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利用多角 体 蛋白 基因 密码子偏爱性提高重组人表皮生长因子的方法 本发明公开了一种利用多角 体 蛋白 基因 密码子偏爱性提高重组人表皮生长因子的方法。重组人表皮生长因子hEGFbDNA序列为SEQ ID NO.1,方法是构建并合成重组人表皮生长因子hEGFb;利用病毒表达系统对重组人表皮生长因... 吴小锋 王星洋 许裕敬 杨恬 朱新宇昆虫杆状病毒多角 体 蛋白 基因 超高水平表达的分子机制研究进展 2024年 昆虫杆状病毒的生活史中令人惊奇的现象之一是其极晚期基因 多角 体 蛋白 (polyhedrin,polh)基因 的超高水平表达,表达产生的多角 体 蛋白 将病毒粒子包埋到内部形成包涵体 。本文根据已有的研究结果,从3个方面概括了polh基因 超高水平表达的机制,即polh启动子的结构特征和转录调控、polh mRNA的结构和翻译调控以及影响polh基因 表达的蛋白 调控因子,期望有助于更好地理解polh超高水平表达调控的分子机制,为提高杆状病毒表达载体 系统表达外源蛋白 效率提供理论指导。 陈官平 李跃东 李佳乐 吴小锋关键词:杆状病毒 多角体蛋白 分子机制 BmNPV多角 体 蛋白 基因 编码区结合蛋白 的鉴定 2023年 家蚕核型多角 体 病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是一种具有较强传染性的病毒,在感染的极晚期超高水平表达一种约29 kD的碱溶性多角 体 蛋白 。但该蛋白 为病毒复制的非必需蛋白 ,因此,利用该基因 可以被删除或被外源基因 替换而不影响病毒的复制的原理构建重组病毒,可以实现外源基因 的高水平表达。然而,目前虽已经有较多文献研究多角 体 蛋白 高水平表达的分子机制,但迄今对于多角 体 蛋白 基因 编码区的结合蛋白 尚不明确。本研究通过DNA pull-down联合质谱技术对结合在多角 体 蛋白 编码区的蛋白 质进行鉴定,共鉴定到78个宿主来源的蛋白 和49个病毒自身编码的蛋白 。对这些蛋白 进行GO注释,结果表明这些蛋白 除了具有共同的核酸结合功能外,还有其他不同的生物学功能,共同在多角 体 蛋白 的超高水平表达过程中发挥作用。进一步从上述蛋白 中筛选出了最值得深入研究的9个宿主蛋白 和10个病毒蛋白 。对这些蛋白 进行深入研究,将为深入揭示多角 体 蛋白 超高水平表达的分子机制提供新的线索。 陈官平 孔祥硕 赵书荻 吴小锋关键词:BMNPV 多角体蛋白 BmMP54基因 在家蚕组织的表达模式及与BmNPV多角 体 蛋白 基因 的融合表达分析 被引量:1 2017年 从家蚕蛹c DNA文库中筛选到一个403 bp的未知功能基因 ,将其命名为Bm MP54(Gen Bank登录号:DY231399.1)。该基因 序列包含312 bp的开放阅读框,编码由103个氨基酸残基组成的蛋白 质,生物信息学预测其含有2个跨膜区域,等电点及分子质量分别为9.90和10.463 k D。将Bm MP54与家蚕核型多角 体 病毒(Bm NPV)的多角 体 蛋白 基因 (Polh)融合后分别连接到原核表达载体 p GEX-4T-1和家蚕杆状病毒表达系统转移载体 p Fast BacTMHTB中构建重组质粒,并分别在大肠埃希菌BL21(DE3)和家蚕卵巢培养细胞(Bm N)中表达。原核表达的融合蛋白 通过调节p H值、阴离子交换层析等纯化获得了65 k D的重组融合蛋白 Polh-Bm MP54,通过Western blotting可在重组杆状病毒感染的Bm N细胞中检测到42 k D左右的Bm MP54重组蛋白 ,表明已按设计要求高效表达并纯化获得目的蛋白 质。实时荧光定量PCR分析显示Bm MP54在家蚕5龄幼虫的气门和脂肪体 组织中表达量最高,在表皮和头部的表达量最低。上述研究结果有利于后续探讨Bm MP54在家蚕生长发育过程中的生物学功能。 严婷婷 于滨 潘海涛 舒建洪 张耀洲关键词:跨膜蛋白 表达谱 一个新的家蚕免疫相关蛋白 基因 与多角 体 蛋白 基因 的融合表达及其功能的初步研究 杆状病毒在极晚期基因 表达过程中,产生两种高效表达的蛋白 ,它们是多角 体 (Polh)蛋白 和P10蛋白 ,其中多角 体 蛋白 是形成多角 体 的主要成分,基因 序列大小为738 bp,编码246个氨基酸残基,分子量大小为29 kD,多角 体 启... 