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- 黄瓜发根农杆菌转化体系的建立
- 2025年
- 黄瓜是根癌农杆菌介导遗传转化获得转基因植株较为困难的物种之一,尽管黄瓜的基因组测序已经完成,但大多数基因的功能尚未确定。发根农杆菌介导的毛状根转化能高效地诱导植物产生转基因根,为研究相关基因在根中的生物学功能提供了一种方便、快捷的途径。本研究建立了由发根农杆菌介导的高效、快速的适用于在黄瓜活体上诱导产生转基因根的转化方法。利用携带红色荧光蛋白基因DsRed2的发根农杆菌K599穿刺接种不同基因型黄瓜幼苗的下胚轴,在高湿状态下培养2周左右。在3种不同基因型黄瓜幼苗的下胚轴穿刺部位生长出毛状根,通过红色荧光蛋白观察及PCR验证,表明89%~94%的穿刺植株携带有转基因毛状根,新生毛状根中转基因根的比例约为55%。由此建立了在活体黄瓜下胚轴诱导产生转基因根的方法,红色荧光蛋白基因DsRed2可以作为报告基因来筛选转基因根与非转基因根,剪去非转基因根和主根后进行移栽种植,即为携带有转基因根而地上茎为非转基因的野生型黄瓜植株,该方法为大规模分析黄瓜根中相关基因的功能、地上-地下信号转导等研究奠定了基础。
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- 关键词:黄瓜发根农杆菌红色荧光蛋白
- 一种发根农杆菌介导的栓皮栎遗传转化方法
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- 一种发根农杆菌介导的向日葵瞬时转化体系及其构建方法
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- 一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法
- 本发明公开了一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,具体涉及生物转基因育种领域,本发明通过使用发根农杆菌介导的方法,将外源基因质粒转化到发根农杆菌感受态细胞中,PCR鉴定含有目的基因的阳性菌,并通过该农杆...
- 李强魏健常玉诺陈雪平罗双霞李丽宋利军张志硕张巍巍
- 一种发根农杆菌介导的何首乌转基因毛状根遗传转化体系的建立方法
- 本发明属于植物组织培养技术和植物转基因技术领域,具体涉及一种发根农杆菌介导的何首乌转基因毛状根遗传转化体系的建立方法。本发明剪取带芽尖的何首乌茎段作为外植体,利用发根农杆菌ATCC15834侵染何首乌外植体后产生毛状根,...
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- 一种发根农杆菌介导的番木瓜毛状根遗传转化方法及番木瓜转基因阳植株
- 本发明提供了一种发根农杆菌介导的番木瓜毛状根遗传转化方法及番木瓜转基因阳植株,属于植物基因工程技术领域。本发明提供了一种不依赖组培的番木瓜遗传转化方法,可直接利用发根农杆菌处理外植体培养得到番木瓜转基因阳性植株,不用经过...
- 岳晶晶林增明瑞光
- 一种基于发根农杆菌介导的豌豆毛状根转化方法
- 本发明公开了一种基于发根农杆菌介导的豌豆毛状根转化方法,包括以下步骤:步骤一:农杆菌菌液制备与保存;步骤二:豌豆无菌苗的制备;步骤三:准备农杆菌菌液;步骤四:准备外植体;步骤五:外植体的侵染与共培养;步骤六:诱导毛状根。...
- 李冠李娜娜贾凯华田汝美
- 一种发根农杆菌介导的向日葵毛状根转化体系
- 本发明公开了一种发根农杆菌介导的向日葵毛状根转化体系,属于遗传转化技术领域。该转化体系包括如下步骤:向日葵催芽、将萌发的向日葵种子转入育苗穴盘,保鲜膜包裹保湿,光照培养箱中培养;培养含有pBI121‑GUS质粒发根农杆菌...
- 孔祥久闫宁宁张键赵君路妍张晓萝张文兵杨佳乐杨剑锋李铁贾硕
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