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- 一种高增殖能力PCV2株及构建方法和应用
- 本发明提供了一种高增殖能力PCV2株及构建方法和应用,属于疫苗株技术领域。通过将PCV2的Cap段的492bp位点的A进行点突变,经所述点突变后,即可显著增强毒株的增殖能力。本发明还提供了引发所述点突变的引物对以及引发点...
- 周继勇胡婧宇顾金燕徐珂莎王文婧颜焰金玉兰董伟仁陈文镜
- 一种提高益生菌耐受性和增殖能力的复合物及其制备方法和应用
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- 王利平冉艳红王超陈慧芳李国伟黄敏鑫陈晓玲
- 敲低lncRNA LINC01296通过Wnt/β-catenin通路抑制骨肉瘤细胞增殖能力及干性特征
- 2025年
- 目的探究敲低长链非编码RNA(lncRNA)LINC01296对人骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞增殖能力和干性特征的影响,初步探究相关机制。方法培养人正常成骨细胞系hFOB1.19与人OS细胞系MG63、U2OS、Saos2,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测lncRNA LINC01296的表达情况。将MG63细胞分为对照组、siRNA阴性对照组(阴性对照NC siRNA转染至细胞)、LINC01296 siRNA干扰组(LINC01296 siRNA转染至细胞)、LINC01296 siRNA+LiCl组(LINC01296 siRNA转染至细胞并用10 mmol/L Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl培养24 h),检测各组中lncRNA LINC01296表达情况,CCK-8法检测各组细胞存活率,EdU染色观察各组细胞增殖情况,肿瘤细胞球体形成实验检测各组细胞的球体数目,蛋白质印迹法检测各组细胞中干性相关蛋白(Nanog、OCT-4、SOX2)及Wnt/β-catenin通路相关蛋白(β-catenin、c-Myc、Cyclin D1)的表达水平。结果人OS细胞系MG63、U2OS、Saos2中lncRNA LINC01296相对表达量显著高于hFOB1.19细胞(P<0.05)。与对照组比较,LINC01296 siRNA组MG63细胞存活率显著降低(P<0.05),EdU阳性细胞比例显著降低(P<0.05),肿瘤细胞球体数目显著减少(P<0.05),细胞中Nanog、OCT-4、SOX2及β-catenin、c-Myc、Cyclin D1的蛋白相对表达量均显著下调(P<0.05);与LINC01296 siRNA组比较,LINC01296 siRNA+LiCl组MG63细胞存活率显著升高(P<0.05),EdU阳性细胞比例也显著升高(P<0.05),肿瘤细胞球体数目显著增加(P<0.05),同时细胞中Nanog、OCT-4、SOX2及β-catenin、c-Myc、Cyclin D1的蛋白相对表达量均显著上调(P<0.05)。结论在OS细胞中靶向敲低lncRNA LINC01296表达能够抑制细胞增殖能力,降低细胞干性特征,该机制可能与抑制Wnt/β-catenin通路的激活有关。
- 刘广飞郭志远王艳花卢守亮郭磊程才
- 关键词:骨肉瘤增殖WNT/Β-CATENIN通路
- 不同激活条件下PRR源性外泌体特征及其对HMEC-1和BJ增殖能力差异的比较研究
- 2025年
- 目的 比较不同激活条件下富血小板血浆源性外泌体(platelet-rich plasma derived exosomes, PRP-Exos)的特征及其人微血管内皮细胞(HMEC-1)和人皮肤成纤维细胞(BJ)增殖能力的差异。方法 招募10名健康志愿者,采集EDTA-K_2抗凝静脉血10 mL,应用二次离心法制备提取PRP-Exos。通过透射电镜(TEM)、纳米颗粒追踪分析(NTA)和免疫印迹法(WB)检测技术,比较PRP-Exos的形态特征、粒径分布和浓度及表面标志蛋白的表达;通过体外细胞培养,比较不同激活剂组PRP-Exos对人微血管内皮细胞(HMCE-1)和人皮肤成纤维细胞(BJ)形态变化和增殖能力的差异。结果 1)TEM观察显示:不同激活剂组PRP-Exos形态不同。2)NTA分析显示:与生理盐水组粒径(109.60±2.71)nm相比,凝血酶组粒径(104.93±1.55)nm和混合剂组粒径(103.83±1.58)nm相对较小,葡萄糖酸钙组粒径(113.57±4.70)nm较大且粒径分布尺寸较宽,不同组间比较差异有统计学意义(F=7.019,P<0.05);凝血酶和葡萄糖酸钙混合剂组获得的外泌体浓度最高[(4.87±0.63)×10^(6 )particles/mL,P<0.001],凝血酶组[(2.75±0.13)×10^(6 )particles/mL,P<0.01]和葡萄糖酸钙组[(3.82±0.06)×10^(6 )particles/mL,P<0.001]与生理盐水组相比均获得更高浓度的外泌体;葡萄糖酸钙组略高于凝血酶组,两组之间比较存在明显差异性(P<0.05)。3)WB分析显示:PRP-Exos表面表达CD41、CD81及TSG101,其中CD41、TSG101在凝血酶和葡萄糖酸钙混合剂组中的蛋白信号强度最强(P<0.001)。4)体外细胞培养结果显示:凝血酶和葡萄糖酸钙混合剂组PRP-Exos可显著促HMEC-1和BJ的增殖(P<0.05)。结论 凝血酶和葡萄糖酸钙混合剂组PRP可获得最高浓度的外泌体;在体外培养条件下,凝血酶和葡萄糖酸钙混合剂组PRP-Exos可显著促进HMEC-1和BJ的增殖。
