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基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 用于抗生素分析2024年 基质 和吸附剂功能的单层氧化石墨烯(SLGO)优点,制备复合材料PVK@SLGO作为MALDI-TOF MS基质 用于喹诺酮类抗生素正、负双离子模式下检测。通过引入同位素内标ENR-D5,建立一种快速便捷MALDI-TOF MS定量分析牛奶样品中ENR方法,喹诺酮类抗生素在0.000 1~1.0 mg/m L浓度范围内具有良好线性关系(R2=0.999 1),采用0.005, 0.01和0.1 mg/mL添加水平的回收率范围在100.7%~113.6%之间,相对标准偏差为9.05%~14%(n=3),该方法的检出限为0.000 1 mg/mL,定量限为0.005 mg/mL。该方法具有良好的准确性和精密度,抗干扰能力强,灵敏度高,为快速分析食品中抗生素残留提供一种通用方法。关键词：抗生素 基质 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 仪及样品检测方法基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 仪及样品检测方法。质谱 仪包括：用于形成真空腔体的密封壳体、位于密封壳体外的激光 器及收容于密封壳体内的靶板、调制电极组、第一偏转电极组、第一反射镜、飞行 管和检测器；激光 器，用于...基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 在食源性致病菌鉴定中的应用被引量：1 2024年 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 (matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)作为近年来发展的新型食源性致病菌鉴定技术,具有灵敏、准确、检测速度快等优点,该技术为食品病原微生物靶标性监测和食品安全事件应急检验提供了一种高效的鉴别技术参考,在保障民众生命健康和经济社会发展上发挥了重要作用。本文检索了近年来国内外MALDI-TOF MS技术在食源性致病菌检测中的相关研究案例,简要综述了MALDI-TOF MS检测原理、工作流程,影响鉴定结果的主要因素,介绍了MALDI-TOF MS技术应用于食源性致病菌检测中的实际案例,在此基础上分别从参考菌株数据库建设、标准化程序规范等方面对MALDI-TOF MS技术在食源性致病菌检测领域的未来研究方向进行展望,以期为后续食品安全检测及快速监管食源性致病菌污染提供技术支持。关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 食源性致病菌 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 自建库鉴定临床常见致病丝状真菌的研究2024年 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 (MALDI-TOF MS)技术鉴定临床常见致病丝状真菌的准确性。方法:采用AUTOF MS1000质谱 系统,在原有商业参考库的基础上,增补构建自建数据库,采用125株临床分离菌株对自建库进行验证。结果:自建库新增菌株包括:皮肤癣菌3个属15种菌种,共76株;曲霉属30个菌种,共75株。以已有商业数据库加自建数据库为比对标准,125株临床分离菌株属水平鉴定率100%,种水平鉴定率达80.8%;以分子鉴定结果为金标准,正确鉴定率94.1%。其中,69株皮肤癣菌的种水平鉴定率为79.7%,正确鉴定率92.7%;56株曲霉菌种水平鉴定率为82.1%,正确鉴定率95.6%;错误鉴定6株,集中在须癣毛癣菌复合体(T.mentagrophytes series)菌种趾间毛癣菌/须癣毛癣菌/昆可努发癣菌(T.interdigitale/T.mentagrophytes/T.quinckeanum)交叉识别及Sect.Nigri中黑曲霉(A.niger)与塔宾曲霉(A.tubingensis)交叉识别。结论:通过补充完善自建库可提高MALDI-TOF MS鉴定丝状真菌的准确率;同时,参考数据库及时扩展和更新,以确保MALDI-TOF MS准确鉴定真菌菌种的能力。关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 皮肤癣菌 曲霉 半夏炮制过程中毒性凝集素蛋白的基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 分析 2024年 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 (MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助 MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助 样本制备的时长和比例,以麦胚凝集素(TVL)为内标,直接分析不同炮制程度半夏各炮制品及其浸泡上清液中PTL含量。结果表明,CNC辅助 MALDI样本制备有效提升了MALDI-TOF MS定量分析的线性和重复性。随着炮制时间 的延长,姜半夏、清半夏和法半夏炮制品的PTL含量逐渐下降,浸泡上清液中PTL含量逐渐上升。其中,由于pH值的改变,法半夏炮制品浸泡上清液中PTL含量呈先上升后下降的趋势。此外,将该方法应用于不同饮片生产企业的多批次半夏炮制品饮片中,均未检出PTL。该方法操作简便,可有效分析半夏炮制过程中PTL含量的变化,为研究半夏炮制过程对PTL的影响提供了参考。关键词：半夏 基于基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 技术建立结直肠癌诊断模型及初步验证 2024年 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 (MALDI-TOF MS)技术建立结直肠癌(CRC)诊断模型,寻找CRC潜在的血清学标志物。方法 收集自2018年12月至2020年12月于联勤保障部队960医院就诊的114例CRC初诊患者(CRC组)和进行体检的60例健康体检者(健康组)的血清标本,按照3∶1的比例随机分为训练组131例(CRC患者87例,健康者44例)与验证组43例(CRC患者27例,健康者16例),分别用于模型的建立和初步验证。应用弱阳离子交换磁珠(MB-WCX)进行血清中低丰度蛋白提取纯化,经MALDI-TOF MS筛选CRC组和健康组中差异蛋白峰;基于3种算法(遗传算法、监督神经网络算法和快速分类算法)建立诊断模型,选取差异最显著的两个蛋白峰做聚类分析,将验证组数据带入诊断模型验证其敏感性、特异性及诊断效率。