首先设计两种病毒的特异引物;其次是组织RNA提取;第三是反应体系;第四是扩增体系。本发明灵敏度高,检测时间短,可以同时检测两种病毒,适合于罗氏沼虾肌...
石正丽
文献传递
应用反转录多聚链反应(RT-PCR)对鸡传染性法氏囊病毒的基因检测研究被引量:4
1995年
参考Cul株核酸序列自行设计一对20bp序列为引物,经反转录和PCR扩增传染性法氏囊病毒(IBDV)核酸高度保守的Vp4编码区中150bp的片段,用于检测IBDV。对德国Cul株、美国标准强毒STC和变异株1084E、中国q801以及7个国内野外分离株分别进行扩增,同时对新城疫病毒(NDV)、马立克氏病毒(MDV)、禽呼肠孤病毒(REOV)、禽腺病毒(HAA)、Vero细胞、SPF鸡法氏囊组织进行扩增后,2%琼脂糖凝胶电泳分析,11株IBDV都出现分子量大小与设计相符合的DNA扩增带,4种其他病毒、囊组织和Vero细胞都未出现任何扩增带。建立了直接采用细胞毒或组织毒进行PCR的快速简便的核酸提取方法,应用二级PCR扩增出了与一级PCR相符的更加清晰的扩增带。
陶素华孙延涛乔岩瑞韦莉
关键词:IBDV反转录鸡病
Yes相关蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义被引量:2
2016年
目的:探讨 Yes 相关蛋白(YAP)在非小细胞肺癌组织中的表达与临床病理特征的关系及其在非小细胞肺癌发生发展中的作用。方法采用实时定量反转录多聚链反应(RT-PCR)、免疫组织化学及 Western blot 方法,分别检测非小细胞肺癌患者的癌组织、正常肺组织中 YAP 蛋白的表达情况,采用 SPSS 17.0统计软件包进行统计学分析,计数资料比较采用卡方检验,应用非配对 t 检验检测非小细胞肺癌组织和正常肺组织中 YAP mRNA 表达差异,以 P<0.05为差异有统计学意义。结果非小细胞肺癌组 YAP 阳性率(65%)高于正常肺组织组(5%)(χ2=43.2,P=0.000)。YAP 阳性率与非小细胞肺癌的病理分级(高、中、低分化阳性率分别为35.9%、67.6%和87.2%)密切相关(χ2=24.837,P=0.000);淋巴结转移者 YAP 的表达率(76.1%)与无淋巴结转移者(58.1%)相比差异也有统计学意义(χ2=4.03,P=0.045)。YAP mRNA 在非小细胞肺癌组织中的相对表达量(0.4013±0.0783)是正常肺组织(0.0499±0.0084)的8.04倍,差异具有统计学意义(t=3.21,P<0.001)。结论 YAP 可能参与了非小细胞肺癌的发生和发展的过程;可能成为判断非小细胞肺癌发生发展和评价预后的有效参考指标之一,对于非小细胞肺癌的早期预测可能具有重要的临床意义。
班媛媛张伟李道胜
关键词:YES相关蛋白反转录多聚酶链反应免疫组织化学
丙肝病毒核心抗原检测临床应用研究被引量:8
2012年
应用联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),了解丙肝病毒核心抗原检测的意义。采用湖南康润公司生产的HCV游离核心抗原试剂盒,对来自门诊或手术前筛查的850例临床样本进行了HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚链反应(RT-RNA)证实。850例筛查样本HCV-Ab阳性22例,其中HCV-cAg阳性14例,RT-RNA阳性16例;828例HCV-Ab阴性的样本检出HCV-cAg阳性4例,其中RT-RNA阳性3例。HCV-cAg与RT-RNA符合率为83.33%(15/18)。HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂,敏感性高、特异性好、费用低廉。
李军
关键词:丙肝病毒抗体丙肝病毒核心抗原反转录多聚酶链反应
SOX10基因在先天性巨结肠患儿肠壁中的表达被引量:2
2012年
目的研究先天性巨结肠(HD)肠壁中性别决定区Y基因相关高可变区基因10(SOX10)的表达,了解HD在分子基础上的发病机制。方法分别取50例HD病例的手术标本狭窄段、移行段及扩张段为病例组,另随机取50例非HD手术病例标本作为对照组,提取其平滑肌组织总RNA,应用反转录(RT)-PCR扩增目的基因和看家基因片段,观察其病变段和正常段SOX10 mRNA的表达,并与看家基因在病变段和正常段的表达进行比较,并进行统计学分析。结果 SOX10 mRNA在HD患儿痉挛段(0.186 19±0.007 84)呈低表达,在扩张段(0.506 94±0.006 31)及对照组(0.594 35±0.006 29)呈高表达,痉挛段SOX10 mRNA的表达量与移行段(0.314 71±0.016 57)、扩张段及对照组比较,差异有统计学意义(F=16 384.220,P=0.000);而移行段、扩张段与对照组比较,差异亦有统计学意义(F=8 666.046,P=0.000)。结论 HD患儿结肠SOX10 mRNA的异常分布显示SOX10基因是出生后肠神经系统维持正常功能所必需的,SOX10 mRNA表达减少可引起肠管痉挛、狭窄,造成肠功能障碍。
李新宁曾甜莫丹石群峰罗树友苏乃伟
关键词:先天性巨结肠反转录多聚酶链反应
肝脏γ-氨基丁酸能系统对大鼠急性肝功能衰竭的改善作用及其机制研究
目的:已有文献报导,在肝脏中可检测到较高浓度的γ-氨基丁酸(GABA)并且在肝细胞中存在一些GABAA受体亚单位。本研究试图进一步证明肝脏内存在GABA能系统,并探讨该系统在改善大鼠急性肝衰竭中的作用及其机制。   方...
王双连
关键词:Γ-氨基丁酸急性肝功能衰竭信号转导通路反转录多聚酶链反应免疫组化

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王丽娜
作品数:1被引量:5H指数:1
供职机构:青岛市传染病医院
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袁文臻
作品数:61被引量:184H指数:7
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