方腾飞关键词:BAC-TO-BAC 荧光定量PCR 文献传递 茶毛虫核型多角 体 病毒多角 体 蛋白 基因 (polh)的表达、抗体 制备及检测利用 杆状病毒是一类基因 组为双链环状的DNA病毒,其主要感染节肢动物特别是鳞翅目,双翅目和膜翅目昆虫的一类病毒。杆状病毒科分为核型多角 体 病毒属(NPV)和颗粒体 病毒属(GV)。现已发现的杆状病毒以NPV为主,核型多角 体 病毒根据... 王礼中关键词:杆状病毒 茶毛虫核型多角体病毒 抗体制备 文献传递 马尾松毛虫质型多角 体 病毒多角 体 蛋白 基因 的表达与定位 2006年 为了表达马尾松毛虫质型多角 体 病毒(DpCPV)多角 体 蛋白 基因 (S10片段)并探讨多角 体 蛋白 在真核细胞中的定位,从DpCPV中分离出S10,与pET-28a载体 连接成重组表达质粒pET28-S10;将S10克隆到杆状病毒转座载体 pFASTBACHTb中,依次筛选出重组转座质粒pFASTBACS10,重组穿梭质粒BacmidS10,重组杆状病毒AcS10。多角 体 蛋白 基因 表达后,用SDS-PAGE、Western-blot和免疫荧光技术对表达产物进行了检测。结果表明:S10原核表达质粒、重组杆状病毒成功获得;在昆虫细胞中表达的质型多角 体 蛋白 主要定位于细胞质,同时有少量产物定位于细胞核。 李斗林 李艳秋 张珈敏 杨波 陈伍国 周伟东 胡远扬关键词:马尾松毛虫质型多角体病毒 多角体蛋白基因 肌动蛋白 抑制杆状病毒多角 体 蛋白 基因 的转录与表达 通过重组病毒AcMNPV-GFP-actin(ph-)进行分析,晚期持续表达的外源肌动蛋白 抑制了多角 体 基因 的转录和表达,从而导致多角 体 不能正常产生。论文共分三部分:第一部分前言对杆状病毒作了概括性介绍,包括杆状病毒的分类... 贾蕴莉关键词:杆状病毒 肌动蛋白 多角体病毒 多角体蛋白基因 转录 文献传递 肌动蛋白 抑制了杆状病毒多角 体 蛋白 基因 的转录与表达 被引量:1 2005年 为进一步研究肌动蛋白 在杆状病毒感染晚期的作用,利用Bac-to-Bac系统构建了表达多角 体 基因 、肌动蛋白 与绿色荧光蛋白 融合基因 的重组病毒vAc-ph/70GA,同时构建对照病毒vAc-ph.实验发现,重组病毒vAc-ph/70GA感染Sf9细胞后能持续表达肌动蛋白 ,但不能形成多角 体 ,vAc-ph则能形成多角 体 .SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,vAc-ph/70GA感染晚期,细胞内没有多角 体 蛋白 的表达;RT-PCR的结果进一步表明多角 体 基因 的转录被抑制.肌动蛋白 的表达并没有影响vAc-ph/70GA对细胞的感染力.结果表明,晚期表达的外源肌动蛋白 抑制了多角 体 基因 的转录和表达,从而导致多角 体 不能正常产生. 贾蕴莉 余泽华 陈新文关键词:肌动蛋白 多角体 斜纹夜蛾核型多角 体 病毒多角 体 蛋白 基因 与gp41基因 分析及带GFP标记的转移载体 的构建 斜纹夜蛾核型多角 体 病毒(Spodopteralituramulticapsidnucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)属NPV科A亚群。本研究在Spli-SpltMNPV的模型中对ph及gp41基因 进... 胡兆丽关键词:斜纹夜蛾 多角体病毒 多角体蛋白基因 文献传递
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袁林 作品数:107 被引量:108 H指数:5 供职机构:江西省科学院 研究主题:普鲁兰 嗜热 粪肠球菌 Α-淀粉酶 植酸酶 胡远扬 作品数:101 被引量:196 H指数:9 供职机构:武汉大学生命科学学院 研究主题:病毒 黑胸大蠊浓核病毒 质型多角体病毒 基因组结构 马尾松毛虫 张珈敏 作品数:91 被引量:182 H指数:9 供职机构:武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室 研究主题:黑胸大蠊浓核病毒 病毒 马尾松毛虫 基因组结构 浓核病毒 魏国汶 作品数:27 被引量:65 H指数:5 供职机构:江西省科学院 研究主题:粪肠球菌 杆状病毒表达系统 多角体 植酸酶 响应面法优化 吴小锋 作品数:169 被引量:484 H指数:12 供职机构:浙江大学动物科学学院 研究主题:家蚕 杆状病毒 家蚕核型多角体病毒 重组杆状病毒 昆虫杆状病毒