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乳酸对成骨样细胞成骨表型及碱性磷酸酶基因表达的影响研究: 2023年; 目的明确聚乳酸降解终产物乳酸对细胞成骨表型和基因表达的影响机理,为聚乳酸支架的精确设计提供参考意义。方法配制乳酸浓度为8、16、22、27 mmol/L的培养基,将不含乳酸培养基作为对照组,检测培养基的pH和渗透压。利用培养基培养大鼠成骨样细胞Ros17/2.8,观察细胞形态,测定细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨钙素含量,盐酸四环素染色钙结节并定量分析。采用实时定量PCR法检测细胞ALP mRNA表达。结果与对照组相比,随着乳酸浓度增加,培养基pH下降,渗透压升高,成骨样细胞形态改变,数量减少。低浓度乳酸组(8、16 mmol/L)的Ⅰ型胶原量都显著高于对照组,其余组与对照组相比无显著差异。含乳酸组的细胞ALP活性都低于对照组,并且乳酸浓度越高,细胞ALP活性越低。含乳酸组的骨钙素量与对照组之间没有显著差异。随着乳酸浓度增加,含乳酸组细胞所形成的钙结节阳性面积减少,都低于对照组。低浓度乳酸组(8、16 mmol/L)的细胞ALP mRNA表达量都低于对照组。结论聚乳酸降解终产物乳酸可抑制细胞ALP mRNA的表达,降低ALP活性。随着乳酸浓度增加,乳酸抑制作用增强,最终降低细胞的成骨矿化能力。此外,乳酸不会抑制细胞分泌I型胶原和骨钙素。; 刘艳军刘艳军李淑英徐永平陈元维; 关键词：聚乳酸乳酸成骨样细胞成骨表型基因表达

黄芪甲苷和柚皮苷对成骨样细胞增殖迁移及成骨分化的影响: 2023年; 目的:观察黄芪甲苷和柚皮苷两种中药单体对人成骨样细胞MG-63增殖、迁移和成骨分化的影响。方法:应用CCK-8法观察两种单体对MG-63细胞增殖的影响;应用Transwell小室观察两种中药单体对MG-63细胞迁移的影响;应用茜素红染色法观察两种中药单体对细胞成骨分化的影响,应用Western Blot和qRT-PCR检测两种中药单体对成骨相关标志物I型胶原COL-I和骨钙素BGP mRNA与蛋白表达的影响。结果:黄芪甲苷和柚皮苷均能明显促进MG-63细胞增殖(P<0.01),柚皮苷的作用强于黄芪甲苷(P<0.05);黄芪甲苷和柚皮苷均能促进MG-63细胞的迁移(P<0.01),黄芪甲苷对细胞迁移能力的作用要强于柚皮苷(P<0.01);黄芪甲苷和柚皮苷均具有促进MG-63细胞成骨分化的作用,二者比较未见明显差异;黄芪甲苷和柚皮苷均能提高COL-I的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),均不影响BGP的表达水平,两种药物比较未见明显差异。结论:本研究中黄芪甲苷与柚皮苷对成骨样细胞增殖迁移和成骨均有促进作用,但柚皮苷促进细胞增殖作用明显,黄芪甲苷促进细胞迁移作用明显,两种药物对细胞成骨分化的影响未见明显差异。; 韩萌高维诺张红艳韩燕郭立华; 关键词：黄芪甲苷柚皮苷成骨样细胞增殖迁移成骨

