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改良 CTAB 法 提取不同作物总RNA技术研究被引量:1 2024年 为提高操作效率,本研究开发出一种简洁有效的作物总RNA提取方法 。研究以油菜、棉花、花生、小麦、马铃薯、玉米、大豆、西葫芦等作物的不同组织为试材,通过CTAB 法 、改良 CTAB 法 及TanSzol Reagent试剂盒法 提取总RNA,检测结果发现,经过改良 后的CTAB 法 提取的总RNA质量较高。在油菜花瓣、小麦、花生、西葫芦叶片中,该方法 获得了较高的总RNA得率,分别为24.5、23.7、26.4、17.35μg/mL;OD260/280和OD260/230值分别为1.90、1.73、1.72、1.80和2.10、1.50、2.01、1.70。综合比较以上3种方法 ,改良 后的CTAB 法 适用于油菜、小麦、花生、西葫芦等作物的总RNA提取,为后续分子生物学检测奠定了基础。 刘国梅 郭淑慧 孙璇 姚琳 张高扬 杜春芳关键词:改良CTAB法 总RNA RNA提取 一种利用改良 CTAB 法 提取铁皮石斛茎基因组DNA的方法 本发明涉及CTAB 法 提取植物基因组DNA技术领域,具体是指一种利用改良 CTAB 法 提取铁皮石斛茎基因组DNA的方法 ,具体包括以下步骤:(1)材料研磨:取200mg铁皮石斛茎置于提前预冷的研钵中研磨成粉末,将研磨后的粉末转移... 吴欣仪 陈建兵 陈利君 王蒙 郑芳一种改良 CTAB 法 抽提多糖多酚类植物RNA的方法 本发明涉及植物RNA提取技术领域,具体涉及一种改良 CTAB 法 抽提多糖多酚类植物RNA的方法 。该方法 包括以下步骤:将植物组织样品研磨至粉末状,加入改良 后的提取液水浴裂解提取,离心收集上清,加入等体积氯仿混匀后静置,离心收集... 李小康 罗骏 王飞 王洋 汪德鹏4种改良 CTAB 法 提取石榴成熟叶片DNA的比较研究 被引量:10 2021年 为研究从成熟石榴叶片中提取高质量基因组DNA的方法 ,根据成熟石榴叶片组织中富含多酚、多糖的特点,以峄城中国石榴种质资源圃20种石榴成熟叶片为材料,分别采用改良 CTAB 法 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)4种方法 提取成熟石榴基因组DNA,通过琼脂糖凝胶、紫外分光光度计分析、ISSR扩增等方法 检测所提取DNA的质量。结果表明,改良 CTAB Ⅳ法 能从各个石榴品种的成熟叶片中提取出基因组DNA,琼脂糖电泳胶孔干净,无拖带,且DNA的纯度和完整性都较好,OD260 nm/OD280 nm的比值均为1.8~2.0,无降解现象,其质量、产量都高于其他改良 CTAB 法 。ISSR-PCR扩增结果表明,此方法 提取的基因组总DNA完全适于ISSR分析。其主要的步骤是:在石榴叶片的研磨中添加Vc、PVP等抗氧化物质,加入CTAB 提取液后65℃水浴30 min后冷却至室温,离心条件为15℃、10 000 r/min、10 min, DNA粗提液用氯仿抽提3次,可获得高质量DNA。 谭小艳 马耀华 郝兆祥关键词:石榴 改良CTAB法 基因组DNA 一种利用改良 CTAB 法 提取兜兰基因组DNA的方法 一种利用改良 CTAB 法 提取兜兰基因组DNA的方法 ,包括以下步骤:(1)兜兰叶片的采集与筛选,(2)超低温粉碎,(3)超声波辅助温育,(4)共振声混合乳浊,(5)DNA的沉淀制备,(6)DNA的精制与储藏。本发明的提取兜兰... 丁勇 常玮 邵亚林文献传递 改良 CTAB 法 提取红肉火龙果果实不同组织总DNA及质量检测被引量:5 2019年 为探求红肉火龙果果实不同组织DNA含量情况,本研究以成熟期红肉火龙果果实为材料,采用改良 CTAB 法 对火龙果果肉、果皮、种子进行总DNA提取。结果表明:红肉火龙果果肉、果皮、种子的OD260/OD280光吸收值分别为1.9827,1.9844,1.9975,均在1.8≤OD260/OD280<2.0,说明DNA纯度均很好。同一红肉火龙果果实不同组织中DNA浓度各不相同,其中种子中的DNA浓度为0.135μg·mL^-1,含量最高,其次果皮中的DNA浓度0.078μg·mL^-1,果肉中DNA浓度最低,为0.036μg·mL^-1。 