搜索到2069篇“ 培养人视网膜色素上皮“的相关文章
- 二氧化铈载铂复合纳米材料对高糖培养的视网膜色素上皮细胞的氧化应激及VEGF分泌的影响
- 研究背景:糖尿病性视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）是糖尿病常见的微血管并发症,是工作年龄人群中主要的致盲性眼病。DR的发生和进展主要是由于慢性高血糖导致多种机制的复杂相互作用,从而引起视网膜细...
- 李润菲
- 关键词：二氧化铈抗血管内皮生长因子视网膜色素上皮细胞糖尿病性视网膜病变
- 高压氧对体外培养人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的影响
- 2021年
- 目的探讨高压氧(HBO)干预对体外培养的正常和缺氧状态人视网膜色素上皮(RPE)细胞氧化损伤的影响。方法体外培养正常和缺氧状态(200μmol/L CoCl_(2)干预)人RPE-19细胞,随机分成对照组(正常对照组和缺氧对照组)和HBO组[正常HBO组(0.15 MPa HBO组,0.20 MPa HBO组,0.25 MPa HBO组)和缺氧HBO组(缺氧+0.15 MPa HBO组,缺氧+0.20 MPa HBO组,缺氧+0.25 MPa HBO组)]。各HBO组在纯氧下分别暴露60、90 min,每隔24 h暴露一次,共暴露2次。以MTT法检测各组RPE细胞的增殖活力;以免疫细胞化学方法检测RPE细胞内8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)的表达量;以Western blotting法检测RPE细胞内人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(hOGG1)的表达量。每组实验均重复3次。结果在HBO干预60、90 min后,对于正常RPE细胞,与正常对照组相比,各压力HBO干预组细胞OD570值均降低(P<0.01),且随着压力的升高而降低(P<0.05);细胞内8-OHdG表达量明显增加(P<0.01),且随着压力的升高而增加(P<0.05);细胞内hOGGl表达量增加(P<0.01),且在60min组随着压力的升高而降低(P<0.05)。对于缺氧RPE细胞,与缺氧对照组相比,各压力HBO干预组细胞OD570值均升高(P<0.01),且在60 min组随着压力的升高而升高(P<0.01);细胞内8-OHdG表达量明显降低(60 min P<0.01,90 min P<0.05),且60 min组随着压力的升高而降低(P<0.05);细胞内hOGGl表达量明显增加(P<0.01),且随着压力的升高而增加(60 min P<0.05,90 min P<0.01)。结论HBO暴露可导致正常RPE细胞的氧化损伤,但可修复缺氧导致的RPE细胞的氧化损伤。
- 李佳霖赵怡臻栾洁
- 关键词：高压氧视网膜色素上皮细胞8-羟基脱氧鸟苷酸8-羟基鸟嘌呤糖苷酶
- 腺苷受体在原代培养人视网膜色素上皮细胞中的表达研究
- 2017年
- 目的:验证腺苷受体(adenosine receptors,ADORs)在原代培养的人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium cells,RPE)的表达及其分布。方法:体外原代培养人RPE细胞。通过逆转录多聚酶链反应(transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测RPE细胞中ADORs信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)的表达情况,通过共聚焦免疫荧光法(confocal fluorescence microscopy,CFM)验证ADORs蛋白的表达并检测各亚型在RPE细胞内的分布。结果:在原代培养的RPE细胞中,ADORs亚型A1(adenosine receptors A1,ADORA1),ADORs亚型A2a(adenosine receptors A2a,ADORA2a)和ADORs亚型A2b(adenosine receptors A2b,ADORA2b)的mRNA及蛋白均有表达。ADORA1在RPE细胞的细胞核、核周及细胞质内均有表达,ADORA2a集中表达于RPE细胞核周及细胞质,ADORA2b在细胞核、核周及细胞质中强表达。ADORs亚型A3(adenosine receptors A3,ADORA3)在原代培养的RPE细胞中无表达。结论:原代培养RPE中均有腺苷受体ADORA1、ADORA2a、ADORA2b表达。腺苷受体各亚型在细胞内的不同表达位置可能提示了腺苷受体各亚型的不同功能。
- 万文娟崔冬梅曾骏文李琦
- 关键词：视网膜色素上皮细胞原代培养腺苷受体
- 缓激肽刺激体外培养的视网膜色素上皮细胞炎症反应的作用机制
- 2016年
- 目的:探讨缓激肽刺激体外培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞炎症反应的作用机制。方法:体外培养ARPE-19细胞,100nmol/L缓激肽(bradykinin,BK)刺激24h后,光镜下观察细胞形态变化,细胞免疫荧光检测BK受体定位;共聚焦显微镜检测BK及其拮抗剂作用下Ca2+变化;Western blot检测对照组与100nmol/L BK处理24h后(BK组)COX-1、COX-2、eNOS、iNOS蛋白的表达量。结果:BK刺激后,ARPE-19细胞形态无明显变化;ARPE-19细胞可检测到激肽B1、B2受体;与对照组相比,BK组Ca^(2+)浓度显著升高;B1R拮抗组及B2R拮抗组的Ca^(2+)浓度较BK组升高幅度降低,B1R及B2R拮抗组Ca^(2+)浓度较对照组无明显变化;BK作用ARPE-19细胞后,COX-2及iNOS蛋白含量显著增加(P<0.001)。结论:BK通过与B1R及B2R结合促进体外培养的ARPE细胞COX-2及iNOS表达增加。
