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一种蜱源抗病毒活性多肽及其应用
本发明公开了一种蜱源抗病毒活性多肽及其应用,属于生物技术领域。本发明的蜱源抗病毒活性多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其在低浓度时就能很好的抑制发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)复制,在预防或者治疗由S...
曹志贱吴英亮王路瑶
具有亲溶酶体和抗病毒活性的化合物
本发明涉及药理学领域,并且更具体地涉及具有亲溶酶体活性的化合物。提议使用已知的化学化合物作为具有亲溶酶体和抗病毒活性的剂。本发明进一步涉及包含所述具有亲溶酶体活性的化合物的药物组合物和药剂。发现的所述化合物在溶酶体中选择...
亚历山大·利沃维奇·弗拉德金叶卡捷琳娜·康斯坦丁诺芙娜·扎哈罗娃
具有抗病毒活性的酰胺衍生物
本发明提供具有抗病毒活性的、式(I):<Image file="DDA0004485601980000011.GIF" he="281" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" inli...
冈野梓馆野佑介野津浩平铃木慎司秋山俊行的山正明赤座博人福田高志
藏獒IFN-γ基因在毕赤酵母中的表达与抗病毒活性分析
2024年
采用毕赤酵母表达系统表达藏獒γ-干扰素(Tibetan mastiff interferon gamma,TmIFN-γ)并分析其生物活性,为抗病毒生物制品的研发与临床应用奠定基础。将构建的TmIFN-γ的真核表达质粒pPIC9k-TmIFN-γ转化至毕赤酵母GS115细胞,用不同浓度的G418筛选得到多拷贝重组菌株;利用甲醇进行诱导表达,以镍层析柱纯化目的蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定;通过CCK-8试验检测重组TmIFN-γ蛋白的细胞毒性作用,利用VSV-MDBK系统检测其抗病毒生物活性。结果显示,成功筛选得到高拷贝pPIC9k-TmIFN-γ重组转化毕赤酵母菌株,利用甲醇诱导可获得TmIFN-γ重组蛋白,该蛋白对细胞无毒性,具有显著抗病毒活性,其抗病毒生物效价为1.727×10~5IU/mL。本研究获得了具有抗病毒活性的TmIFN-γ,有助于进一步探索TmIFN-γ的功能和开发新型基因工程抗病毒药物。
宋世斌何小兵景志忠陈国华
关键词:酵母表达抗病毒活性
重组犬IFN-α的原核表达及抗病毒活性研究
2024年
本试验旨在建立犬α干扰素(CaIFN-α)原核表达及纯化方法,并对其抗病毒活性进行研究。通过构建pET-28a/CaIFN-α表达载体,高效表达和纯化rCaIFN-α;采用CCK-8法在犬肾细胞(MDCK)上测定rCaIFN-α的细胞毒性,在MDCK/VSV系统中测定其抗病毒活性效价;RT-qPCR检测rCaIFN-α作用MDCK细胞后下游ISGs的表达水平;进一步利用TCID 50和间接免疫荧光(IFA)测定rCaIFN-α抗犬副流感病毒(CPIV)和犬瘟热病毒(CDV)的感染能力。电泳和Western-blot结果显示,成功制备原核表达的特异性rCaIFN-α;CCK-8结果显示重组蛋白无明显细胞毒性,细胞病变抑制法测定抗VSV病毒活性效价为1.39×107 U/mL;RT-qPCR显示rCaIFN-α可显著上调ISG15、Mxl等ISGs的转录水平;IFA等结果显示,rCaIFN-α对CPIV和CDV具有良好的抗病毒作用。结果表明,本试验制备的rCaIFN-α具有优良的抗病毒感染活性,为进一步研发新型宠物抗病毒制剂奠定了基础。
李乐琴曹众达李海珠杜吉革朱真陈小云罗玉峰胡仕凤印春生
关键词:原核表达抗病毒活性
重组猪干扰素α发酵纯化与抗病毒活性测定
2024年
本研究根据大肠杆菌的密码子偏好性,对UniProt数据库中的猪干扰素α序列(编号:P49879)进行优化,合成了相应的基因片段,并构建了pET-28a-INF-α原核表达载体。将重组载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达,经过20 L发酵罐培养24 h,在OD 600为108时收获细胞。表达的猪干扰素α主要以包涵体的形式存在,经过变性、复性、镍亲和纯化与酶切等步骤,得到了无标签的猪干扰素α蛋白。SDS-PAGE电泳显示,该蛋白的分子量约为19 kDa,纯度高达95%。细胞病变抑制法测定表明,该蛋白的抗病毒活性为1.28×10^(7 )IU/mg。本研究成功获得了高纯度、高活性的猪干扰素α蛋白,为进一步推进蛋白药物在临床上的应用奠定了基础,为进一步重组蛋白工业化生产提供了理论依据。
陈红艳施忠芬胡媛媛法林荣张涛
关键词:发酵纯化抗病毒活性
铁蛋白与犬α干扰素的融合表达及抗病毒活性检测
2024年
