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熊果酸干预人牙周膜干细胞分化的效应被引量:1
2025年
背景:熊果酸可促进髓间充质干细胞向细胞定向分化,但其对人牙周膜干细胞是否具有促作用目前相关报道少见。目的:探讨熊果酸对人牙周膜干细胞增殖和分化能力的影响。方法:分离、培养人牙周膜干细胞,取第3代细胞,分别采用含不同浓度(0,1,2,4,6,8μmol/L)熊果酸的普通培养基干预,干预1,3,5,7 d后,采用CCK-8法检测细胞增殖,筛选适宜干预浓度。取第3代人牙周膜干细胞,分别用含0,1,2,4μmol/L熊果酸的诱导液干预,干预7 d后,采用qRT-PCR法检测碱性磷酸酶、Runx2、钙素m RNA的表达,干预14 d后,茜素红染色观察矿化结节形。取第3代人牙周膜干细胞,对照组加入诱导液,熊果酸组、拮抗剂组分别加入含熊果酸(2μmol/L)、形态发生蛋白信号通路拮抗剂Noggin的诱导液,熊果酸+拮抗剂组加入含熊果酸(2μmol/L)、形态发生蛋白信号通路抑制剂Noggin的诱导液,培养7 d后,采用qRT-PCR和Western blot检测形态发生蛋白2、Smad1、桥蛋白、Runx2的m RNA及蛋白表达。结果与结论:(1)1,2,4μmol/L熊果酸可促进人牙周膜干细胞的增殖,6,8μmol/L熊果酸可抑制人牙周膜干细胞的增殖,后续实验选择1,2,4μmol/L熊果酸进行干预;(2)与0μmol/L相比,1,2,4μmol/L熊果酸可促进碱性磷酸酶、Runx2、钙素m RNA的表达以及矿化结节的形(P<0.05),其中以2μmol/L熊果酸效果最显著;(3)与对照组比较,熊果酸组形态发生蛋白2、Smad1、桥蛋白、Runx2的mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05),拮抗剂组上述指标的mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05);与熊果酸组比较,熊果酸+拮抗剂组上述指标的mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05);(4)结果表明,熊果酸可通过激活形态发生蛋白信号通路促进人牙周膜干细胞的分化
郑茜刘萍萍顾煜婕谢蕾
关键词:人牙周膜干细胞熊果酸成骨骨钙素骨形态发生蛋白2
Axin1在调控乳牙牙髓干细胞分化中的应用
本发明公开了Axin1在调控乳牙牙髓干细胞分化中的应用。本发明研究表明Axin1的过表达和敲低并不影响SHED的增殖和MSC特性。然而,Axin1的过表达促进了SHED的迁移,而这一作用可被Axin1沉默所减弱。Ax...
高旭广李键文黄宇航张莉萍王露薇黄文燕向茜周凤帕塔克·贾纳克·拉尔曾素娟
铁过载诱导前体细胞铁死亡并抑制分化
2025年
背景:铁过载作为诱发质疏松的独立因素,其作用机制目前尚不清楚,因此探讨铁过载对相关细胞的影响,有助于深入理解质疏松发病机制并为质疏松治疗提供潜在策略。目的:探讨铁过载环境对前体细胞活性、铁死亡及分化的影响。方法:①将前体细胞(MC3T3-E1细胞)分为空白组、铁过载组、fer-1组和去铁胺组,铁过载组在培养基中添加300μmol/L柠檬酸铁铵作用48 h模拟铁过载微环境,fer-1组和去铁胺组细胞采用5μmol/L抗氧化剂fer-1与5μmol/L去铁胺分别预处理8 h,然后加入300μmol/L柠檬酸铁铵作用48 h,采用CCK-8法测定细胞活力,采用活性氧荧光探针检测细胞内活性氧水平,采用线粒体膜电位荧光探针检测细胞内线粒体膜电位变化,使用透射电镜观察线粒体形态变化,采用还原型谷胱甘肽比色法试剂盒检测细胞谷胱甘肽水平,采用丙二醛比色法试剂盒检测细胞内脂质氧化水平,采用亚铁离子比色法试剂盒检测细胞亚铁离子水平,采用碱性磷酸酶染色、茜素红染色验证细胞及矿化能力,采用天狼星红染色检测胶原分泌能力,采用RT-qPCR及Western blot检测/铁死亡相关基因及蛋白的表达。结果与结论:①铁过载环境下,细胞线粒体膜电位下降且结构受损,细胞内脂质过氧化水平升高,铁死亡抵抗相关基因与蛋白表达均降低;而fer-1与去铁胺预处理后,细胞内线粒体膜电位升高且形态部分恢复,细胞内脂质过氧化水平降低,铁死亡抵抗相关基因与蛋白表达均升高。②铁过载环境下,细胞碱性磷酸酶含量、矿化结节形与胶原纤维生均降低,fer-1与去铁胺预处理均能逆转此现象。③综上所述,铁过载会上调细胞内氧化应激水平,介导MC3T3-E1细胞发生铁死亡并抑制分化,进而诱导质疏松。因此,维持铁稳态及抑制相关细胞铁死亡可能是预防或治疗质疏松�
潘玉赵刃峰李兴平张成栋匙峰蒲超罗栩伟肖东琴
关键词:铁过载
C18神经酰胺在促进脂肪干细胞分化方面的应用
本申请涉及C18神经酰胺在促进脂肪干细胞分化方面的应用及促进脂肪干细胞分化的方法,包括以下步骤:S1:无菌获取人体的脂肪组织;S2:将所述脂肪组织切小块,与胶原酶混合,并在37℃下进行孵育;S3:完酶解后,经...
