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一种牛腔前卵泡和小腔卵泡的体外培养方法: 本发明涉及细胞培养技术领域，具体涉及一种牛腔前卵泡和小腔卵泡的体外培养方法，其包括步骤：选取满足设定条件的牛卵巢，对牛卵巢进行预处理；将预处理后的牛卵巢的皮质部分横向切分成组织薄片，使用含有1％双抗的PBS缓冲液多次清洗...; 赵善江王欢朱化彬

对猪小腔卵泡孤雌激活胚胎发育力的初步探索: 2020年; 为探讨直径为2 mm以下和2~6 mm猪卵泡卵母细胞的体外培养分裂率与囊胚率差异,采用相同体外成熟培养条件,来培养从不同直径的2种卵泡中所抽出的卵母细胞,在卵母细胞成熟培养后44~48 h,对卵母细胞进行化学激活和体外培养,观察胚胎体外发育能力;在培养48 h时进行分裂数据统计,培养168 h时统计囊胚个数。结果发现,2 mm以下猪卵泡卵母细胞孤雌激活后胚胎的体外培养平均分裂率与2~6 mm猪卵泡卵母细胞孤雌激活后胚胎的体外培养平均分裂率差异显著,分别为62.46%、81.76%(P<0.05);2 mm以下猪卵泡卵母细胞孤雌激活后胚胎的体外培养平均囊胚率与2~6 mm猪卵泡卵母细胞孤雌激活后胚胎的体外培养平均囊胚率差异不显著,分别为11.71%、15.30%。说明正常卵泡、小腔卵泡的卵母细胞在体外成熟后,孤雌激活胚分裂率依次降低,孤雌胚胎的分裂能力随卵泡直径的增大而增强;正常卵泡、小腔卵泡的卵母细胞体外成熟后,孤雌激活胚囊胚率随卵泡直径的增大有一定增高,但变化不显著。; 宋尚桥马围围曾素先严瑾孙翠翠李鑫黎宗强; 关键词：小腔卵泡孤雌激活囊胚率

AREG对绵羊小腔卵泡卵母细胞体外成熟的影响被引量：5: 2020年; 旨在研究双调蛋白(AREG)对绵羊小腔卵泡卵母细胞体外成熟(IVM)的影响。本研究从屠宰场绵羊卵巢上采集小腔和中腔卵泡的卵母细胞进行试验,利用自发荧光检测卵母细胞的NAD(P)H和FAD^++水平,利用JC-1检测卵母细胞的线粒体膜电位;两种来源的卵母细胞经体外成熟后,比较其卵丘扩展指数(CEI)、第一极体排出率(MII%);比较AREG、AREG+GDF9、AREG+BMP15、AREG+GDF9+BMP15、GDF9+BMP15对小腔卵泡卵母细胞体外成熟后的CEI、MII%及卵母细胞线粒体膜电位的影响;检测了AREG+GDF9+BMP15对小腔卵泡卵母细胞体外成熟后的NAD(P)H和FAD^++水平及其受精后发育能力的影响。结果表明,成熟前,小腔卵泡卵母细胞的线粒体膜电位和FAD^++水平均显著低于中腔卵泡卵母细胞(P<0.05);体外成熟培养后,小腔卵泡卵母细胞的CEI和MII%均显著低于中腔卵泡卵母细胞(P<0.05)。与对照组相比,AREG+GDF9+BMP15显著提高了小腔卵泡卵母细胞体外成熟后的CEI、MII%和线粒体膜电位(P<0.05),且与中腔卵泡卵母细胞组差异不显著(P>0.05);另外,AREG+GDF9+BMP15显著提高了小腔卵泡卵母细胞体外成熟后的NAD(P)H和FAD^++水平(P<0.05),且与中腔卵泡卵母细胞组差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,在成熟液中添加AREG+GDF9+BMP15可以明显提高小腔卵泡卵母细胞体外受精后的卵裂率和囊胚率(分别为(43.79±3.69)%、(28.54±4.31)%和(78.99±1.12)%、(47.46±2.50)%,P<0.05),而且与中腔卵泡卵母细胞组无显著差异(P>0.05)。综上表明,绵羊小腔卵泡卵母细胞的代谢水平及IVM质量较低,AREG在GDF9和BMP15的协同作用下可以显著提高小腔卵泡卵母细胞的代谢水平及IVM质量,并进一步提高小腔卵泡卵母细胞体外受精后的发育能力。; 王兆琛赵勇超杜炜栾兆进刘春洁张家新; 关键词：绵羊小腔卵泡卵母细胞体外成熟

牛小腔卵泡体外培养体系二维法和三维法的比较: 哺乳动物卵巢含有大量腔前卵泡和小腔卵泡,只有少数卵泡能够继续生长发育并排卵,其余卵泡在生长过程中逐渐发生闭锁,如何体外增加腔前卵泡和小腔卵泡的利用率一直是科学研究的热点。目前,腔前卵泡经体外培养已经可以形成卵泡腔,但成腔...; 何圆圆; 关键词：小腔卵泡卵母细胞; 文献传递