牙龈间充质干细胞来源外泌体对成骨样细胞MC3T3-E1体外增殖和成骨分化的影响被引量：1: 2022年; 背景牙龈间充质干细胞(gingival mesenchymal stem cells,GMSCs)来源外泌体具有与GMSCs相似的生物学功能,在组织工程领域具有良好的应用前景,但目前缺乏其在骨再生中应用的研究报道。目的探讨GMSCs来源外泌体对成骨样细胞MC3T3-E1体外增殖和成骨分化的影响。方法体外培养GMSCs,超速离心法提取GMSCs来源外泌体。共聚焦显微镜下观察MC3T3-E1细胞对外泌体的内化摄取。CCK-8法和划痕实验分别检测不同浓度外泌体作用下MC3T3-E1细胞增殖和迁移变化情况。外泌体作用于MC3T3-E1细胞后,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测ALP活性,茜素红染色及定量实验检测钙结节形成状况;RT-qPCR法检测成骨相关基因ALP、COL1A1、RUNX2的m RNA表达水平。结果提取的GMSCs来源外泌体呈现类圆形膜状结构,大小在100 nm左右,表达CD63和Tsg101。外泌体能被MC3T3-E1摄取。GMSCs来源外泌体能够促进MC3T3-E1细胞的增殖和迁移(P<0.05),且呈剂量依赖性;外泌体作用下,MC3T3-E1细胞ALP活性增加(P<0.05),钙结节形成增多(P<0.05),成骨相关基因ALP、COL1A1、RUNX2的mRNA表达水平明显上调(P<0.05)。结论 GMSCs来源外泌体具有增强MC3T3-E1增殖及成骨分化的作用,这为GMSCs来源外泌体应用于骨再生治疗奠定基础。; 王思拓时权杨烁刘紫微邹蓉芳徐娟; 关键词：外泌体成骨分化

健骨胶囊对成骨样细胞MC3T3-E1增殖及分化作用机制被引量：3: 2022年; 目的探讨国医大师刘柏龄“健骨胶囊”对MC3T3-E1成骨细胞分化及增殖的影响。方法制备健骨胶囊水提物,采用CCK-8法和细胞迁移实验检测健骨胶囊提取物对MC3T3-E1细胞增殖和细胞迁移的影响;茜素红染色检测MC3T3-E1细胞的矿化能力;实时荧光定量PCR检测成骨分化基因Runx2、OCN、OPN、Col1a1、ALP、Bcl2、RASSF1A等mRNA表达水平;蛋白质印迹法Western blot检测Col1a1、Bcl2的蛋白表达水平。结果通过实验结果比对得出,健骨胶囊提取物能促进MC3T3-E1细胞增殖、使细胞迁移率提高;同时健骨胶囊提取物组能明显提高MC3T3-E1细胞钙化能力(P<0.01),促进Runx2、OCN、OPN、Col1a1、ALP、Bcl2的mRNA表达(P<0.05),上调Col1a1、Bcl2蛋白量的表达。结论健骨胶囊能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖及细胞迁移能力,并通过上调成骨基因的表达水平如Runx2、OCN、OPN、Col1a1、ALP、Bcl2等,提高MC3T3-E1细胞的成骨能力。; 贾玉岩周振薇王旭凯杨宇安刘茜幺宝金冷向阳; 关键词：健骨胶囊中医中药 MC3T3-E1细胞细胞增殖成骨分化

MiR-34a可双向调控感染及非感染状态成骨样细胞的成骨分化: 2021年; 目的将微小RNA-34a(miR-34a)转染至健康及炎症状态下成骨样细胞,检测其对细胞成骨分化能力的影响。方法取人成骨样细胞(MG63)为实验细胞,将miR-34a拟态物转染至细胞并用实时定量PCR法(RTPCR)及荧光显微镜检测转染效率。RT-PCR检测受牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染的MG63细胞内miR-34a表达量变化及转染miR-34a后健康或炎症状态下MG63细胞中成骨相关因子Ⅰ型胶原(COLⅠ)、Runt相关转录因子2(Runx2)及Osterix成骨相关转录因子(SP7)表达量变化。结果 MiR-34a有效转染至MG63细胞内;miR-34a可促进MG63细胞内COLⅠ、Runx2及SP7基因表达;炎症状态下MG63细胞内miR-34a表达量下降;miR-34a降低感染状态下MG63细胞内COLⅠ、Runx2及SP7基因表达量。结论证实miR-34a促进MG63细胞成骨分化,当细胞处于感染状态时,其抑制细胞成骨分化。; 高涵林崇韬; 关键词：人成骨样细胞 MIR-34A