- 蔡雯婷任成达刘晴雨危清泉杜亚茹王倩怡刘俊伶何梦梅于靖
- 关键词：缓激肽增生性视网膜病变环氧化酶一氧化氮合酶
- 极低频电磁场对体外培养人视网膜色素上皮细胞的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 研究极低频电磁场（ELF-EMF）作用下体外培养的人视网膜色素上皮细胞（hRPE）的分子病理改变,探讨其在近视发生发展中的可能作用机制.方法 实验研究.根据细胞是否暴露于50 Hz电磁场分为暴露组和非暴露组,观察hRPE细胞形态的改变,CCK8检测hRPE细胞的增殖活性,应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测hRPE细胞表达基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）、转化生长因子-β2（TGF-β2）及成纤维细胞生长因子2（FGF-2）的情况.ELISA检测hRPE细胞培养上清中TGF-β2及FGF-2的表达情况,并用独立样本t检验进行分析.结果 与非暴露组相比,暴露组hRPE细胞形态发生改变;hRPE细胞的增殖活性降低,差异有统计学意义（6＆#215; 103/孔,t=-7.069,P＜0.01;8＆#215;103/孔,t=-3.652,P＜0.05;10＆#215;103/孔,t=-6.974,P＜0.05）;RT-PCR分析显示,暴露组hRPE细胞MMP-2、TIMP-2及TGF-β2 mRNA表达水平较非暴露组均增高,差异有统计学意义（t=10.562、6.277、4.940,P＜0.01）;而暴露组FGF-2 mRNA表达水平较非暴露组低,差异有统计学意义（t=-6.905,P＜0.01）.ELISA检测显示暴露组hRPE细胞上清中TGF-β2表达上调,FGF-2表达下降,与非暴露组相比差异有统计学意义（t=-4.079、4.441,P＜0.05）.结论 ELF-EMF在一定范围内影响体外培养的hRPE细胞的增生及相关细胞因子和基质金属蛋白酶的表达,ELF-EMF可能通过调控hRPE细胞病理改变进而诱导近视的发生发展.
- 王洁朱煌杜尔罡
- 关键词：基质金属蛋白酶2转化生长因子Β
- 多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子对体外培养的视网膜色素上皮细胞磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶信号通路的调控作用被引量：12
- 2015年
- 目的：观察多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子（PSF）对体外培养的视网膜色素上皮（RPE）细胞磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（Akt）信号通路的调控作用。方法将体外培养的 RPE 细胞分为 PSF 高表达组、PSF 高表达对照组、PSF 低表达组、PSF 低表达对照组及假转染组。应用脂质体2000将上调 PSF 表达的真核质粒增强型绿色荧光蛋白（pEGFP）-C2-PSF、下调 PSF 表达的真核质粒 pGenesil-PSF-RNAi 以0.25、0.50、1.00μg 的递增量分别转染至 PSF 高表达组及 PSF 低表达组细胞。PSF 高表达对照组细胞转染 pEGFP-C2空载质粒。PSF 低表达对照组细胞转染 pGenesil-scramble-siRNA 质粒。假转染组仅做转染处理,不加入任何表达质粒。采用水溶性四氮唑法检测胰岛素样生长因子1（IGF-1）刺激条件下 PSF 对 RPE 细胞增生的影响。应用脂质体2000将0.50μg 真核质粒pEGFP-C2-PSF、1.00μg 真核质粒 pGenesil-PSF-RNAi 及 pEGFP-C2空载质粒转染细胞分别作为 PSF 高表达组、PSF 低表达组、对照组,采用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测 PSF 对 IGF-1诱导的 RPE 细胞内血管内皮生长因子（VEGF）mRNA 表达的影响。采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测 PSF 对 IGF-1诱导的磷酸化 Akt （pAkt）蛋白表达的影响。在 IGF-1刺激后,将 RPE 细胞分为单纯渥曼青霉素（Wortmannin）处理组、单纯 PSF 高表达组、渥曼青霉素联合 PSF 高表达处理组,并以未经渥曼青霉素处理的常规体外培养的 RPE 细胞为对照组,采用实时定量 PCR 检测各组 VEGF 的表达。结果IGF-1刺激后,PSF 高表达组、PSF 高表达对照组及假转染组之间 RPE 细胞增生率比较,差异有统计学意义（F =29.728,P 〈0.05）；PSF 低表达组、PSF 低表达对照组及假转染组之间 RPE 细胞增生率比较,差异有统计学意义（F =14.121,P〈0.05）。PSF 高表达组 RPE 细胞中 VEGF mRNA 表达较对照组�
- 漆晨东莉洁东莉洁张晓敏李筱荣张晓敏茹玉莎李筱荣
- 关键词：磷酸肌醇
- 曲尼司特对体外培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响
- 目的 用不同浓度的曲尼司特处理体外培养的人视网膜色素上皮细胞（hRPE-19细胞株），观察其对RPE细胞增殖的影响。 方法 1.体外培养人视网膜色素上皮细胞（hRPE-19细胞株）3-5代后，在倒置显微镜下、结合HE染色...
