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邻苯二甲酸二乙基己酯体内暴露对小鼠受精卵发育潜能的影响: 2023年; 目的:探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)体内暴露对小鼠胚胎卵裂、囊胚形成、胚胎着床及胚胎线粒体膜电位的影响。方法:将40只3周龄清洁级ICR雌性小鼠(雌鼠)随机分为DEHP低剂量(300 mg/kg)组、DEHP中剂量(600 mg/kg)组、DEHP高剂量(1200 mg/kg)组和对照组,每组10只。采用灌胃方式构建DEHP暴露小鼠模型,按照5 mL/kg给药,每周5 d,每天1次,连续染毒8周。对照组灌胃玉米油。将各组雌鼠促排卵与非染毒雄性小鼠合笼后,取受精卵行胚胎培养,比较各组胚胎卵裂率、囊胚形成率、胚胎着床位点数和胚胎线粒体膜电位的差异。结果:DEHP低、中、高剂量组小鼠胚胎卵裂率、囊胚形成率及胚胎着床位点数均低于对照组(P<0.05),随着DEHP暴露浓度的升高,囊胚形成率下降(P<0.05);DEHP低、中、高剂量组小鼠胚胎线粒体膜电位均低于对照组(P<0.001)。结论:DEHP体内暴露对早期胚胎发育有毒性作用。; 赵华王婷王璐万锋冯科韦多张翠莲; 关键词：邻苯二甲酸二乙基己酯线粒体膜电位胚胎发育小鼠

bFGF对3-硝基丙酸处理的小鼠受精卵体外发育能力的影响: 2022年; 【目的】研究在体外培养液中添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对3-硝基丙酸(3-NPA)处理的小鼠受精卵体外发育能力的影响,为提高氧化应激早期胚胎体外发育质量提供参考。【方法】在小鼠受精卵体外培养液中添加0、20、50、100和150 ng/mL bFGF,培养24、48和96 h,统计2-细胞率、4-细胞率和囊胚率,筛选最佳bFGF处理浓度。经腹腔注射12.5 mg/kg 3-NPA生产氧化应激体内受精卵,正常组小鼠腹腔注射等体积生理盐水,将获得的受精卵分为添加或不添加bFGF组,即3-NPA和3-NPA+bFGF组及对照组(C)和bFGF组,培养到囊胚后,用DCFH-DA检测胚胎内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,CMF2HC检测谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,JC-1检测早期胚胎线粒体膜电位强度。【结果】0、20、50、100和150 ng/mL bFGF组2-细胞率均无显著差异(P>0.05),100 ng/mL bFGF组囊胚率显著高于其他各组(P<0.05),150 ng/mL bFGF组4-细胞率和囊胚率均显著低于其他各组(P<0.05),因此后续试验选用100 ng/mL bFGF。3-NPA+bFGF组4-细胞率显著高于3-NPA组(P<0.05),bFGF组囊胚率显著高于其他组(P<0.05)。bFGF+3-NPA组囊胚率显著高于3-NPA组(P<0.05);与对照组相比,3-NPA组ROS水平显著升高(P<0.05),bFGF组ROS水平显著降低(P<0.05);3-NPA组GSH和线粒体膜电位水平均显著降低(P<0.05),bFGF组GSH和线粒体膜电位水平均显著增加(P<0.05)。bFGF+3-NPA组ROS水平显著低于3-NPA组(P<0.05),GSH和线粒体膜电位水平均显著高于3-NPA组(P<0.05)。【结论】在体外培养液中添加100 ng/mL bFGF可减少3-NPA诱导的胚胎氧化应激、改善胚胎线粒体功能,从而提高小鼠受精卵体外发育的能力。; 田微方妍雅柳海星李钟淑; 关键词：胚胎发育

CDC25b突变载体的构建及其在小鼠受精卵中的表达: 2020年; 目的构建小鼠细胞分裂周期蛋白25b(CDC25b)突变基因的真核表达载体,并观察其在小鼠G2期受精卵细胞中的表达。方法采用PCR法从野生型CDC25b模版上扩增CDC25b(S15A)和CDC25b(S15D)突变基因,定向插入pcDNA3.1(+)-3flag-C空载体中,由限制性内切酶BamHⅠ和KpnⅠ进行双酶切电泳后测序验证,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-3flag-CDC25b(S15A)和pcDNA3.1(+)-3flag-CDC25b(S15D)。采用脂质体法将其转染至Stbl3感受态细胞,质粒经在感受态细胞内转化、抽提、酶切及测序鉴定正确后,将重组真核表达质粒用显微注射法注射至小鼠G2期受精卵内,采用Western blot法检测重组质粒突变型CDC25b的表达。结果pcDNA3.1(+)-3flag-CDC25b(S15A)和pcDNA3.1(+)-3flag-CDC25b(S15D)真核表达载体经酶切和测序鉴定,酶切结果显示与目的片段大小一致,测序结果显示突变序列正确;将其注射至小鼠G2期受精卵48 h,可检测到细胞内CDC25b蛋白表达增加(P<0.05)。结论成功构建CDC25b(S15A)和CDC25b(S15D)真核表达载体,验证了突变型CDC25b蛋白表达,可为CDC25b对小鼠受精卵发育调节的研究提供实验基础。; 任丽芳孟峻; 关键词：真核表达载体细胞周期小鼠

