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改良CTAB提取不同作物总RNA技术研究被引量:1
2024年
为提高操作效率,本研究开发出一种简洁有效的作物总RNA提取方。研究以油菜、棉花、花生、小麦、马铃薯、玉米、大豆、西葫芦等作物的不同组织为试材,通过CTAB改良CTAB及TanSzol Reagent试剂盒提取总RNA,检测结果发现,经过改良后的CTAB提取的总RNA质量较高。在油菜花瓣、小麦、花生、西葫芦叶片中,该方获得了较高的总RNA得率,分别为24.5、23.7、26.4、17.35μg/mL;OD260/280和OD260/230值分别为1.90、1.73、1.72、1.80和2.10、1.50、2.01、1.70。综合比较以上3种方,改良后的CTAB适用于油菜、小麦、花生、西葫芦等作物的总RNA提取,为后续分子生物学检测奠定了基础。
刘国梅郭淑慧孙璇姚琳张高扬杜春芳
关键词:改良CTAB法总RNARNA提取
一种利用改良CTAB提取铁皮石斛茎基因组DNA的方
本发明涉及CTAB提取植物基因组DNA技术领域,具体是指一种利用改良CTAB提取铁皮石斛茎基因组DNA的方,具体包括以下步骤:(1)材料研磨:取200mg铁皮石斛茎置于提前预冷的研钵中研磨成粉末,将研磨后的粉末转移...
吴欣仪陈建兵陈利君王蒙郑芳
一种改良CTAB抽提多糖多酚类植物RNA的方
本发明涉及植物RNA提取技术领域,具体涉及一种改良CTAB抽提多糖多酚类植物RNA的方。该方包括以下步骤:将植物组织样品研磨至粉末状,加入改良后的提取液水浴裂解提取,离心收集上清,加入等体积氯仿混匀后静置,离心收集...
李小康罗骏王飞王洋汪德鹏
4种改良CTAB提取石榴成熟叶片DNA的比较研究被引量:10
2021年
为研究从成熟石榴叶片中提取高质量基因组DNA的方,根据成熟石榴叶片组织中富含多酚、多糖的特点,以峄城中国石榴种质资源圃20种石榴成熟叶片为材料,分别采用改良CTAB(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)4种方提取成熟石榴基因组DNA,通过琼脂糖凝胶、紫外分光光度计分析、ISSR扩增等方检测所提取DNA的质量。结果表明,改良CTAB能从各个石榴品种的成熟叶片中提取出基因组DNA,琼脂糖电泳胶孔干净,无拖带,且DNA的纯度和完整性都较好,OD260 nm/OD280 nm的比值均为1.8~2.0,无降解现象,其质量、产量都高于其他改良CTAB。ISSR-PCR扩增结果表明,此方提取的基因组总DNA完全适于ISSR分析。其主要的步骤是:在石榴叶片的研磨中添加Vc、PVP等抗氧化物质,加入CTAB提取液后65℃水浴30 min后冷却至室温,离心条件为15℃、10 000 r/min、10 min, DNA粗提液用氯仿抽提3次,可获得高质量DNA。
谭小艳马耀华郝兆祥
关键词:石榴改良CTAB法基因组DNA
一种利用改良CTAB提取兜兰基因组DNA的方
一种利用改良CTAB提取兜兰基因组DNA的方,包括以下步骤:(1)兜兰叶片的采集与筛选,(2)超低温粉碎,(3)超声波辅助温育,(4)共振声混合乳浊,(5)DNA的沉淀制备,(6)DNA的精制与储藏。本发明的提取兜兰...
丁勇常玮邵亚林
文献传递
改良CTAB提取红肉火龙果果实不同组织总DNA及质量检测被引量:5
2019年
为探求红肉火龙果果实不同组织DNA含量情况,本研究以成熟期红肉火龙果果实为材料,采用改良CTAB对火龙果果肉、果皮、种子进行总DNA提取。结果表明:红肉火龙果果肉、果皮、种子的OD260/OD280光吸收值分别为1.9827,1.9844,1.9975,均在1.8≤OD260/OD280<2.0,说明DNA纯度均很好。同一红肉火龙果果实不同组织中DNA浓度各不相同,其中种子中的DNA浓度为0.135μg·mL^-1,含量最高,其次果皮中的DNA浓度0.078μg·mL^-1,果肉中DNA浓度最低,为0.036μg·mL^-1。
杨运良李建勋丁宵郭创业董少鹏段国琪武宗信
关键词:红肉火龙果总DNA
一种改良CTAB提取棉花基因组DNA
本发明公开了一种改良CTAB提取棉花基因组DNA,包括以下步骤:(1)液氮研成粉末,加入CTAB 缓冲液65℃水浴摇动得含有DNA的提取液I;(2)冷却后加入RNase A后进行37℃水浴;(3)加入等体积的溶液A混匀...
