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产气荚膜梭菌四环素耐药基因双重荧光定量PCR检测方法的建立: 2024年; 旨在开发一种快速、灵敏的针对产气荚膜梭菌四环素类耐药基因tetA(P)和tetB(P)的双重荧光定量PCR检测方法,为快速检测产气荚膜梭菌四环素类抗生素耐药性提供新策略。本研究针对tetA(P)和tetB(P)的保守序列设计引物和探针,构建重组质粒,对退火温度和体系进行优化,同时采用药敏纸片琼脂扩散法测定菌株对四环素类药物的敏感性加以验证。结果发现,优化后的反应程序为95℃30 s;95℃5 s,56℃30 s,共39个循环。使用该反应程序仅能扩增重组质粒,对照菌株无扩增曲线;组内变异系数小于1.3%,组间变异系数小于1.8%,重组质粒最低检测限度为102 copies·μL^(-1)。使用本方法对33份产气荚膜梭菌临床分离株样品进行耐药基因检测,同时进行药敏试验,发现本研究建立的检测方法对四环素耐药基因的检出率均为75.8%(25/33),且与药敏试验结果一致。综上,本研究建立了一种特异、敏感、重复性好的产气荚膜梭菌四环素类耐药基因tetA(P)和tetB(P)的双重荧光定量PCR检测方法。; 欧兰欣叶碧锦孙铭飞戚南山李娟吕敏娜林栩慧蔡海明胡俊菁宋勇乐陈祥杰朱易斌尹理君张健騑廖申权张浩吉; 关键词：产气荚膜梭菌四环素

用于志贺氏菌及四环素耐药基因的RPA快速检测的引物: 本发明公开用于志贺氏菌及四环素耐药基因的RPA快速检测的引物。本发明设计的引物具有较好的种间特异性和种内保守性，该反应能特异性检测出目标基因并同时能分别鉴定志贺氏菌(褔氏志贺氏菌、宋内氏志贺氏菌)及四环素耐药基因(tet...; 曲道峰韩剑众徐琳沈杨张恩宝

信号分子AI-2对副溶血性弧菌四环素耐药基因接合转移的影响被引量：2: 2022年; 目的探讨信号分子AI-2对海产品中分离的副溶血性弧菌四环素耐药基因接合转移的影响作用。方法分别构建经AI-2处理和未经AI-2处理的副溶血性弧菌和大肠埃希氏菌的接合反应体系,通过菌落计数法测定不同浓度AI-2对副溶血性弧菌四环素耐药基因接合频率的影响,采用逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应法测定不同浓度AI-2对接合转移调控相关基因转录水平的影响。结果副溶血性弧菌Vp2015094和Vp2016058的四环素耐药基因可以通过接合作用转移至大肠埃希氏菌K12中,15、30μmol/L浓度AI-2能显著提高Vp2015094的接合频率(P<0.05),6、15、30μmol/L浓度AI-2能极显著提高Vp2016058的接合频率(P<0.01),30μmol/L浓度AI-2能显著提高Vp2015094的接合转移调控相关基因tra F的转录水平以及Vp2016058的接合调控相关基因traF、trb B的转录水平(P<0.05)。结论AI-2能增强副溶血性弧菌四环素耐药基因的接合转移,表明AI-2能促进细菌耐药基因的扩散,为建立基于群体感应的细菌耐药性控制技术奠定基础。; 王婷王婷姚琳姚琳王联珠李风铃李风铃谭志军王鹏; 关键词：副溶血性弧菌四环素耐药基因

免疫磁分离-环介导等温扩增快速检测芽孢杆菌四环素耐药基因tetL的方法: 本发明提供一种免疫磁分离‑环介导等温扩增快速检测芽孢杆菌四环素耐药基因tetL的方法。所述方法包括将羧基磁珠与芽孢杆菌多克隆抗体偶联制备免疫磁珠，然后将免疫磁珠添加到待测样品，得到免疫磁珠‑芽孢杆菌复合物(磁细菌)；通过...; 郝彦玲李雪利翟征远; 文献传递

施用粪肥对土壤--水稻连续体四环素耐药基因丰度的影响及机制研究: 畜禽粪便是宝贵的养分资源,粪肥是其资源化利用的根本措施。施用粪肥是农田抗生素的主要来源,显著提高农田土壤抗生素残留水平以及抗生素耐药基因(ARGs)丰度,其中四环素耐药基因(TRGs)是农田土壤主要的污染物类型之一。在“...; 李青; 关键词：粪肥四环素耐药菌耐药基因

免疫磁珠-环介导等温扩增快速检测巴氏杀菌乳中蜡样芽孢杆菌的四环素耐药基因tetL被引量：4: 2022年; 建立了免疫磁珠分离(IMS)结合环介导等温扩增(LAMP)检测巴氏杀菌乳中蜡样芽孢杆菌的四环素耐药基因tetL的方法。结果表明:经优化后,每微克链霉亲和素纳米磁珠与375 ng生物素标记的芽孢杆菌抗体偶联,在含有1×103 CFU/mL耐四环素蜡样芽孢杆菌的巴氏杀菌乳中,25μL免疫磁珠孵育1 h后,对蜡样芽孢杆菌BA117的捕获率为68.1%。该IMS-LAMP方法特异性高,2 h内对巴氏杀菌乳中耐四环素蜡样芽孢杆菌的检测灵敏度为24 CFU/mL。IMS-LAMP方法具有用时短,灵敏度高,操作简单等优点,可以有效检测巴氏杀菌乳中蜡样芽孢杆菌的四环素耐药基因。; 李雪利汪思源翟征远林建涵郝彦玲; 关键词：免疫磁珠环介导等温扩增蜡样芽孢杆菌四环素耐药基因