- 高立兰吕孟兴刘建香胡美坤金晓红屈柯暄
- 关键词:PRP外泌体人皮肤成纤维细胞
- Loxl2对人结直肠癌细胞5-氟尿嘧啶耐药性及增殖能力的影响研究
- 2025年
- 目的探究赖氨酰氧化酶样蛋白2(Loxl2)对人结直肠癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药性及增殖能力的影响。方法生信分析结直肠癌、腺癌,癌组织、癌旁组织及不同病理分期中Loxl2的表达,免疫组化检测癌组织、癌旁组织内Loxl2的蛋白阳性表达率;分析不同结直肠癌组织内Loxl2的蛋白表达,选取典型细胞系,设置一系列5-FU浓度,确定各组细胞内Loxl2表达及细胞增殖活性;构建Loxl2过表达、沉默细胞系,确定不同组细胞迁移及凋亡能力。结果与癌旁组织对比,结直肠癌组织内Loxl2表达显著提升(P<0.05);随着结直肠癌病理分期提升,Loxl2表达提升(P<0.05);随着5-FU干预浓度提升,HCT116、SW48细胞内Loxl2表达逐渐提升,当5-FU干预浓度为20、40μM时,HCT116、SW48细胞内Loxl2表达最高(P<0.05);Loxl2表达在HCT116、SW48内得到成功过表达及沉默处理(P<0.05);随着5-FU干预浓度提升,HCT116、SW48细胞系的增殖活性逐渐降低(P<0.05);与Vector组对比,Loxl2组细胞增殖克隆能力提升,凋亡能力降低(P<0.05);与Scamble组对比,shLoxl2-1、shLoxl2-2两组细胞增殖克隆能力降低,凋亡能力提升(P<0.05)。结论Loxl2在结直肠癌组织内高表达,Loxl2过表达可以促进结直肠癌5-FU耐药细胞的增殖克隆能力,抑制细胞凋亡能力,促进肿瘤进展,值得临床进一步研究。
- 邱志泽邱诗琪毛文利林武黄伟彭祺祺
- 关键词:结直肠癌肿瘤耐药细胞活性
- INK4基因座中反义非编码RNA对乳腺癌细胞增殖能力及顺铂敏感性的影响
- 2025年
- 目的探讨INK4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)对乳腺癌细胞增殖能力及顺铂敏感性的影响及其作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测乳腺癌组织标本及配对的癌旁组织、人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231、SKBR3以及人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A中ANRIL的表达;将对数生长期的MDA-MB-231细胞随机分为si-NC组(转染对照的空载siRNA)、si-ANRIL组(转染ANRIL干扰片段)、si-ANRIL-anti-NC组(共转染ANRIL的干扰片段和miR-7-5p的空载体)、si-ANRIL-anti-miR-7-5p组(转染ANRIL的干扰片段和miR-7-5p的干扰片段)、miR-NC组(转染对照miRNA的空载体)、miR-7-5p mimic组(转染miR-7-5p的过表达载体)、miR-7-5p+ANRIL-WT转染组(共转染miR-7-5p mimics和ANRIL-WT)、miR-NC+ANRIL-WT转染组(共转染mimics Control和ANRIL-WT)、miR-7-5p+ANRIL-MUT转染组(共转染miR-7-5p mimics和ANRIL-MUT)和miR-NC+ANRIL-WUT转染组(共转染mimics Control和ANRIL-MUT)。采用细胞计数试剂盒-8法检测乳腺癌细胞的体外增殖能力,克隆形成实验检测细胞对顺铂的敏感性,双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀(RIP)实验检测ANRIL和miR-7-5p的靶向结合关系。结果乳腺癌组织中ANRIL mRNA相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.05);MDA-MB-231、MCF-7和SKBR3细胞中ANRIL mRNA的相对表达量显著高于正常乳腺上皮细胞(P<0.05);MDA-MB-231细胞中ANRIL mRNA的表达量显著高于MCF-7和SKBR3细胞(P<0.05)。培养24、48、72 h时,si-ANRIL组细胞存活率显著低于si-NC组(P<0.05)。与si-NC组相比,si-ANRIL组细胞克隆形成数目显著降低(P<0.05)。与miR-NC+ANRIL-WT转染组相比,miR-7-5p+ANRIL-WT转染组细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05);miR-NC+ANRIL-MUT转染组与miR-7-5p+ANRIL-MUT转染组细胞荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-7-5p mimic组细胞中ANRIL富集量显著高于miR-NC组(P<0.05)。在培养24、48、72 h时,si-ANRIL-anti-miR-7-5p组MDA-MB-231细胞存活率显著高于si-
