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变性高效液相色谱技术在快速检测食品微生物中的应用研究被引量：8: 2019年; 食品安全问题一直是社会各界重点关注的热点话题。为了保证食品质量和安全,有必要对流入市场的食品进行食品中微生物含量的检验。变性高效液相色谱技术因其自身特点以及检验的精确度相对较高、灵敏度和速度相对较快等特点,在微生物检测方面得到了广泛应用。本文主要对变性高效液相色谱技术的实际应用进入深入研究,从原理、特点等方面进行详细阐述。; 杨柳; 关键词：变性高效液相色谱技术食品微生物

变性高效液相色谱对于多重连接探针扩增产前诊断脊髓性肌萎缩症的补益作用被引量：3: 2019年; 目的探讨将变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)联合多重连接探针扩增(multiple ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术应用于脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)产前诊断的可行性.方法选取3个生育过SMAⅠ型患儿的家系,抽取亲代外周血样,并于孕16~24周穿刺抽取羊水10 mL,抽提DNA.通过STR位点检测排除母血污染.采用DHPLC法检测SMN基因的拷贝数,用MLPA试剂盒检测SMN1、SMN2以及参照基因的拷贝数.结果家系Ⅰ~Ⅲ的亲代经DHPLC检测均发现携带SMN1第7外显子杂合缺失.MLPA分析提示家系Ⅰ~Ⅲ的亲代均为SMA致病突变的携带者;家系Ⅰ胎儿携带SMN1基因第7、8外显子纯合缺失,且SMN2基因第7、8外显子存在杂合缺失,判断为SMA患者.家系Ⅱ胎儿SMN1基因第7、8外显子为纯合缺失,SMN2第7、8外显子拷贝数正常,判断为SMA患者.家系Ⅲ胎儿SMN1基因第7、8外显子为杂合缺失,且SMN2基因第7、8外显子为杂合缺失,判断为SMA携带者.结论DHPLC可以有效筛查SMA突变的携带者.对于SMA高风险家系,将MLPA应用于产前诊断可明确诊断胎儿SMN1基因缺失情况,降低其生育患儿的风险.; 谭玉杰王颢赵太坤成明张婵; 关键词：变性高效液相色谱脊髓性肌萎缩症产前诊断

变性高效液相色谱技术应用研究进展被引量：2: 2017年; 变性高效液相色谱技术是一种新型的筛选基因序列变异技术,具有单次检测量大、自动化操作度高等特点,本文介绍了变性高效液相色谱技术的工作原理,及其在科研、医疗上的应用。; 朱竟赫庞杰; 关键词：变性高效液相色谱 DHPLC

变性高效液相色谱技术鉴别猪牛源性成分的试验被引量：1: 2016年; 建立了检测动物源性食品中猪、牛成分的PCR结合变性高效液相色谱技术,为牛、羊成分的鉴别提供一种新的分子诊断技术。以猪、牛的线粒体DNA为靶基因,设计特异性PCR引物。双重PCR扩增后,DHPLC分析。经优化DHPLC最佳条件为:使用PS-DVB&C18 DNASep色谱柱(4.6 mm×50 mm,粒度3μm),设定50℃柱温,起始流动相为:45%缓冲液A和55%缓冲液B,流速0.9 m L/min;上样量:PCR产物5μL。结果表明:DHPLC法具有良好的特异性,仅能检出猪、牛源成分,而与羊、鸡、鸭源成分无交叉反应;方法的灵敏度可以达到1 000 copies核酸。; 杨娜王向军乔晴徐超; 关键词：变性高效液相色谱法