李帅军商婷
一种间充质干细胞分化潜力的检测方法及检测试剂盒
本发明提供了一种间充质干细胞分化潜力的检测方法及检测试剂盒,属于干细胞技术领域。一种间充质干细胞分化潜力检测试剂盒,包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的反...
李青青杨文琦华江舟
植入材料表面微结构对MC3T3-E1细胞分化的影响
2025年
背景:植入材料表面微纳结构仿生设计可模拟人体天然组织中细胞外环境的结构,从而获得较为理想的整合功能,但植入材料表面微纳结构调控细胞功能及促进的机制还有待进一研究。目的:分析钛片材料微结构表面对MC3T3-E1细胞分化的影响。方法:(1)在5 V或20 V恒定电压下,采用酸蚀和阳极氧化技术在钛片表面制备不同管径的纳米管阵列,分别记为R5组、R20组。检测纯钛片(未经酸蚀和阳极氧化处理)、R5组、R20组的表面形貌、粗糙度与亲水性。(2)将对数生长期的MC3T3-E1细胞分别接种于纯钛片、R5组、R20组钛片表面,诱导培养24 h后,采用RT-PCR检测与免疫荧光染色分析细胞机械敏感通道蛋白1的表达;加入含或不含机械敏感通道蛋白1激活剂Yada1的诱导基,培养7 d后进行碱性磷酸酶染色,培养14 d后进行茜素红染色。结果与结论:(1)扫描电镜下可见纯钛片表面光滑,R5组、R20组钛片表面可见分布相对均匀且有序的纳米管阵列,平均直径分别约30 nm和100 nm,原子力显微镜进一步验证了扫描电镜观察结果。R5组钛片表面粗糙度大于纯钛片(P <0.05),水接触角小于纯钛片(P <0.05);R20组钛片表面粗糙度大于R5组(P<0.05),水接触角小于R5组(P<0.05)。(2)RT-PCR检测与免疫荧光染色显示,R5组细胞机械敏感通道蛋白1的表达高于纯钛片组(P <0.05),R20组细胞机械敏感通道蛋白1的表达高于R5组(P <0.05)。在诱导条件下,与未加入Yada1情况相比,纯钛片组加入Yada1后的细胞碱性磷酸酶活性、钙化结节沉积均无明显变化,R5组、R20组加入Yada1后的细胞碱性磷酸酶活性、钙化结节沉积均显著增加(P <0.05);在加入或未加入Yada1情况下,R5组细胞碱性磷酸酶活性与钙化结节沉积均多于纯钛片组(P <0.05),R20组细胞碱性磷酸酶活性与钙化结节沉积均多于R5组(P <0.05)。(3)结果表明,钛片表面微�
黄丽苹李卉王新革王瑞常蓓李适廷兰小蓉李广文
关键词:骨植入材料钛种植体材料微结构成骨分化
诱导人牙周膜干细胞来源外泌体促进炎症微环境下人牙周膜干细胞分化
2025年
背景:诱导间充质干细胞来源外泌体具有较强的分化能力,但是在炎症微环境下对人牙周膜干细胞分化的影响尚不明确。目的:探究诱导人牙周膜干细胞来源外泌体在炎症微环境下对人牙周膜干细胞分化的影响。方法:收集离体牙并分离培养人牙周膜干细胞,诱导3 d后提取外泌体。将人牙周膜干细胞分为4组:对照组加入诱导培养基,外泌体组加入含5μg/mL外泌体的诱导培养基,炎症模型和炎症模型+外泌体组以1μg/mL脂多糖处理24 h构建细胞炎症微环境,炎症模型组在脂多糖处理后加入诱导培养基,炎症模型+外泌体组在脂多糖处理后加入含5μg/mL外泌体的诱导培养基。通过茜素红以及碱性磷酸酶染色法检测各组人牙周膜干细胞的分化能力;实时荧光定量PCR与免疫印迹法检测各组人牙周膜干细胞中Runt相关转录因子2、桥蛋白、细胞特异性转录因子Osterix(OSX)和wnt通路相关蛋白β-catenin的表达。结果与结论:(1)与对照组相比,炎症模型组碱性磷酸酶染色相对面积、矿化结节染色相对面积以及Runt相关转录因子2、桥蛋白、OSX的表达量显著降低(P <0.05);(2)与炎症模型组相比,炎症模型+外泌体组碱性磷酸酶染色相对面积、矿化结节染色相对面积以及Runt相关转录因子2、桥蛋白、OSX的表达显著升高(P <0.05);(3)与对照组相比,炎症模型组wnt通路相关蛋白β-catenin表达量显著增加(P <0.05);与炎症模型组相比,炎症模型+外泌体组β-catenin表达量显著降低(P <0.05)。结果表明,诱导人牙周膜干细胞来源外泌体可促进炎症微环境下人牙周膜干细胞的分化,其作用机制可能与wnt/β-catenin信号通路有关。
艾克帕尔·艾尔肯陈晓涛陈晓涛
关键词:人牙周膜干细胞外泌体成骨分化
TGM2在制备调控糖尿病患者BMMSCs分化潜能和糖尿病患者缺损再生的药物中的应用
本发明涉及TGM2在制备调控糖尿病患者BMMSCs分化潜能和糖尿病患者缺损再生的药物中的应用,涉及生物医药技术领域,本发明首次发现了一种与糖尿病患者分化调控密切相关和糖尿病患者缺损再生的分子TGM2,实验结果...