丁霄李朋波雷梦林温思钰杨六六罗晓莉秦丽霞潘转霞李换丽吴翠翠朱永红夏芝曹彩荣
文献传递
改良CTAB对山茶属植物基因组DNA提取的比较研究被引量:12
2017年
山茶属植物体内酚类、多糖等次生代谢物质含量较高,获得高纯度的总DNA比较困难。为筛选出适宜山茶属植物基因组DNA的较优提取方,并研究不同材料处理方的差异,采用四因素三水平的正交设计,对山茶属植物基因组DNA的提取方 CTAB进行优化。最后确定较优提取方为:老叶用CTAB-free去除多糖并防止酚氧化,用2%CTAB、2%PVP、24∶1抽提2次;嫩叶用2×CTAB去除多糖并防止酚氧化,用1%CTAB、2%PVP、24∶1抽提1次,并用ISSR-PCR检测。结果显示采用优化方案提取的DNA质量更好,能较好地溶于TE,可用于ISSR-PCR扩增,且扩增出清晰的条带。
张金丽张罗霞杨坤梅李宗艳
关键词:山茶基因组DNA提取改良CTAB法正交设计
改良CTAB提取重楼属3种药用植物干燥根茎DNA被引量:13
2017年
目的:本研究采用改良CTAB提取重楼属3种植物的DNA,分析了CTAB浓度对其DNA得率以及醋酸钾(KAc)或KAc+20%乙醇对其DNA纯度的影响,为重楼属植物药材的分子标记鉴定研究提供技术和理论依据。方:采用基于CTAB的6种方提取重楼属3种植物干燥根茎的DNA,并用紫外分光光度测定A260和A280的值计算评价DNA得率和纯度。结果:4%CTAB提取3种重楼的DNA得率均高于2%CTAB;添加KAc的方 2(2%CTAB)、方 5(4%CTAB)以及添加KAc+20%乙醇的方 3(2%CTAB)和方 6(4%CTAB)提取的DNA纯度和质量以及通用引物ITS2F/ITS2R的PCR扩增结果均优于不添加KAc或KAc+20%乙醇的方 1和方 4。结论:本研究表明4%CTAB有利于重楼属3种植物干燥根茎DNA得率的提高,在DNA沉淀之前添加KAc或KAc+20%乙醇有利于改善DNA纯度和质量。
符德欢朱高倩郭佳玉王丽周培军蒲星宇李学芳
关键词:滇重楼七叶一枝花CTABDNA
改良CTAB用于苹果果实基因组DNA的提取被引量:19
2017年
针对苹果果实多糖、多酚含量高的特性,以成熟期‘澳洲青苹’果实为材料,嫩叶作为对照,采用三种改良CTAB提取苹果果实基因组DNA。实验表明,方三提取的DNA效果最佳。该方综合了多步除杂步骤,即在细胞裂解前加入干扰物清除液,提高β-巯基乙醇、PVP的浓度抑制多酚氧化,沉淀DNA时加入1/10体积3 mol/L Na AC,有效去除了果实中多糖和多酚等物质。紫外分光光度计检测和琼脂糖凝胶电泳表明,提取的DNA纯度较高、完整性好。以所提取的DNA为模板,用ISSR引物进行PCR扩增,条带清晰。Eco RⅠ酶切检测表明,所提的DNA能被完全酶切。因此,确定方三是适合苹果果实基因组DNA提取的最佳方,该方为DNA提取过程中多糖、多酚的去除提供了参考。
闫玖英马长青常博范献光李征杨亚州赵政阳
关键词:苹果DNA提取多糖多酚

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谭晓风
作品数:488被引量:3,668H指数:35
供职机构:中南林业科技大学
研究主题:油茶 油桐 自交不亲和性 S基因型 自交不亲和
丁勇
作品数:80被引量:223H指数:10
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研究主题:越桔 基因克隆 铁皮石斛 甘蓝型油菜 RNA提取
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研究主题:种质资源 枣树 胚败育 发育时期 改良CTAB法
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研究主题:华山松 遗传多样性分析 香菇 氮源 改良CTAB法