AuroraA/Bora,PLK1在小鼠受精卵有丝分裂中功能的研究: 目的:有丝分裂的分子机制一直是分子生物学研究的热点问题,近年来对有丝分裂相关激酶的研究也取得了一定进展。在体细胞有丝分裂中,保守的丝苏氨酸激酶Aurora A和PLK1,对G2/M期的转化以及细胞周期的调控等都起着重要的...; 王美娇; 关键词：PLK1 受精卵有丝分裂; 文献传递

mTORC2/Akt/Girdin信号途径调控小鼠受精卵微丝聚集的研究: 目的:受精卵早期分裂及发育过程中微丝骨架(microf ilament cytoskeleton)对精卵融合、纺锤体旋转、分裂沟形成及胞质分裂的完成有着十分重要的作用。多项研究表明微丝骨架的形成受多种因子调控。在哺乳动物...; 武迪迪; 关键词：蛋白激酶B F-ACTIN 小鼠受精卵; 文献传递

PKCδ/Cdc25B通路对小鼠受精卵早期发育调控机制的研究: 目的:自1977年发现以来,蛋白激酶C(PKC)作为细胞内信号转导体系中的一个重要激酶,参与了细胞内的不同类型的生命形式,包括细胞的生长、细胞分化,进而调节细胞周期,PKC参与的细胞调亡可能和肿瘤发生有关,在很多疾病的发...; 刘艳春; 关键词：小鼠受精卵 CDC25B PKCΔ 卵裂率磷酸化去磷酸化; 文献传递

肌醇多磷酸5磷酸酶PIPP在小鼠受精卵内对细胞周期蛋白Cdc2的影响被引量：2: 2018年; 目的研究脯氨酸丰富的肌醇多磷酸5磷酸酶(PIPP)在小鼠1-细胞期胚胎中的定位以及它对Cdc2在Tyr15位点磷酸化的调节作用。方法提取质粒、酶切鉴定并转染PEFBOS PIPP质粒以及空载体PEFBOS vector到小鼠受精卵,用免疫荧光染色检测PIPP的定位,Western blot检测PIPP对Cdc2在Tyr15位点磷酸化的影响。结果PIPP的定位在小鼠受精卵有丝分裂过程中不断变化,并且PIPP在小鼠受精卵中的过度表达增加了Cdc2在Tyr15位点的磷酸化。结论 PIPP存在于小鼠受精卵中并通过调节Cdc2的磷酸化参与小鼠受精卵的有丝分裂过程。; 李森王洋郑晓娇刘玲玲冯晨俞航李亘松曹宇邓欣; 关键词：小鼠受精卵

蛋白激酶Pkmyt1与RASAL2互作及其对小鼠受精卵早期发育的影响: 目的验证蛋白激酶Pkmyt1与RASAL2在小鼠1-细胞期受精卵存在相互作用,进而研究其对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响,为探讨蛋白激酶Pkmyt1对哺乳动物胚胎早期发育调控的机制奠定基础。方法1、利用免疫共沉淀方法验证...; 张苧兮; 关键词：蛋白质相互作用; 文献传递

小鼠受精卵模拟微重力差异基因的验证及Ndufa4对其体外发育的影响: 本实验室利用转臂式生物反应器(RWVB)所产生的模拟微重力环境对小鼠受精卵进行体外培养，以平面培养作为对照，观察模拟微重力环境对小鼠受精卵的影响情况。通过单细胞测序发现C57小鼠受精卵在hCG20h、hCG后20h平面培...; 苏忆非; 关键词：受精卵体外培养模拟微重力

PKB/Akt通过Girdin蛋白调控小鼠受精卵微丝聚集被引量：1: 2016年; 通过研究PKB/Akt与Girdin蛋白之间的关系,目的在于揭示Girdin蛋白在PKB/Akt调控小鼠受精卵微丝聚集中的作用。研究中首先结合软件(http://scansite.mit.edu//)预测了PKB/Akt对Girdin蛋白的磷酸化位点,并制定特定位点磷酸化抗体,通过蛋白免疫印迹检测经PKB/Akt m RNA或PKB/Akt si RNA处理后的小鼠受精卵中Girdin蛋白磷酸化改变情况。同时检测了磷酸化的Girdin蛋白亚细胞定位及同微丝骨架的定位关系。进一步通过显微注射PKB/Akt m RNA再注射Girdin si RNA检测小鼠受精卵微丝骨架的聚集。结果显示经持续激活型PKB/Akt m RNA、野生型PKB/Akt m RNA处理后的小鼠受精卵中p-Girdin-1 417分布位置更加集中在2-细胞分裂沟处。经野生型和持续激活型PKB/Aktm RNA注射组p-Girdin-1 417表达增强,但是并不影响Girdin蛋白的总的表达。说明si RNA介导的PKB/Akt表达敲低非常明显地降低了Girdin蛋白的磷酸化。激光共聚焦研究显示在Akt m RNA和Girdin si RNA共注射组微丝骨架分布明显散乱。本研究结果充分说明Girdin蛋白在小鼠受精卵中受到PKB/Akt的调节,PKB/Akt通过磷酸化Girdin蛋白改变微丝骨架的聚集。; 武迪迪张盼盼刘莹于秉治; 关键词：PKB/AKT F-ACTIN 小鼠受精卵

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