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搜索到4485篇“ 杀伤作用“的相关文章

DNMT1基因沉默增强NK-92对Jurkat细胞杀伤作用及其机制: 2024年; 为了探讨沉默DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)增强NK-92对Jurkat细胞杀伤作用及机制,检测2020年1月-2021年12月35例急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)患者骨髓标本的DNMT1水平。si-DNMT1被转染至NK-92细胞,并与Jurkat细胞共培养,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法检测对Jurkat细胞的杀伤作用,流式细胞术检测Jurkat细胞凋亡及NKG2D膜表达。ELISA检测细胞因子IFN-γ水平,Western blotting测定NK-92细胞Syk、ZAP70、p-Syk、p-ZAP70、穿孔素、颗粒酶B表达。结果显示,ALL患者DNMT1水平明显高于对照组(P<0.05);DNMT1对ALL具有诊断价值(AUC:0.692,95%CI:0.533-0.851,P=0.033)。高DNMT1组患者PFS明显低于低DNMT1组患者(P<0.05)。转染si-DNMT1后,NK-92细胞对Jurkat细胞杀伤率、Jurkat细胞凋亡率明显高于si-NC组(P<0.05),分泌NKG2D,及表达穿孔素、颗粒酶B能力明显升高(P<0.05)。si-DNMT1组NK-92细胞生成IFN-γ水平明显高于si-NC组(P<0.05),其p-Syk、p-ZAP70明显高于si-NC组(P<0.05)。综上,DNMT1在ALL中高表达,沉默DNMT1可增强NK-92细胞对Jurkat细胞杀伤作用,其机制可能与增强NK-92细胞记忆功能、激活Syk/ZAP70通路相关。; 武坤武坤程沈菊马晓波贺振新杨金荣; 关键词：DNA甲基转移酶1 NK-92细胞 JURKAT细胞

靶向EGFRvⅢ的CAR-NK细胞对胶质瘤细胞杀伤作用的体外实验研究: 2024年; 目的探索靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体(CAR)修饰的人外周血来源自然杀伤(NK)细胞在脑胶质瘤细胞中的杀伤作用。方法通过Ficoll密度梯度离心法获得人外周血来源的NK细胞并进行体外扩增培养,并通过慢病毒感染构建靶向EGFRvⅢ的CAR-NK细胞及U87-EGFRvⅢ稳转细胞株。根据不同效应细胞作用于不同靶细胞而将实验组分为NK+U87组、NK+U87-EGFRvⅢ组、CAR-NK+U87组、CAR-NK+U87-EGFRvⅢ组,通过实时无标记细胞分析(RTCA)及乳酸脱氢酶(LDH)释放实验评价CAR-NK细胞对胶质瘤细胞的杀伤作用,同时使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B(GzmB)以及穿孔蛋白1(PRF1)在细胞培养上清中的分泌情况。结果流式细胞分析显示分离、培养得到的人外周血来源NK细胞的纯度为97.6%,存活率为98.2%;成功构建第二代靶向EGFRvⅢ的CAR分子,并成功构建靶向EGFRvⅢ的CAR-NK细胞,流式分析显示阳性细胞率为69.6%。RTCA结果显示靶细胞的生长曲线随时间呈上升趋势,过表达EGFRvⅢ的U87细胞增殖速率要高于U87细胞;在加入效应细胞后,细胞指数呈现下降趋势,在相同效靶比(E∶T)下,CAR-NK+U87-EGFRvⅢ组的细胞指数下降趋势快于NK+U87-EGFRvⅢ组,且快于CAR-NK+U87组。LDH释放实验进一步证明随着效靶比的增加,靶细胞的裂解率逐渐升高(F_(NK+U87)=700.61、F_(CAR-NK+U87)=2063.97、F_(NK+U87)-EGFRvⅢ=5707.00、F_(CAR-NK+U87)-EGFRvⅢ=28858.57,均P<0.05);在E∶T=2∶1及E∶T=3∶1时,NK+U87-EGFRvⅢ组、CAR-NK+U87组的细胞裂解率均低于CAR-NK+U87-EGFRvⅢ组(均P<0.05)。ELISA结果显示,TNF-α、IFN-γ、GzmB及PRF1的分泌量在相同组别内均随着效靶比的增加而增加(均P<0.05);在相同效靶比下,除了在E∶T=1∶1时,CAR-NK+U87-EGFRvⅢ组较CAR-NK+U87组GzmB分泌量的差异无统计学意义(P>0.05);CAR-NK+U87-EGFRvⅢ组分别与NK+U87-EGFRvⅢ组、CAR-NK+U8; 陈举林依日扎提·艾力秦虎吉文玉吉文玉汪永新; 关键词：神经胶质瘤