变性高效液相色谱技术在大豆品种鉴定中的应用被引量：1: 2015年; 单核苷酸多态性(SNPs)和插入-删除标记(In Del)在基因组中广泛分布,日益成为主要作物的重要遗传标记。利用变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测大豆品种的SNP和In Del的多态性,可为大豆种质的品种鉴定提供一种新型的快速检测方法。基于公共数据库中的大豆基因信息,筛选了3条DNA序列作为目标分析片段,以大豆种质粤夏119作为参比基因型,利用DHPLC技术平台对10份大豆品种进行了鉴定。结果表明:混合参比DNA后的大豆样本产生DHPLC谱图均具有多态性,谱型与测序基因型一一对应。综合3条目标片段的DHPLC特征谱图可以区分所有大豆品种。试验结果验证了DHPLC应用于大豆品种鉴定的可行性和可靠性。由于DHPLC分辨率高、快速、操作简单、安全等优点,在大豆的品种鉴定中具有良好的应用前景。; 彭梓谭建锡周慧平袁小雅朱金国王利兵; 关键词：SNP INDEL 大豆变性高效液相色谱技术

多重PCR-变性高效液相色谱快速检测单核细胞增生李斯特菌毒力基因方法的建立被引量：5: 2014年; 目的建立单增李斯特菌的多个靶基因快速检测手段,提高检测的准确性。方法根据单增李斯特菌4个毒力基因(hly、prfA、inlA、inlB)设计引物,通过优化引物浓度和引物组合,进行多重PCR扩增,产物经变性高效液相色谱(DHPLC)进行快速检测。结果出峰顺序依次为inlB、hly、inlA、prfA,扩增片段大小为146、210、255、388 bp,此方法具有良好的特异性,灵敏度可达到280 cfu/ml。结论本方法可以满足实际工作中食品微生物检测的要求。; 钱云开王海洋肖艳霞高飞李琳张会敏吴曦张进杰; 关键词：单增李斯特菌毒力基因变性高效液相色谱食源性致病菌

对虾白斑综合症病毒LAMP及变性高效液相色谱检测方法的建立与应用: 据对虾白斑综合症病毒（White Spot Syndrome Virus，WSSV）的基因保守序列，利用引物设计软件Primer Explorer V3，设计了六条引物，建立了一种对虾白斑综合症病毒的环介导等温扩增（lo...; 赵巍; 关键词：对虾白斑综合症病毒变性高效液相色谱技术基因序列传染机制; 文献传递

聚合酶链式反应-变性高效液相色谱技术在唐氏综合征筛查中的应用被引量：3: 2012年; 目的:探讨聚合酶链式反应-变性高效液相色谱技术(polymerase chain reaction-denaturing high performance liquidchromatography,PCR-DHPLC)在唐氏综合征筛查中的应用。方法:针对21号染色体上的基因座D21S1409、D21S1422、D21S1435和GATA163G03设计引物,PCR扩增唐氏综合征患儿样本和正常样本,DHPLC仪检测;同步进行外周血染色体核型分析,并以核型分析为金标准,评价PCR-DHPLC技术的准确性。结果:柱温50℃时,唐氏综合征患儿样本DHPLC检测结果呈现特异唐氏综合征峰。结论:PCR-DHPLC方法具有较高的敏感性和特异性,可用于唐氏综合征的高通量快速筛查。; 张丹妍马明福张丹媚朱一剑吕静赵乐天万凌侯志伟李练兵; 关键词：变性高效液相色谱唐氏综合征

应用变性高效液相色谱快速检测鉴定花生栽培品种的研究: 研究构建了基于变性高效液相色谱(DHPLC)的花生指纹图谱,建立了16种花生栽培品种快速检测鉴定技术。以16个花生品种的DNA为检测目标,选取3组花生微卫星DNA简单重复序列(SSR)引物对进行降落PCR(TouchDo...; 吴兴海林黎明谢宏峰; 关键词：变性高效液相色谱花生品种; 文献传递

应用变性高效液相色谱快速检测鉴定花生栽培品种的研究: 研究构建了基于变性高效液相色谱(DHPLC)的花生指纹图谱,建立了16种花生栽培品种快速检测鉴定技术。以16个花生品种的DNA为检测目标,选取3组花生微卫星DNA简单重复序列(SSR)引物对进行降落PCR(TouchDo...; 吴兴海林黎明谢宏峰; 关键词：变性高效液相色谱花生品种

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