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IgG型自身抗体Fab段遮断红细胞自身抗原的探索研究: 2024年; 目的应用自身抗体的Fab段结合红细胞上的自身抗原,以遮断完整自身抗体与自身抗原的结合。方法含自身抗体的患者血清,通过吸收放散试验获得成分单一的自身抗体,再应用木瓜酶37℃过夜水解自身抗体IgG分子获得Fab段,用Fab段特异性结合相对应的自身抗原,从而遮断完整自身抗体与自身抗原的结合。结果3例含自身抗体的患者血浆标本,经过吸收放散试验获得的组分单一的自身抗体,均经过木瓜酶水解处理生成Fab段,此Fab段与各自放散液中的完整自身抗体混合后,均能遮断完整自身抗体与红细胞自身抗原的结合。同时3例标本之间,1号标本与2号标本的有相互遮断效应,而2号标本和3号标本之间未见相互遮断效应。结论自身抗体Fab段能消除完整自身抗体与红细胞自身抗原的凝集,此方法可以应用到临床实践中,解决多种临床问题。; 黄海涛温学红; 关键词：自身抗体 FAB片段

一种细胞表面标志物抗体Fab段修饰的小分子药物/治疗基因递送系统、制备方法和应用: 本发明公开了一种细胞表面标志物抗体Fab段修饰的小分子药物/治疗基因递送系统及其制备方法和应用，所述递送系统包括脂质双分子膜和药物载体，所述脂质双分子膜经在接触胎盘组织间液高表达的酶的作用下靶向崩解的酶底物多肽‑PEG修...; 郭宇郭若汨姚清河李文滨曹众吴志强王伟伟李庆玲梁莹孙美丽陈珺逸

抗Siglec-9抗体Fab段对LPS诱导的小鼠巨噬细胞炎症反应的作用研究被引量：1: 2022年; 目的初步探讨抗Siglec-9抗体Fab段在小鼠巨噬细胞上对LPS诱导的炎症反应的作用及其机制。方法将小鼠巨噬细胞分为对照组、LPS组、LPS+Ab组、Ab组,采用实时荧光定量PCR技术检测TNF-α、IFN-β、IL-1、IL-6等炎性细胞因子的mRNA水平;采用ELISA检测炎性细胞因子的蛋白水平;通过Western blot初步探讨抗Siglec-9抗体Fab段影响炎性细胞因子表达量的作用机制。结果与LPS组相比,抗Siglec-9抗体Fab段抑制炎性细胞因子的mRNA和蛋白水平,降低TLR4信号通路磷酸化水平。结论抗Siglec-9抗体Fab段通过阻断TLR4信号传导通路抑制炎性细胞因子的m RNA和蛋白水平,在感染性疾病中具有潜在的应用价值。; 褚萨萨高峰张东辉付美丽刘兴徐成张乃春汪茂荣; 关键词：巨噬细胞炎性细胞因子

一种细胞表面标志物抗体Fab段修饰的小分子药物/治疗基因递送系统、制备方法和应用: 本发明公开了一种细胞表面标志物抗体Fab段修饰的小分子药物/治疗基因递送系统及其制备方法和应用，所述递送系统包括脂质双分子膜和药物载体，所述脂质双分子膜经在接触胎盘组织间液高表达的酶的作用下靶向崩解的酶底物多肽‑PEG修...; 郭宇郭若汨姚清河李文滨曹众吴志强王伟伟李庆玲梁莹孙美丽陈珺逸; 文献传递

人源抗寨卡病毒单克隆抗体Fab段基因的获得和表达: 2019年; 目的利用噬菌体表面展示技术进行人源抗寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)噬菌体抗体库的构建及其基因工程单克隆抗体Fab段基因的获得和表达,掌握人源噬菌体抗体库的制备和针对特定病毒高度特异性的抗体筛选方法。方法收集寨卡病毒病康复期患者的全血样本,分离淋巴细胞,采用RT-PCR方法成功地从淋巴细胞Ig mRNA中扩增出抗体轻链和重链Fab段基因,利用pComb3H系统成功构建具有基因多样性的人源抗ZIKV噬菌体抗体库制备。利用已纯化的ZIKV和已获得的ZIKV E蛋白抗原对已建立的抗体库进行富集筛选。结果本研究成功地构建人源抗ZIKV噬菌体抗体库,并获得针对ZIKV E蛋白抗原的单克隆抗体Fab段基因,该基因能在大肠埃希菌中进行有效表达。结论根据其序列分析研究表明,该单抗为一株新的抗ZIKV的人源基因工程抗体,这对建立ZIKV快速特异的早期诊断方法,获得特异性ZIKV人源治疗单抗奠定基础。; 袁润余孙丽娜苏娟纪洵敏梁均和陈茂余梁米芳柯昌文; 关键词：人源基因工程抗体噬菌体表面展示

