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噬菌体展示技术被引量：1: 2011年; 噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽与噬菌体的一种衣壳蛋白融合表达,融合蛋白则表达在病毒颗粒的表面,而编码这个融合子的DNA则位于该病毒粒子内。噬菌体展示技术使大量随机多肽与其DNA编码序列之间建立了直接联系,可以通过检测病毒内部的DNA,使得各种靶分子的多肽配体通过淘选的体外选择程序而快速鉴定。其在生物医学的诸多领域有着广泛的运用。; 冯俊李丽刘海刘世喜; 关键词：噬菌体

噬菌体展示技术被引量：5: 2009年; 概述了噬菌体展示技术的基本原理,常用的噬菌体表面展示系统以及噬菌体展示技术的应用、展望等方面,并在抗原表位分析和疫苗的研制、人工抗体、多肽药物的开发等方面,进行了探讨。; 吴楚诸慧; 关键词：噬菌体

噬菌体展示技术被引量：1: 2006年; 噬菌体展示技术在天然蛋白表达方面应用广泛,常用的噬菌体表面展示系统主要有:丝状噬菌体、λ噬菌体和T4噬菌体等,目前用的较多的是T4噬菌体。T4噬菌体结构较大,遗传结构复杂,具有容量大、拷贝数高,可以展示的多肽或蛋白质范围广等优点,目前已经有多种蛋白采用T4噬菌体展示系统得到了表达。; 孟冬梅; 关键词：噬菌体展示技术 T4噬菌体蛋白表达丝状噬菌体拷贝数蛋白质

噬菌体展示技术被引量：7: 2006年; 噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。到目前为止,人们已开发出了单链丝状噬菌体展示系统、λ噬菌体展示系统、T4噬菌体展示系统等数种噬菌体展示系统。本文主要概述了噬菌体展示技术的基本原理、噬菌体展示系统研究以及技术特点等,并跟踪了目前该领域的最新研究进展和发展前景。; 贾球锋李丽芳张映; 关键词：噬菌体展示

基于噬菌体展示技术的一类脑动脉瘤特异性多肽: 本发明公开了基于噬菌体展示技术的一类脑动脉瘤特异性多肽，具体包括以下步骤：S1、筛选阶段：将15例脑动脉瘤患者血清、10例年龄相匹配的健康人血清，与噬菌体随机肽展示库进行淘选，通过二代测序和数据分析的筛选方法得到具有识别...; 郑树法康德智姚培森

基于噬菌体展示技术和纳米材料的电化学发光生物传感方法: 本发明公布了一种基于噬菌体展示技术和纳米材料的电化学发光生物传感方法。该方法涉及磁微球、捕获探针、噬菌体展示抗体或亲和体以及标记纳米材料等主要原料，构建了“捕获探针‑待测物‑噬菌体展示抗体/亲和体‑标记纳米材料”的夹心检...; 刘帅童朝阳刘冰王金玉闫增元王爱红方凯

