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一种牛结节性皮肤病毒、绵羊痘病毒和山羊痘病毒的通用型试剂盒: 本发明属于检测技术领域，具体涉及一种牛结节性皮肤病毒、绵羊痘病毒和山羊痘病毒的通用型试剂盒。本发明以表达的特定重组p122蛋白为基础，以待检血清为检测样本，建立了一种牛结节性皮肤病毒、绵羊痘病毒和山羊痘病毒的双抗原夹心E...; 郑海学田宏杨洋罗俊聪石正旺张晓阳廖焕程石鑫泰张帆尉娟娟

一种山羊肾悬浮细胞培养山羊痘病毒的方法: 本发明涉及一种山羊肾悬浮细胞培养山羊痘病毒的方法，所述山羊痘病毒用作牛结节性皮肤病灭活疫苗抗原，所述方法包括：（1）通过驯化和培养山羊肾传代细胞，制备山羊肾悬浮细胞，（2）将所述山羊肾悬浮细胞进行摇瓶扩大培养；（3）接种...; 薛青红孙淼陈延飞陈建李岭

一种山羊痘病毒的定量检测方法: 本发明公开了一种山羊痘病毒的定量检测方法。该方法，包括：首先用病毒特异性检测法对目标峰进行鉴定；然后用蛋白测定仪测定标准品的浓度；将此标准品进行系列稀释，在液相色谱仪上检测标准品在280nm处的吸收峰，建立浓度和峰面积的...; 宋芳巴利民杨君敬潘文

135位点表达ORFVF1L基因的重组山羊痘病毒的构建被引量：1: 2023年; 【目的】采用Cre/Loxp基因编辑系统,在羊痘病毒135基因位点插入ORFV外源基因F1L,同时引入标记基因,从而构建重组山羊痘病毒,为临床上预防羊口疮疫苗的设计、研制提供参考。【方法】以pDonor载体为基础,135基因编码区两侧500 bp左右的片段作为上下重组同源臂,中间插入羊口疮病毒F1L基因编码区及标记基因gpt、EGFP、痘病毒早晚期启动子p7.5、p11,并且含有loxp位点,构建同源重组供体质粒命名为pGTPV(135)-ORFV-F1L;并对阳性克隆菌液进行PCR鉴定并测序,经测序正确的菌液接种氨苄LB液体培养基培养过夜,提取去内毒素的质粒并进行双酶切鉴定。山羊痘病毒弱毒株感染永生化山羊睾丸细胞2 h后,重组质粒经脂质体法转染永生化山羊睾丸细胞,观察细胞病变及EGFP标记基因的表达情况;48 h后收获病毒液,反复冻融后离心,盲传3代,通过PCR鉴定目标基因的整合情况,以羊口疮病毒阳性血清为一抗,驴抗山羊IgG为二抗,通过蛋白免疫印迹分析目标基因的表达情况来对获得的重组病毒进行鉴定。【结果】经PCR筛选,成功获得表达羊口疮病毒F1L基因的同源重组供体质粒。经过测序并与目标序列进行比对,结果正确,表明重组质粒成功构建。重组质粒经去内毒素提取后测定浓度并进行双酶切鉴定,结果与预期相符,经鉴定的重组质粒转染山羊睾丸细胞,在48 h后观察到细胞病变及绿色荧光,PCR鉴定结果表明F1L基因整合到重组病毒上。蛋白免疫印迹分析显示,检测到目标蛋白条带,说明重组山羊痘病毒插入的外源基因F1L基因成功表达。【结论】本研究成功构建了一种在135基因位点表达羊口疮病毒F1L基因的重组山羊痘病毒,并在永生化山羊睾丸细胞中,该重组病毒展现出目的基因的稳定表达。以羊痘病毒弱毒株135基因位点插入羊口疮病毒F1L外源基因,该重组病毒在永生化山羊睾丸细胞中获得,目的�; 余远迪牟豪张阳郑华李幸付利芝; 关键词：羊痘病毒羊口疮病毒重组病毒

一种山羊痘病毒的定量检测方法: 本发明公开了一种山羊痘病毒的定量检测方法。该方法，包括：首先用病毒特异性检测法对目标峰进行鉴定；然后用蛋白测定仪测定标准品的浓度；将此标准品进行系列稀释，在液相色谱仪上检测标准品在280nm处的吸收峰，建立浓度和峰面积的...; 宋芳巴利民杨君敬潘文; 文献传递

山羊痘病毒的增殖方法、山羊痘活疫苗及其制备方法和应用: 本发明提供了一种山羊痘病毒的增殖方法、山羊痘活疫苗及其制备方法和应用，涉及疫苗制备技术领域。本发明提供的山羊痘病毒的增殖方法，包括以下步骤：将山羊痘病毒在悬浮培养细胞系上传代驯化，得到驯化病毒；将细胞系进行悬浮扩大培养；...; 贺笋潘晓梅王遵宝李俊辉李晓梅张慧敏侯红娟毛丽萍周涛郭晶

基于单域抗体9-4-2免疫磁珠直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑2免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQIDNO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑2通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑2免疫磁珠。...; 尚佑军吴锦艳田宏马维民何继军颜新敏吕律杜国玉李玲霞孙健飞张成

基于单域抗体9-4-1免疫磁珠直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑1免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQ ID NO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑1通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑1免疫磁...; 吴锦艳尚佑军田宏吕律侯俊玲杨亚民冯霞何继军杜国玉李玲霞孙健飞张成

一种筛选LacZ基因标记山羊痘病毒的宿主细胞的方法: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种筛选LacZ基因标记山羊痘病毒的宿主细胞的方法，包括检测细胞的培养；将检测细胞置于底层胶为LMA，顶层胶为X‑gal、LMA混合液的培养介质中进行培养，观察培养介质中胶色变化，选择胶色...; 杨柳许国洋余远迪牟豪; 文献传递

一种共表达小反刍兽疫病毒H和F蛋白的重组山羊痘病毒: 本发明提供一种用于重组山羊痘病毒构建的重组转移载体。所述的转移载体主要包含：TK基因的左臂和右臂、两个逆向的p7.5K启动子及其分别调控的小反刍兽疫病毒H基因和F基因、p11K启动子、增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因、...; 刘拂晓李岭邹艳丽; 文献传递

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