为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物,本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列(IFN2a)合成模板,通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游,并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中,获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE),蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定,获得约89 kDa的可溶性重组目的蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后,使用犬肾细胞/水疱疹性口炎病毒(MDCK/VSV)微量细胞病变抑制法检测抗病毒活性,效价确定为8×104 IU/mg,显示出良好的应用前景。
宋若楠刘春草李航王真真贾楠楠朱杰朱杰李传峰梁留存刘光清刘光清王金泉
关键词:铁蛋白抗病毒活性
连翘半日花烷型二萜和生物碱类化合物及其抗病毒活性
2024年
研究连翘抗炎、抗病毒活性部位中的化学成分及其抗病毒活性。通过综合运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及高效制备色谱等方法对连翘中的化合物进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据对化合物的结构进行鉴定,采用MTT法对得到的部分化合物进行抗病毒活性研究。结果表明,从连翘体积分数95%乙醇提取物的氯仿部位和乙酸乙酯部位分离得到9个半日花烷型二萜和6个生物碱类化合物。9个半日花烷型二萜分别为:19-hydroxy-ent-labda-8(17),13 E-dien-15-oic acid(1);ent-labda-8(17),13 Z-dien-15,19-dioic acid(2);ent-labda-8(17),13 E-dien-15,19-dioic acid(3);3β-hydroxy-8(17),13 E-labdadien-15-oic acid(4);enantio-labda-8(20),13 E-dien-15,18-dioic acid(5);Forsyshiyanin A(6);Forsyshiyanin B(7);18-hydroxy-7-oxolabda-8(9),13 E-diene-15-oic acid(8);3-hydroxy-8(17),13 E-labdadien-15-oic acid(9)。6个生物碱类化合物分别为:Forsyshiyanine A(10);(7 R)-6,7-dihydro-7-methyl-5H-cyclopenta[c]pyridine(11);Forsyshiyanine B(12);(-)-bicuculline(13);(-)-egenine(14);(-)-7′-O-methylegenine(15)。其中化合物10、12为首次从连翘中发现,也是首次从连翘属植物中发现。MTT结果显示,化合物1、2、10、12对于H1N1流感病毒及呼吸道合胞病毒的增长具有抑制作用。
孙丽彤李伟赵琳戴胜军
关键词:连翘生物碱抗病毒活性
枯草芽孢杆菌代谢产物抗病毒活性物质的筛选鉴定及作用机制研究
病毒感染引起的传染性疾病严重威胁动物和人类健康。抗病毒药物是治疗病毒感染的重要策略之一,但目前兽医临床上用于治疗的抗病毒药物种类有限。天然抗病毒药物因结构新颖、作用机制多样且生物安全性高等优点,成为开发新型抗病毒药物的重...
王晓丽
关键词:枯草芽孢杆菌代谢产物伪狂犬病毒抗病毒活性小分子化合物
纺织品 抗病毒活性的测定
本文件描述了测定纺织品抗病毒活性的试验方法。由于病毒存在个体敏感性差异,一种测试病毒的结果不能等同于其他病毒。本文件适用于机织物、针织物、非织造布、纤维、纱线、编织物等纺织品。
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作品数:128被引量:141H指数:7
供职机构:江苏科技大学
研究主题:抗病毒活性 点突变 家蚕 抗原 在家
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供职机构:中国农业科学院生物技术研究所
研究主题:家蚕 杆状病毒表达系统 昆虫 抗病毒活性 在家
李轶女
作品数:163被引量:393H指数:11
供职机构:中国农业科学院生物技术研究所
研究主题:抗病毒活性 抗原 杆状病毒表达系统 铁蛋白 自组装
胡小元
作品数:69被引量:51H指数:4
供职机构:中国农业科学院生物技术研究所
研究主题:抗病毒活性 抗原 铁蛋白 自组装 点突变
李玉环
作品数:140被引量:240H指数:8
供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所
研究主题:冠状病毒 冠状 抗病毒活性 类化合物 病毒药物