嵌合抗原受体T细胞的肿瘤杀伤作用: 2024年; 近年来,嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞免疫疗法在血液恶性肿瘤的治疗中取得了重要进展,但在实体瘤方面的应用并不理想。本文对CAR-T细胞的结构、杀伤功能进行了介绍,包括非经典免疫突触的形成、分泌细胞因子、分泌穿孔素和颗粒酶、Fas-FasL(factor associated suicide-Fas ligand)途径以及组成CAR结构成分的改变等杀伤肿瘤的主要机制,比较三种CAR细胞的特点,结合CAR-T细胞治疗实体瘤的挑战,对CAR-T细胞在肿瘤免疫治疗领域未来的研究方向进行了分析。; 黄凯锋王月丹李海潮; 关键词：肿瘤免疫治疗杀伤功能

CAR-T细胞来源囊泡对肿瘤细胞的杀伤作用: 研究背景:嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞免疫疗法具有精准识别和杀伤靶细胞的能力,已被批准用于治疗多种血液系统恶性肿瘤。然而,以自体T细胞为来源制备CAR-T细胞的技术路线,过程复杂且耗时漫长;此外,患者选择CAR-T细...; 蒙若彤; 关键词：同种异体

沉默PrxⅡ基因促进巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用: 2024年; 为探究PrxⅡ对RAW264.7(小鼠单核巨噬细胞系)细胞杀伤HepG2(人肝癌细胞系)细胞的影响,阐明PrxⅡ基因调控RAW264.7细胞分泌细胞因子杀伤HepG2细胞的作用,利用慢病毒干扰技术制备PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞系、MTT assay测定HepG2细胞存活情况、ELISA法测定RAW264.7细胞分泌炎性因子情况、蛋白质免疫印迹法检测NF-κB信号通路相关蛋白质表达水平。结果表明:已成功制备PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞系;MTT检测发现RAW264.7细胞上清液处理HepG2细胞后,shPrxⅡ组HepG2细胞存活率明显低于mock组,且呈时间依赖性;ELISA结果表明shPrxⅡ组RAW264.7细胞分泌的TNF-α含量明显高于mock组,IL-6和IL-1β含量明显低于mock组;蛋白质免疫印迹结果与mock组相比,PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞中NF-κB信号通路明显被激活。由此得出结论,PrxⅡ基因能调控RAW264.7细胞分泌细胞因子,杀伤HepG2细胞,导致HepG2细胞死亡水平上升,研究结果可为以巨噬细胞为靶点的免疫疗法提供理论基础,为肝癌患者的免疫治疗提供新思路。; 冯琳孙率洋姜鹏吕树旗韩英浩; 关键词：HEPG2细胞系 NF-ΚB

靶向EGFRvⅢ的CAR-NK细胞对胶质瘤细胞杀伤作用的体外实验研究: 陈举林

银杏外种皮提取物干预肿瘤抗原致敏淋巴细胞对Heps的杀伤作用: 2024年; 目的:研究在银杏外种皮提取物(GBEE)干预下,肿瘤抗原致敏淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:用正常小鼠的脾脏制备脾淋巴细胞悬液(Lc);用反复冻融法处理肝癌Heps细胞,取其离心上清液制成肿瘤抗原(Ag);以脾淋巴细胞与肿瘤抗原体积比=2∶1配成的肿瘤抗原致敏淋巴细胞溶液(AgLc)和浓度为480μg/mL的GBEE充分混合置于6孔板中,培养箱中培养后,将其加入接种了Heps细胞的孔板中再培养。此为GBEE+AgLc+Heps细胞组,同时设置Heps组、Lc+Heps组、AgLc+Heps组、GBEE+Heps组、GBEE+Lc+Heps组等组别,用MTT法测定各组淋巴细胞对Heps肝癌细胞的体外杀伤活性。结果:肝癌Heps肿瘤抗原致敏的淋巴细胞对Heps细胞的杀伤作用增强,杀伤率为10.63%,与Lc+Heps对照组比较具有统计学差异(P<0.05),GBEE+AgLc+Heps组杀伤肿瘤细胞作用最为明显,杀伤率为50.59%,显著高于其他组(P<0.05)。结论:GBEE能促进肿瘤抗原致敏淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。; 周鹭许爱华张立虎; 关键词：脾淋巴细胞肝癌细胞抗原