结果 CRC组与健康组蛋白指纹图谱存在明显差异,共筛选出9个有统计学意义的差异蛋白峰(曲线下面积>0.70),在CRC组表达上调7个,下调2个;其中,m/z 4645.32和m/z 5906.48差异最显著(P<0.01),曲线下面积分别为0.91、0.76;m/z 4645.32在CRC组表达显著下调,m/z 5906.48表达上调。比较发现监督神经网络模型诊断效能最佳,其敏感性为92.60%、特异性为81.25%、准确性为88.37%。结论 本研究建立的CRC诊断模型具有较好的诊断效能,其中,蛋白峰m/z 4645.32和m/z 5906.48有望成为CRC潜在的血清学标志物。关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 结直肠癌 血清学标志物 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 仪微生物鉴定准确度快速评价参考品的研制2024年 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 (matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight massspectrometry,MALDI-TOF MS)技术,简称飞行 质谱 技术,可在短时间 内完成对微生物种属水平的鉴定[1]。基本原理是使用已知菌种的蛋白质图谱建立数据库,利用不同菌种核糖体蛋白(2~20 kD)大小的差异,将未知样本的检测图谱与数据库中的微生物参考图谱进行比对,鉴定结果[2-3]。与传统的微生物表型和生理生化检测方法相比,质谱 鉴定的分子量范围大、扫描速度快、操作通量高,且对样品纯度要求不高[4]。除了可鉴定常见细菌和真菌,对临床厌氧菌、苛养菌、丝状真菌以及分枝杆菌等疑难微生物和相对复杂样品的鉴定能力也更强,同时对耐药微生物的鉴定准确性相对较好[5]。关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 微生物鉴定 参考品 苛养菌 分枝杆菌 蛋白质图谱 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 (MALDI-TOF-MS)在食品药品中微生物检测的应用进展2024年 关键词：微生物 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 运用基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 技术分析分枝杆菌液体培养管污染菌菌群特征 2024年 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 (matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术对分枝杆菌液体培养后产生的污染菌进行鉴定,将鉴定出的菌种进行统计归类,分析污染菌的菌群特征。结果6090份呼吸道标本中分枝杆菌阳性标本864份,培养阳性率14.19%(864/6090),污染标本71份,污染率为1.17%(71/6090)。71份污染标本中共分离出74株污染菌,主要菌属为芽孢杆菌和曲霉菌,分别占31.08%(23/74)和24.32%(18/74)。其中灌洗液标本1429份,培养出分枝杆菌阳性标本279份,培养阳性率19.52%(279/1429),污染13株,污染率0.91%(13/1429);痰标本4661份培养出分枝杆菌585株,培养阳性率12.55%(585/4661),污染标本58份,污染率1.24%(58/4661);两种标本培养的阳性率比较,差异有统计学意义(χ^(2)=43.68,P<0.05),污染率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=1.06,P>0.05)。结论分枝杆菌液体培养时产生的污染菌菌群复杂,以芽孢杆菌、曲霉菌为主,因此,必须规范标本的采集和运送,采用有效的前处理方法,以达到降低液体培养污染率的目的。关键词：污染菌 分枝杆菌 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 核酸基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 技术在痰涂片阴性非结核分枝杆菌肺病中的诊断价值 2024年 基质 辅助 激光 解吸 电离 飞行 时间 质谱 (matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术在痰抗酸染色涂片阴性非结核分枝杆菌(nontuberculous Mycobacteria,NTM)肺病患者中的诊断价值。方法回顾性收集2022年7月至2023年11月在山东大学附属公共卫生临床中心住院的痰抗酸染色涂片阴性疑似NTM肺病123例患者临床资料。对支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)标本进行MALDI-TOF MS技术检测和MGIT 960培养。评估MALDI-TOF MS技术在痰抗酸染色涂片阴性NTM肺病中的诊断效能。采用SPSS 26.0软件对数据进行统计分析。采用MedCalc统计软件绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,并计算曲线下面积(area under curve,AUC)。结果123例痰抗酸染色涂片阴性疑似NTM肺病患者中,最终确诊NTM肺病66例。MALDI-TOF MS检测NTM菌种和耐药的时间 为8~24 h,共分离72株NTM,居首位的是鸟分枝杆菌复合群34株(47.22%),其次是脓肿分枝杆菌复合群13株(18.06%),有6例患者检测到大环内酯类耐药,未检测到氨基糖苷类药物耐药。BALF MGIT 960培养和鉴定时间 为9~45 d,NTM分型和药敏检测时间 为7~15 d,共分离28株NTM,有1例患者检测到大环内酯类耐药。以确诊诊断为金标准,MALDI-TOF MS技术检测痰抗酸染色涂片阴性NTM肺病的敏感度、阴性预测值和符合率均高于MGIT 960培养,差异均有统计学意义(84.85%比42.42%,81.13%比56.32%,80.49%比62.60%,χ^(2)=25.667、8.998和9.664,P<0.05或<0.01)。MALDI-TOF MS技术的ROC AUC为0.801,高于MGIT 960培养的AUC(0.642)。MALDI-TOF MS技术的诊断效能高于MGIT 960培养(Z=3.300,P=0.001)。结论相比MGIT 960培养,MALDI-TOF MS技术在诊断痰抗酸染色涂片阴性NTM肺病患者的诊断效能更高,同时能鉴定NTM菌种及耐药情况,且时间 更短。关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 非结核分枝杆菌肺病 支气管肺泡灌洗液