基于噬菌体展示技术醛固酮特异性抗体的筛选: 2024年; 目的利用噬菌体展示技术及重组抗体构建技术筛选出特异性醛固酮(ALD)抗体,为ALD诊断试剂盒的研发提供原材料。方法取5只健康清洁级新西兰大白兔,将抗原ALD-血蓝蛋白(KLH)稀释至2 mg·L^(-1),采用背部多点注射方法对5只新西兰大白兔进行首次免疫,免疫剂量为每只1 mg;每隔2周进行1次免疫,且免疫剂量减少50%;从第3次免疫开始,每次免疫1周后采集大白兔耳缘静脉血,使用包被0.25 mg·L^(-1) ALD-BSA抗原的化学发光板,采用间接法和竞争法测定血清滴度;第5次免疫后选取血清效价高、特异性好的大白兔,取其脾脏和骨髓等组织。将脾脏组织研磨,采用TRIzol试剂一步法提取RNA,获取轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因序列。通过连接肽连接成单链片段(ScFv)并构建至噬菌粒载体Pcomb3xss中;然后,通过电转化方法将其导入大肠杆菌TG1,完成ALD ScFv噬菌体展示库构建。对文库进行3~5轮富集筛选,并挑取单克隆进行噬菌体上清制备,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)竞争法鉴定后送测,获得高竞争性克隆序列;将筛选得到的克隆序列插入至pCMV3表达载体,提取质粒后使用瞬时转染方法进行HEK293细胞转染;1周后,收取上清,应用亲和层析纯化及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)电泳鉴定其纯度及表达量。结果5只大白兔在第5次免疫后,间接法检测其血清效价结果显示,4#、5#大白兔血清在稀释32000倍后,效价仍>10000。竞争法检测结果显示,5#大白兔血浆样本低值与高值的比值为2:1,优于其他大白兔。选取5#大白兔进行噬菌体文库构建。使用常规聚合酶链反应扩增出VL及VH基因片段,经搭桥拼接成ScFv(VL+VH)后,琼脂凝胶电泳分析可看到750 bp左右大小条带,与最初设计的片段大小一致。ScFv经酶切连接电转至大肠杆菌TG1中,构建一个库容为4.73×10^(8) cfu·mL^(-1)的噬菌体文库。经3轮淘洗出库平皿挑取300个; 王素娟田晓平赵巧辉王天云; 关键词：噬菌体展示

基于噬菌体展示技术筛选和鉴定人源性HPV18VLP中和抗体: [目的]构建人源性Fab噬菌体抗体库,筛选出与HPV18VLP特异性结合的人源性Fab抗体,为HPV18中和抗体研发及基于抗原抗体复合物结构学指导的HPV疫苗设计提供参考。[方法]1.从接种人乳头瘤病毒（HPV）疫苗的1...; 顾亚茹; 关键词：噬菌体展示技术宫颈癌中和抗体分子对接

基于噬菌体展示技术的抗AbOmpA多肽的筛选及其抗菌作用研究: 赵惠

噬菌体展示技术筛选猪小肠上皮细胞穿透肽: 2023年; 为辅助抗菌药物进入动物细胞杀伤胞内致病菌,本试验利用噬菌体展示技术筛选猪小肠上皮细胞的穿透肽。通过噬菌体展示技术进行4轮体外生物淘洗,得到与猪小肠上皮细胞结合的多肽;经过4轮减数筛选,噬菌体回收率逐渐提高,酶联免疫吸附法(ELISA)测定单克隆噬菌体对猪小肠上皮细胞的亲和力,亲和力≥2的为阳性,将阳性噬菌体克隆提取DNA,将高重复率序列合成细胞穿透肽,同时合成与其氨基酸序列及结构相同但组合顺序不同的对照多肽,荧光FITC标签连接。检测多肽的抑菌活性、溶血活性和细胞毒性,荧光显微镜观察穿透肽的穿透性、激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测穿透肽在胞内的定位及强度。结果表明:4轮筛选噬菌体的回收率增长283倍;ELISA检测显示,随机挑选30个单克隆噬菌体,17个为阳性克隆;DNA测序得到2条高重复序列,SAYKMMA命名ICPP1和SSSISGL命名ICPP2;穿透肽及对照多肽无抑菌活性,溶血性较好,安全无毒对细胞活力无影响;荧光显微镜观察及激光共聚焦结果表明,ICPP1和ICPP2可穿透猪小肠上皮细胞膜,且ICPP1表现出更强的穿透性;流式细胞仪结果显示,ICPP1的胞内平均荧光强度明显高于ICPP2,且呈时间剂量依赖,有较好的热稳定性和较低的血清稳定性。本试验筛选出了安全可穿透猪小肠上皮细胞的穿透肽(ICPP1),可作为治疗猪肠道胞内菌的抗菌肽的载体。; 刘思佳徐晓东姜宁潘春媛宋军赵磊赵芳芳李沐阳张爱忠; 关键词：噬菌体展示技术肽库细胞穿透肽

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