人成骨样细胞在糖交联胶原支架材料中的黏附和整合素表达被引量：1: 2021年; 目的探讨人成骨样细胞在糖交联胶原支架材料中的黏附和整合素表达。方法将SAOS-2细胞接种于糖交联胶原支架表面,共培养3周后,采用扫描电子显微镜观测材料表面细胞形态,通过细胞示踪、整合素(Integrin-β1)免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜观测细胞活性和在材料表面的黏附。结果人成骨样SAOS-2细胞可在糖交联胶原支架材料表面黏附,形成细胞膜片样结构,并表达细胞黏附因子Integrinβ1。结论糖交联胶原支架材料表现出良好的生物相容性,可在体外促进人成骨样SAOS-2细胞的黏附,并诱导整合素Integrinβ1表达,进一步调控细胞向成骨方向分化。; 凌建军赵涵; 关键词：细胞黏附整合素成骨分化

p53对平滑肌细胞向成骨样细胞转分化的影响被引量：1: 2021年; 目的探讨p53在动脉钙化中对平滑肌细胞向成骨样细胞转分化的影响。方法21只健康雄性apoE-/-小鼠,6~8周龄,高脂饮食12周后,随机分为3组:对照组(Con组)、p53激动剂Parthenolide组(Par组)、p53抑制剂Pifithrin/-u组(PFT-u组),给药4周。处死动物后对主动脉油红O染色,颈总动脉茜素红染色、HE染色,主动脉血管功能实验。结果与对照组相比,p53抑制剂能显著减少动脉粥样硬化斑块面积、减少血管腔狭窄、抑制动脉内膜增生,改善胸主动脉血管功能。结论p53抑制剂可以抑制动脉粥样硬化斑块的形成。; 刘菲李清洁李世环李敏才; 关键词：动脉粥样硬化血管平滑肌细胞 P53 成骨样细胞

糖交联胶原-羟基磷灰石复合支架材料对人成骨样细胞的黏附影响: 2021年; 目的在糖交联胶原-羟基磷灰石颗粒支架材料表面接种人成骨样SAOS-2细胞,评价其对SAOS-2细胞活性、黏附的影响。方法采用扫描电子显微镜观测材料表面和剖面内细胞生长形态,通过细胞示踪、免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜观测细胞活性和在材料表面/内部的黏附。结果人成骨样SAOS-2细胞可在支架材料表面黏附,伸展伪足迁移入支架材料内部黏附生长,支架材料上的SAOS-2表达细胞黏附因子Integrin-α2β1。结论人成骨样SAOS-2细胞可在糖交联胶原-羟基磷灰石支架材料表面生长并长入材料海绵状孔隙内,该材料表现出良好的生物相容性,人成骨样SAOS-2细胞与I型胶原纤维基质黏附界面可检测到整合素Integrin-α2β1表达。; 赵涵胡景超; 关键词：细胞黏附整合素成骨分化

一种靶向RunX2基因的小鼠成骨样细胞慢病毒载体及其构建方法: 本发明属于生物医药技术领域，涉及一种靶向Runx2基因的小鼠成骨样细胞慢病毒载体及其构建方法。该构建方法包括以下步骤：步骤1：根据Runx2基因序列，设计合成双链DNA片段；步骤2：将合成的双链DNA片段连接到GV493...; 秦晗蔡军龚永庆; 文献传递

p53在动脉钙化中对平滑肌细胞向成骨样细胞转分化的影响: 研究目的:血管钙化（vascular calcification）是动脉粥样硬化、高血压病、血管损伤、糖尿病血管病变、慢性肾病和衰老等多种疾病普遍共同存在的病理表现。血管平滑肌细胞（vascular smooth mus...; 刘菲; 关键词：P53 BMP2; 文献传递

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