杨运良 李建勋 丁宵 郭创业 董少鹏 段国琪 武宗信关键词:红肉火龙果 总DNA 一种改良 CTAB 法 提取棉花基因组DNA 本发明公开了一种改良 CTAB 法 提取棉花基因组DNA,包括以下步骤:(1)液氮研成粉末,加入CTAB 缓冲液65℃水浴摇动得含有DNA的提取液I;(2)冷却后加入RNase A后进行37℃水浴;(3)加入等体积的溶液A混匀... 丁霄 李朋波 雷梦林 温思钰 杨六六 罗晓莉 秦丽霞 潘转霞 李换丽 吴翠翠 朱永红 夏芝 曹彩荣文献传递 改良 CTAB 法 对山茶属植物基因组DNA提取的比较研究被引量:12 2017年 山茶属植物体内酚类、多糖等次生代谢物质含量较高,获得高纯度的总DNA比较困难。为筛选出适宜山茶属植物基因组DNA的较优提取方法 ,并研究不同材料处理方法 的差异,采用四因素三水平的正交设计,对山茶属植物基因组DNA的提取方法 CTAB 法 进行优化。最后确定较优提取方法 为:老叶用CTAB -free去除多糖并防止酚氧化,用2%CTAB 、2%PVP、24∶1抽提2次;嫩叶用2×CTAB 去除多糖并防止酚氧化,用1%CTAB 、2%PVP、24∶1抽提1次,并用ISSR-PCR检测。结果显示采用优化方案提取的DNA质量更好,能较好地溶于TE,可用于ISSR-PCR扩增,且扩增出清晰的条带。 张金丽 张罗霞 杨坤梅 李宗艳关键词:山茶 基因组DNA提取 改良CTAB法 正交设计 改良 CTAB 法 提取重楼属3种药用植物干燥根茎DNA被引量:13 2017年 目的:本研究采用改良 CTAB 法 提取重楼属3种植物的DNA,分析了CTAB 浓度对其DNA得率以及醋酸钾(KAc)或KAc+20%乙醇对其DNA纯度的影响,为重楼属植物药材的分子标记鉴定研究提供技术和理论依据。方法 :采用基于CTAB 的6种方法 提取重楼属3种植物干燥根茎的DNA,并用紫外分光光度法 测定A260和A280的值计算评价DNA得率和纯度。结果:4%CTAB 提取3种重楼的DNA得率均高于2%CTAB ;添加KAc的方法 2(2%CTAB )、方法 5(4%CTAB )以及添加KAc+20%乙醇的方法 3(2%CTAB )和方法 6(4%CTAB )提取的DNA纯度和质量以及通用引物ITS2F/ITS2R的PCR扩增结果均优于不添加KAc或KAc+20%乙醇的方法 1和方法 4。结论:本研究表明4%CTAB 有利于重楼属3种植物干燥根茎DNA得率的提高,在DNA沉淀之前添加KAc或KAc+20%乙醇有利于改善DNA纯度和质量。 符德欢 朱高倩 郭佳玉 王丽 周培军 蒲星宇 李学芳关键词:滇重楼 七叶一枝花 CTAB DNA 改良 CTAB 法 用于苹果果实基因组DNA的提取被引量:19 2017年 针对苹果果实多糖、多酚含量高的特性,以成熟期‘澳洲青苹’果实为材料,嫩叶作为对照,采用三种改良 CTAB 法 提取苹果果实基因组DNA。实验表明,方法 三提取的DNA效果最佳。该方法 综合了多步除杂步骤,即在细胞裂解前加入干扰物清除液,提高β-巯基乙醇、PVP的浓度抑制多酚氧化,沉淀DNA时加入1/10体积3 mol/L Na AC,有效去除了果实中多糖和多酚等物质。紫外分光光度计检测和琼脂糖凝胶电泳表明,提取的DNA纯度较高、完整性好。以所提取的DNA为模板,用ISSR引物进行PCR扩增,条带清晰。Eco RⅠ酶切检测表明,所提的DNA能被完全酶切。因此,确定方法 三是适合苹果果实基因组DNA提取的最佳方法 ,该方法 为DNA提取过程中多糖、多酚的去除提供了参考。 闫玖英 马长青 常博 范献光 李征 杨亚州 赵政阳关键词:苹果 DNA提取 多糖 多酚
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谭晓风 作品数:488 被引量:3,668 H指数:35 供职机构:中南林业科技大学 研究主题:油茶 油桐 自交不亲和性 S基因型 自交不亲和 丁勇 作品数:80 被引量:223 H指数:10 供职机构:西南林业大学 研究主题:越桔 基因克隆 铁皮石斛 甘蓝型油菜 RNA提取 丁梦璇 作品数:5 被引量:18 H指数:3 供职机构:中国食品发酵工业研究院 研究主题:DNA提取 改良CTAB法 果肉 总DNA提取 水果 王永康 作品数:62 被引量:564 H指数:15 供职机构:山西省农业科学院 研究主题:种质资源 枣树 胚败育 发育时期 改良CTAB法 何德 作品数:38 被引量:164 H指数:6 供职机构:西南林业大学 研究主题:华山松 遗传多样性分析 香菇 氮源 改良CTAB法