- 韩一菲张芳芳王靖楠邹炎应莉谢依天李娜
- 关键词:顺铂敏感性
- PPQ通过清除活性氧修复子宫内膜细胞增殖能力的作用研究
- 2024年
- 目的:设计并合成聚乙二醇修饰负载槲皮素的聚多巴胺(PDA)类黑色素纳米粒子(PPQ),检测其物化表征及活性氧(ROS)清除能力,并进一步探究其改善子宫内膜异位症能力。方法:采用透射电子显微镜(TEM)、水合粒径(DLS)、Zeta电位分析PPQ的形貌、粒径大小;利用紫外光谱(UV-Vis)分析PPQ中槲皮素的载药浓度及包封率;利用总抗氧化能力的检测试剂(DPPH和ABTS)检测槲皮素、聚乙二醇修饰PDA(PEG-PDA)及PPQ的ROS清除能力;将人子宫异位子宫内膜上皮细胞系(hEM15A)分为对照组及刺激组,并将刺激组分别用槲皮素、PEG-PDA及PPQ进行孵育处理,进一步采用激光共聚焦、细胞毒性试验、细胞活性染色、细胞EdU增殖染色试验及子宫内膜异位症小鼠模型评估PPQ清除ROS改善子宫内膜异位症的作用。结果:TEM及DLS结果提示制备的PDA、PEG-PDA及PPQ为100 nm左右的圆球颗粒,其电位分别为-30、-32、-35 mV左右。紫外光谱提示槲皮素的载药率和包封率分别为≤23%和≤85%。总抗氧化能力检测试剂结果提示槲皮素、PEG-PDA及PPQ均可减少氧自由基的含量,且随着浓度升高其含量越少,同时PPQ展示出最好的ROS清除能力。激光共聚焦实验结果提示:相比于对照组,IL-1β可显著上调hEM15A细胞内ROS水平(P<0.001),而槲皮素、PEG-PDA及PPQ都会降低IL-1β处理的hEM15A细胞内ROS水平(P<0.001),且相比于槲皮素和PEG-PDA,PPQ在细胞内可更有效清除ROS(P<0.001)。细胞毒性试验、细胞活性染色及EdU增殖染色试验结果表明:相比于对照组,IL-1β可显著降低hEM15A细胞的存活率、增殖能力及增加细胞死亡率(P<0.001),而槲皮素、PEG-PDA及PPQ可增加IL-1β处理的hEM15A细胞存活率及增殖能力,降低死亡率(P<0.001),且相比于槲皮素和PEG-PDA,PPQ对处理的细胞效果最显著(P<0.001)。在体试验显示:PPQ在子宫内膜异位症区域有良好的富集作用,且相比于对照组,PPQ可缩小子宫内膜异位症
- 彭佳欣冯文翔李奕霖龚熊美玉曾聚涛李伟
- 关键词:子宫内膜细胞增殖能力
- DAPT在维持扩展多潜能干细胞多能性及提高其增殖能力中的应用
- 本发明公开了DAPT在维持扩展多潜能干细胞多能性及提高其增殖能力中的应用。本发明首次发现DAPT能够有效维持扩展多潜能干细胞多能性并提高其增殖能力,解决了EPSC增殖过程中多能性逐渐丢失的问题,本发明可以实现EPSC的体...
- 赵谦宋文鹏卢惠迪顾雨春吴理达刘颖
- 一种提高雨生红球藻绿色游动细胞游动能力和增殖能力的方法
- 本发明涉及一种提高雨生红球藻绿色游动细胞游动能力和增殖能力的方法,属于雨生红球藻养殖技术领域。本发明抛开单一的提高雨生红球藻增殖能力来提高虾青素产量的局限性,从提高雨生红球藻运动能力入手,得到了一种可提高绿色游动细胞的运...
- 李梅岳永成潘仕英李路荣邢耀民仲林强柏冠羽
- 一种提高脂肪间充质干细胞增殖能力的方法
- 本发明提出了一种提高脂肪间充质干细胞增殖能力的方法,属于干细胞技术领域。包括:(1)配制含有活性中药组合物、胎牛血清、促进活性剂的RPMI 1640培养基;(2)将脂肪间充质干细胞接种于培养基中,得到细胞悬液,间断性通入...
- 徐立伟郭静静
相关作者
- 任大喜

- 作品数:120被引量:217H指数:10
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- 王国华

- 作品数:116被引量:604H指数:12
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- 白金萍

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- 研究主题:增殖能力 间充质干细胞 胎盘 胎盘间充质干细胞 小鼠
- 黄岚

- 作品数:1,071被引量:2,540H指数:21
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- 研究主题:内皮祖细胞 内皮细胞 平滑肌细胞 损伤血管 冠心病患者
- 张少辉

- 作品数:126被引量:99H指数:6
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