抗Siglec-9抗体Fab段抑制脂多糖诱导的炎性反应的体外研究: 研究目的:Siglec-9属于免疫球蛋白超家族的成员，归属于CD33相关的Siglec，通过识别含有唾液酸的糖链结构，在细胞增殖、活化以及凋亡和自噬方面发挥重要作用，同时参与调控机体的固有免疫和适应性免疫。Siglec-...; 褚萨萨; 关键词：基因工程脂多糖诱导炎性反应体外活性

人源性促甲状腺激素受体抗体Fab段抗体库的构建被引量：1: 2015年; 目的通过噬菌体表面展示技术，构建人源性促甲状腺激素受体抗体（TRAh）Fah片段抗体库。方法从甲状腺功能亢进症患者外周血单个核细胞抽提总RNA，PCR法扩增免疫球蛋白分子轻链κ、λ基因及重链Fd基因。构建轻链文库及组合文库。一个随机的组合文库在噬菌体表面表达。结果从外周血单个核细胞中抽提得到总RNA，并反转录获得cDNA文库。PCR法扩增了大小约为680bp的轻链κ、λ基因及重链Fd基因，并构建了库容为1．32×10s基因抗体库（轻链库）和库容为2．28×10 5Fab抗体库（组合文库）。Fah组合文库转化到大肠杆菌XL1-Blue感受态细胞，在辅助噬菌体M13K07的辅助下，扩增得到噬菌体抗体库。结论噬菌体表面展示技术可成功构建人源性TRAbFab片段组合文库。; 杜晓明李宁宋春青方佩华; 关键词：噬菌体表面展示技术人源性单克隆抗体

抗EV71病毒人源抗体Fab段表达基因的构建及序列分析被引量：1: 2014年; 目的从成人外周血淋巴细胞中扩增抗体可变区并构建人源抗体Fab段表达基因,为构建抗EV71病毒人源化单克隆抗体库奠定基础。方法从EV71病毒中和抗体阳性且免疫功能健全的成人全血中,分离淋巴细胞并提取总RNA,经反转录获得cDNA。用一组人IgG Fab基因特异性引物,从合成的cDNA中分别扩增抗体轻、重链可变区,应用重叠PCR技术构建Fab段表达基因,测序分析抗体基因的多样性。结果成功扩增人抗体可变区基因并组装Fab段表达盒,表达盒的长度约为1 500bp,测序分析结果表明,Fab段的多样性可达94.12%。结论成功构建人源抗体Fab段基因,为抗EV71病毒人源性单克隆抗体库的制备奠定了基础。; 余艳琼翁育伟严延生; 关键词：肠道病毒71型人源化 FAB

抗人膀胱癌单克隆抗体Fab段与超抗原偶联蛋白的制备及T淋巴细胞刺激活性鉴定: 2009年; 目的制备超抗原与抗人膀胱癌单克隆抗体Fab偶联蛋白并鉴定其活性。方法以木瓜蛋白酶、BDI-1抗体比率1：100制备的Fab与SEA以5倍抗体过量用SPDP偶联；经surper-dex-200柱纯化；SDS-PAGE确定纯度及相对分子质量；免疫组织化学法鉴定抗体活性；CCK-8、酶联免疫吸附试验（ELISA）法分析偶联蛋白促PBMC增殖、分泌活性。结果偶联蛋白、Fab、SEA洗脱出峰时间分别为16、27．5、30min；SDS-PAGE电泳显示在250×10^3出现连续条带；免疫组织化学显示仅偶联蛋白组膀胱癌细胞膜呈阳性染色；CCK-8、ELISA法显示偶联蛋白促PBMC增殖指数PI介于1．1±0．1～2．3±0．1；PBMC上清白细胞介素（IL）-2、肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-γ浓度分别为（136．1±12．8）、（140．8±21．8）、（207．7±10．5）ng／L，与SEA组差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论成功制备BDI-1 Fab-SEA偶联蛋白，偶联蛋白仍保持良好的T细胞刺激活性和抗体活性。; 贡震韩从辉郝林李怀富郑巍杨建军汤文浩; 关键词：超抗原单克隆抗体膀胱癌

人抗体Fab段天然抗体库的建立被引量：2: 2008年; 目的:提取健康人外周血淋巴细胞的mRNA,利用反转录PCR方法,建立一个大容量的人抗体Fab段的天然抗体库。方法:收集健康者外周血,提取淋巴细胞,以淋巴细胞mRNA为模板,扩增人抗体Fab段,连入载体pComb3内,利用电转化的方法,构建噬菌体抗体库。结果:最终建立了重链库为1.73×107,轻链库为8.52×104的天然抗体库,并利用酶切鉴定计算出实际库容为重链库1.21×107,轻链库4.26×104,所以理论上所建天然噬菌体抗体库总的库容量可以达到5.15×1011。结论:成功构建了一个大容量的完全人源化的天然抗体库。; 韦晓明苏明权杨安钢温伟红郝晓柯; 关键词：FAB 反转录PCR

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