陈发明甘典李璇贺小涛田蓓敏邓道坤
一种提高GMP体系下脐带间充质干细胞分化的方法
本发明涉及一种提高GMP体系下脐带间充质干细胞分化的方法,属于干细胞技术领域,解决现有方法对GMP体系下脐带间充质干细胞诱导效果差的问题。一种提高GMP体系下脐带间充质干细胞分化的方法,包括在脐带间充质干细胞...
王海方刘慧于洋
负载形态发生蛋白2水凝胶诱导牙髓干细胞的分化
2025年
背景:前期研究证明,甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶支架可促进人牙髓干细胞的增殖及分化。水凝胶负载形态发生蛋白2被认为是修复中有前景的材料。目的:观察负载不同质量浓度形态发生蛋白2的甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶对人牙髓干细胞分化的诱导作用。方法:制备含0,50,100,200μg/mL形态发生蛋白2的甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶,分别记为GelMA/TDM、BMP-2(50 ng/mL)GelMA/TDM、BMP-2(100 ng/mL)GelMA/TDM、BMP-2(200 ng/mL)GelMA/TDM,检测复合水凝胶对形态发生蛋白2的体外缓释性能。采用改良组织块酶消化法提取人牙髓干细胞,分别接种于4种水凝胶表面,采用CCK-8法检测细胞增殖,DAPI染色检测细胞黏附;对各组水凝胶表面的人牙髓干细胞进行诱导,进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性检测与茜素红染色,采用RT-PCR法检测相关基因(Runx2、形态发生蛋白2、桥蛋白、钙素、Ⅰ型胶原)表达。结果与结论:①甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶可持续释放形态发生蛋白2长达21 d,在第3-6天释放较快,第6天之后释放趋于平稳;②4种水凝胶均可促进人牙髓干细胞的增殖,其中以BMP-2(100 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶的作用最明显;相较于GelMA/TDM复合水凝胶,BMP-2-GelMA/TDM复合水凝胶可促进人牙髓干细胞的黏附,其中以BMP-2(200 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶的作用最明显;③相较于GelMA/TDM复合水凝胶,BMP-2-GelMA/TDM复合水凝胶可提升碱性磷酸酶活性、钙结节含量与相关基因表达,综合分析显示BMP-2(100 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶的作用更明显;④结果表明,BMP-2(100 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶促进牙髓干细胞分化的能力更明显。
伊斯拉尔古丽·麦麦提贾森刘佳
关键词:人牙髓干细胞

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曹均凯
作品数:120被引量:322H指数:11
供职机构:中国人民解放军总医院
研究主题:成骨分化 颞下颌关节 诱导性多潜能干细胞 镁黄长石 偏侧咀嚼
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作品数:99被引量:302H指数:9
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研究主题:骨形态发生蛋白 成骨分化 间充质干细胞 骨肉瘤 肺炎链球菌
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作品数:1,592被引量:8,949H指数:43
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作品数:1,172被引量:4,646H指数:26
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研究主题:颞下颌关节 下颌骨 老年人 成骨细胞 口腔
鄂玲玲
作品数:198被引量:550H指数:13
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