山羊卵巢间质细胞体外功能研究及其对小腔卵泡发育的影响: 卵巢是雌性动物的性腺器官，主要功能包括产生繁殖后代的卵子、分泌生殖激素和维持雌性动物发情周期等。卵泡的产生、生长发育以及成熟或凋亡，决定着卵子形成的整个过程及其最终命运，在雌性动物卵巢活动和整个繁殖生理过程中，显现周期性...; 邱明宁; 关键词：颗粒细胞卵泡发育山羊; 文献传递

山羊卵巢间质细胞对小腔卵泡发育的影响: 2013年; 为了能有效利用山羊小腔卵泡和研究相关小腔卵泡发育的机理,将山羊小腔卵泡与卵巢皮质间质细胞、卵泡膜细胞和卵巢髓质间质细胞体外共培养,测定培养第5天卵泡直径、培养液中类固醇激素分泌量、卵母细胞特异性分泌因子gdf9和bmp15基因的表达和卵泡颗粒细胞以及卵母细胞凋亡与抗凋亡基因表达。研究结果显示,山羊小腔卵泡与卵巢间质细胞共培养5d,卵泡直径增加明显大于小腔卵泡单独培养组(P<0.05);小腔卵泡与卵巢皮质间质细胞共培养5d后,小腔卵泡分泌的雌二醇激素的量高于小腔卵泡单独培养组(P<0.01),为413.95pg·mL-1;小腔卵泡与卵巢髓质间质细胞共培养5d后,小腔卵泡分泌孕酮的量(11.695ng·mL-1)极显著高于小腔卵泡单独培养组和其他共培养组(P<0.01),小腔卵泡与卵泡膜细胞共培养5d后,小腔卵泡分泌的孕酮的量高于小腔卵泡单独培养组(P<0.05);小腔卵泡与卵巢皮质间质细胞、髓质间质细胞以及与卵泡膜细胞共培养5d后,其卵母细胞特异性分泌因子gdf9基因和bmp15基因表达显著上调(P<0.01);与卵巢间质细胞共培养5d后,小腔卵泡内卵丘细胞和卵母细胞抗凋亡基因表达上调(P<0.05),小腔卵泡内卵丘细胞和卵母细胞抗凋亡基因表达下调(P<0.05)。表明卵巢间质细胞促进小腔卵泡的生长以及类固醇激素如雌二醇和孕酮分泌,促进小腔卵泡内卵母细胞特异性分泌的生长因子(gdf9和bmp15)基因的表达,同时抑制小腔卵泡的凋亡。尤其是卵巢卵泡膜细胞与小腔卵泡共培养后明显提高小腔卵泡的抗凋亡能力。; 邱明宁韩成全杨忠财刘军权富生张涌; 关键词：小腔卵泡共培养细胞凋亡山羊

水牛小腔卵泡的分离与小腔卵泡卵母细胞培养的初步研究: 本研究主要通过探讨水牛小腔卵泡分离的方法,并比较不同成熟培养液对水牛小腔卵泡卵母细胞体外培养效果的影响,以期建立有效的水牛小腔卵泡分离和小腔卵泡卵母细胞的体外培养体系。　　一、比较了不同的分离方法和酶作用的不同时间,...; 李翠玲; 关键词：水牛小腔卵泡体外培养; 文献传递

水牛小腔卵泡分离方法的初步研究被引量：3: 2011年; 本研究比较了不同的分离方法和酶作用的不同时间,以及不同的卵巢表面状态等因素对水牛小腔卵泡分离效果的影响,以期建立有效的水牛小腔卵泡分离体系。结果发现,采用机械与酶结合的方法分离水牛小腔卵泡时,平均每个卵巢获得5.64个小腔卵泡,显著高于机械法分离平均每个卵巢获得的3.12个小腔卵泡数(P<0.05);当胶原蛋白酶作用12或15min,每个卵巢平均获得的小腔卵泡数均显著高于5和10min处理组(P<0.05),两组之间没有显著差异(P>0.05),但当消化时间延长到20min时,卵泡膜被酶消化而破裂,没法分离到小腔卵泡;从表面小于2mm卵泡且无黄体的卵巢分离获得的小腔卵泡平均数显著高于表面无可见卵泡且有黄体的卵巢组的平均数(7.50和2.25,P<0.05)。以上结果表明,选用表面无小于2mm卵泡且无黄体的卵巢,采用机械与酶结合的方法,酶作用时间为12～15min分离水牛的小腔卵泡,可获得的小腔卵泡数量最多。; 李翠玲李楠黄章虎蒋建荣陆凤花石德顺; 关键词：水牛小腔卵泡

哺乳动物小腔卵泡的体外发育: 2009年; 杜莹莹黎宗强卢晟盛姚玲李婵赵广伟李春艳李晓剑; 关键词：小腔卵泡体外发育哺乳动物卵母细胞体外成熟胚胎工程技术卵泡卵母细胞

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