抗生素对腹泻仔猪肠道微生物及四环素耐药基因的影响被引量：5: 2022年; 本研究通过16S rDNA高通量测序分析技术及实时定量PCR等方法,结合统计学原理,分析抗生素治疗对腹泻仔猪肠道微生物及四环素耐药基因的影响。在同一栋猪舍同期出生的仔猪中,于10日龄左右随机选取体重3.2 kg左右且连续腹泻2 d以上的腹泻仔猪,采集其粪便样本作为腹泻组。按猪场常规治疗手段对腹泻仔猪用庆大霉素连续治疗3 d,采集治疗后仍腹泻仔猪的粪便样本作为抗生素治疗组。腹泻组与抗生素治疗组各随机选取6个样本进行检测分析。结果显示:与腹泻组相比,抗生素治疗组仔猪肠道菌群的多样性显著降低,拟杆菌属(Bacteroides)、萨特氏菌属(Sutterella)、Butyricimonas等菌属丰度显著升高,普氏菌属(Prevotella)、拟普雷沃菌属(Alloprevotella)、考拉杆菌属(Phascolarctobacterium)等丰度显著减少,tetC、tetG、tetO、tetQ基因丰度显著升高,且几种四环素耐药基因与菌群之间具有明显的相关性。综上可知,使用抗生素治疗腹泻会导致仔猪肠道菌群结构发生变化,并增加菌群的抗四环素基因的丰度。; 马馨张雨琛徐婷婷钱梦琪杨智仁韩新燕; 关键词：抗生素耐药基因腹泻仔猪肠道菌群

貉源大肠杆菌四环素耐药基因的检测被引量：3: 2020年; 目的:为了解黑龙江省和吉林省健康貉中大肠杆菌四环素耐药基因的分布情况,以貉源大肠杆菌为模板,检测四环素耐药基因,为控制耐药性奠定基础,有利于临床合理用药。方法:共选取56株貉大肠杆菌,通过PCR扩增靶基因以检测耐药基因的携带状态。结果:四环素抗性基因tetM的检出率为82.14%,还检测到tetA、tetB、tetC、tetD,未检测出tetE。结论:大肠杆菌四环素耐药性可能由几种耐药基因共同介导。试验结果可为貉临床实践中合理使用四环素和预防四环素抗性出现提供理论依据。; 刘竟雅侯晓昱吴金燕姜楠冯涛薛原; 关键词：大肠杆菌四环素耐药基因

大肠杆菌四环素耐药基因表达与耐药水平的相关性被引量：4: 2020年; 为了探索大肠杆菌耐药基因的表达与耐药水平的关系,本研究通过微量肉汤稀释法检测240株大肠杆菌对土霉素(terramycin,OTC)、金霉素(aureomycin,CTC)、四环素(tetracycline,TC)、多西还素(doxycycline,CAS)和米诺环素(minocycline,MINO)5种四环素类抗菌药物的敏感性,采用PCR方法检测四环素类耐药基因tet B和tet X的携带情况,通过荧光定量PCR法考察不同四环素浓度对tet B表达的影响。研究结果表明:240株猪源大肠杆菌对土霉素、金霉素、四环素、多西还素和米诺环素的耐药率分别为93.33%、92.92%、92.50%、80.42%和37.08%,兽用四环素类药物的治疗效果难以保证;四环素耐药基因的携带率较高,tet B和tet X检出率分别为22.92%和85.00%;Tet B基因mRNA的表达量随着四环素浓度升高而逐步增强,说明tet B属于诱导表达基因,耐药菌难以通过停止用药来恢复对四环素的敏感性,研究人员建议兽医临床应将四环素类药物作为二线药物使用。; 杜安定王学君谭艾娟吕世明陈波利钱文丹王胜优; 关键词：四环素类药物耐药性

益生蜡样芽孢杆菌可转移四环素耐药基因tet(45)特征分析被引量：2: 2020年; 蜡样芽孢杆菌作为益生菌常用菌种之一被广泛应用于人类医疗保健、畜禽养殖、作物促生长和生物防控、环境水质净化等多个领域.益生菌携带的可转移性耐药基因对公共卫生构成潜在威胁.本团队前期发现1株分离自动物源微生态制剂的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus 9i,BC 9i)携带可转移的四环素耐药基因.通过生物信息学分析发现,BC 9i携带的四环素耐药基因为tet(45)基因变体,同属于膜转运蛋白超家族基因.BC 9i表达的Tet(45)变体蛋白结构与原Tet(45)蛋白结构类似,均由14个跨膜螺旋核心构成,但在环状区域和α-螺旋中表现出细微差异.通过克隆tet(45)基因变体,研究表明其功能是通过四环素外排泵介导耐药性产生,外排泵抑制剂可以有效抑制该作用.本研究从基因、蛋白和功能等方面揭示可转移tet(45)基因变体的特征,为探究益生菌耐药基因来源以及益生菌候选菌株的筛选和合理使用提供科学依据.; 崔一芳徐福洲丁双阳朱奎; 关键词：蜡样芽孢杆菌细菌耐药性四环素

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