- 余静
- 关键词：曲尼司特增殖性玻璃体视网膜病变人视网膜色素上皮细胞
- 文献传递
- 不同光照时长对体外培养人视网膜色素上皮细胞光损伤凋亡的影响被引量：3
- 2014年
- 目的研究不同光照时长对体外培养的人视网膜色素上皮细胞(hRPE)凋亡的影响,筛选出最佳建造光损伤模型的光照时长,为后续研究视网膜光损伤机制及光损伤保护提供必要的实验基础。方法体外培养人视网膜色素上皮细胞(hRPE),用三基色冷光灯模拟自然光源,选取(2500±500)Lux作为基础光照强度,以不同光照时长(2、4、6h)对细胞进行照射,建立光损伤模型。分别采用MTS法和流式细胞术检测细胞活力及早期凋亡率,比较给予不同光照时长后,hRPE的活力及早期凋亡率的差异。结果与空白对照组比较,不同光照时长(2、4、6h)均能抑制细胞活力及引起细胞凋亡;光照时间越长,细胞损伤越严重,光照6h组细胞活力下降明显(P<0.05);光照组细胞早期凋亡率较空白对照组升高(P<0.05),光照组间比较,光照4h组早期凋亡率升高明显(P<0.05)。结论不同光照时长均可造成hRPE不同程度的损害;给予4h时长光照后,hRPE损伤以早期凋亡为主,同时又保有较高的细胞活力,故选取4h作为最佳建造光损伤模型的光照时长。
- 宋超俞洋
- 关键词：光损伤人视网膜色素上皮细胞
- 曲尼司特对体外培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响
- 2013年
- 目的：观察曲尼司特对体外培养人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞增殖的影响。方法：用不同浓度的曲尼司特0（对照组）,12.5,25,50,100mg/L作用于体外培养的3-5代人RPE细胞（RPE-19细胞株）,在倒置显微镜下、结合HE染色观察细胞形态,并采用细胞角蛋白CK18对细胞进行鉴定。分别在作用12,24,48h后采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测各组细胞抑制率,蛋白质印迹法（Western-Blot）和免疫组织化学法观察不同浓度的曲尼司特作用24h后细胞表达转化生成因子-β1（TGF-β1）、血小板衍化生长因子受体A（PDGFR-A）蛋白的情况。结果：相同时间点不同浓度曲尼司特对细胞抑制率随浓度增加而增大,差异有统计学意义（P〈0.05）。TGF-β1蛋白表达定位于细胞浆,PDGFR-A蛋白定位于胞膜和胞浆,它们的表达量都随曲尼司特浓度的增加而下调,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：曲尼司特可以抑制人RPE细胞的增殖,并有剂量依赖性,其机制可能与下调TGF-β1和PDGFR-A蛋白表达有关。
- 余静庞东渤
- 关键词：曲尼司特增殖性玻璃体视网膜病变人视网膜色素上皮细胞
- αB晶状体蛋白促进体外培养人视网膜色素上皮细胞的增殖的研究
- 目的测定αB-晶状体蛋白在体外培养人视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelial cell, RPE）中的表达，探讨αB-晶状体蛋白对体外培养人RPE细胞增殖的影响。方法传代培养人ARPE-1...
- 唐德荣
- 关键词：人视网膜色素上皮细胞细胞增殖
- 文献传递