儿茶素通过促进胃癌细胞铁死亡增强化疗药物5-FU的杀伤作用: 2024年; 目的:探讨儿茶素对胃癌化疗效果的影响及机制。方法:使用5-FU(100μg/mL)处理胃癌细胞AGS和GC7901,分别处理0 h、3 h、6 h、9 h、12 h、16 h、24 h,通过PI染色及流式细胞术检测胃癌细胞AGS及GC7901的死亡情况;Western Blot实验检测正常胃黏膜上皮细胞RGM-1、胃癌细胞AGS和GC7901铁死亡相关特征蛋白谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)及重肽铁蛋白(ferritin heavy polypeptide,FTH)的表达,Image J软件测量灰度值;将胃癌细胞分别设置为对照组、5-FU处理组、5-FU联合Catechin处理组和5-FU联合DMSO处理组,分别通过PI染色及流式细胞术检测细胞死亡,通过C11-BODIPY581/591染色及流式细胞术检测脂质过氧化物积累,通过Western Blot实验检测铁死亡相关特征蛋白的表达,通过吸光光度法检测细胞裂解物中游离Fe^(2+)的含量;分离线粒体和细胞质组分,检测各个分组中线粒体内游离Fe^(2+)含量和细胞质内游离Fe^(2+)含量,并通过Mito-Ferro Green染色进一步验证增量Fe^(2+)的细胞内定位;Western Blot方法检测血红素加氧酶1蛋白(heme oxygenase 1,Hmox1)在各分组中的表达并通过Image J软件测量灰度值;将胃癌细胞分别设置为对照组、5-FU处理组、5-FU组联合Catechin处理组、5-FU联合Catechin和siRNA-NC处理组、5-FU联合Catechin和siRNA-Hmox1处理组,检测线粒体游离Fe^(2+)含量、脂质过氧化物积累及细胞死亡。结果:胃癌细胞在5-FU处理0~12 h内,随处理时间增长死亡率逐渐升高,然而在处理12~24 h内死亡率变化不明显表现出耐药性;胃癌细胞中铁死亡相关特征蛋白GPX4、SLC7A11和FTH的表达量显著高于正常胃黏膜上皮细胞(P<0.05);与对照组相比,处理24 h后,5-FU联合Catechin处理组细胞死亡数量、脂质过氧化物积累都显著升高(P<0.05),同时铁死亡相关特征蛋白GPX4、SLC7A11、FTH的表达量显著降低(P<0.05);5-FU�; 徐涛井文君刘静; 关键词：儿茶素 5-氟尿嘧啶血红素加氧酶1

靶向人CD70的嵌合抗原受体巨噬细胞制备及其对肾癌的杀伤作用的研究: 2024年; 目的:本研究旨在探讨稳定感染靶向人CD70蛋白的嵌合抗原受体巨噬细胞(chimeric antigen receptor ma-cophages,CAR-M)对人肾癌细胞系(786-O、OS-RC-2和ACHN)的体外杀伤作用,开发靶向人CD70的肾癌细胞的新型细胞疗法。方法:将含人CD70抗体scFv片段的CAR序列插入含有GFP序列的慢病毒质粒中,制备CD70-scFV-CAR-GFP的慢病毒。通过慢病毒感染小鼠巨噬细胞RAW264.7制备CD70-CAR-M,通过流式细胞仪分选出含有绿色荧光标记的CD70-CAR-M细胞并在体外筛选稳定表达细胞株。将CD70-CAR-M细胞与不同类型的肾癌类器官按照1∶1的比例分别共培养后,利用流式细胞术检测CD70-CAR-M对肾癌细胞的杀伤作用。qRT-PCR检测CD70-CAR-M在和肾癌细胞系共培养后TNF-α和TGF-β的表达水平改变情况。结果:通过测序确认了CD70-scFV序列,并成功制备了相应的慢病毒。利用该慢病毒感染巨噬细胞RAW264.7,通过qRT-PCR技术证明CD70-CAR分子稳定表达在RAW264.7。通过和不同类型的肾癌细胞系共培养后,流式细胞术结果显示,与对照组相比,CD70-CAR-M共培养后的肿瘤细胞数量明显减少。同时发现CD70-CAR-M的TNF-α表达水平明显增加,而TGF-β的表达水平明显降低,从而对肿瘤产生较强的杀伤作用。结论:成功构建了靶向人CD70的CAR-M巨噬细胞,并且在体外证明其能对CD70阳性肾癌细胞产生杀伤作用。; 张雅婷杜玉菲汪乐肖漪周一鸣; 关键词：肾癌 CD70

尿路感染细胞实验中庆大霉素对尿路致病大肠杆菌的杀伤作用及细胞毒性研究: 2024年; 目的在尿路感染体外细胞实验中,比较不同浓度庆大霉素(0、10、20、50、100、200μg/mL)对尿路致病大肠杆菌(UPEC)的杀伤作用,对尿路上皮细胞及炎性细胞如巨噬细胞的毒性作用。方法比较不同浓度庆大霉素对不同量UPEC J96菌株(10^(8)、10^(7)、10^(6))的杀伤情况;CCK-8实验检测不同浓度庆大霉素在不同时间内(2 h或24 h)对原代培养的C57BL/6雄鼠肾小管上皮细胞、腹腔巨噬细胞、人膀胱上皮细胞系J82的毒性作用;根据实验选择合适的庆大霉素浓度和作用时间,检测J96对小鼠肾小管上皮细胞的黏附、入侵以及小鼠巨噬细胞对J96的吞噬、清除作用。结果庆大霉素(≥10μg/mL)对J96的杀伤作用均强于1%的青霉素/链霉素双抗(P<0.0001),高浓度庆大霉素(≥100μg/mL)可在30 min内完全杀伤高达10^(8)的J96。50μg/mL庆大霉素作用2 h可对人膀胱上皮细胞系J82产生毒性作用(P<0.05)。结论本文明确了不同细胞体外实验时适宜的庆大霉素处理浓度及时间,人膀胱上皮细胞系J82对庆大霉素更为敏感。; 张婷王家兴陈婉冰韩锦李可; 关键词：尿路感染庆大霉素细胞毒性

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