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玉米褪绿斑驳病毒和李痘病毒胶体金免疫层析试纸条的研制: 玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)在全球广泛分布,并常常与马铃薯Y病毒科的病毒复合侵染引起玉米致死性坏死病(Maize lethal necrosis disease,...; 郭萌萌; 关键词：李痘病毒单克隆抗体 DOT-ELISA 胶体金免疫层析试纸条

分泌抗李痘病毒单抗的杂交瘤细胞株及其单抗应用: 本发明公开了一种分泌抗李痘病毒(Plum pox virus，PPV)单抗杂交瘤细胞株及其单抗的应用。利用原核表达的李痘病毒的外壳蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能分泌抗PPV单抗的杂交瘤...; 吴建祥洪健黄悦吴佳瑜周雪平; 文献传递

检疫性有害生物李痘病毒生物学特性及预防控制技术被引量：1: 2020年; 李痘病毒最早发现于欧洲东部的保加利亚,是一种严重危害核果类果树的病毒,为欧洲和地中海植物保护组织A2类检疫性有害生物,泛非植物检疫理事会和北美植物保护组织检疫性有害生物,我国于2007年将其列入《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》。李痘病毒主要通过寄主植物繁殖材料(种苗、砧木、芽条等)的贸易活动进行远距离传播,或借助带毒媒介蚜虫进行短距离扩散。截至2018年,李痘病毒已在全世界56个国家和地区发生,我国于2004年在湖南发现其危害杏树。本文从李痘病毒的生物学特性、传播扩散途径、诊断检测方法及预防控制技术等方面进行阐述,以期为防止其再次入侵和进一步传播扩散提供参考。; 王浩万方浩于翠武强武强; 关键词：李痘病毒生物学特性媒介昆虫

分泌抗李痘病毒单抗的杂交瘤细胞株及其单抗应用: 本发明公开了一种分泌抗李痘病毒(Plum pox virus，PPV)单抗杂交瘤细胞株及其单抗的应用。利用原核表达的李痘病毒的外壳蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能分泌抗PPV单抗的杂交瘤...; 吴建祥洪健黄悦吴佳瑜周雪平; 文献传递

李痘病毒主要株系杂交探针及基因芯片的制备方法及检测: 本发明公开了一种李痘病毒主要株系杂交探针及基因芯片的制备方法，所述探针包括：PPV‑D；PPV‑M；PPV‑EA；PPV‑Rec；PPV‑W；PPV‑C。一种基因芯片的制备方法，其特征在于包括以下步骤：制备基因芯片点样；...; 陈定虎陈祖华刘恭源王振华周敏熊仁广刘晓媚张静冯雪雅管维吴颖儿; 文献传递

杏树李痘病毒病的快速分子检测和抗PPV连锁标记的筛选被引量：2: 2018年; 为快速检测引进杏资源是否携带李痘病毒(PPV),并从国内资源中筛选抗PPV材料,通过RT-PCR和荧光定量PCR 2种方法的比较验证,确定了RT-PCR为快速、准确、经济高效检测杏PPV病毒病的方法,并明确了PCR扩增体系和反应条件的具体参数。扩增体系为20μL,包括10×Buffer 2μL、25 mmol/L Mg^(2+)1. 6μL、10 mmol/L d NTP0. 4μL、0. 5 U/μL Taq酶0. 2μL、上下游引物各0. 4μL、模板c DNA 1μL、dd H_2O 14μL。RT-PCR反应条件:94℃预变性5 min,然后以94℃变性45 s、55℃退火30 s、72℃延伸45 s,进行35个循环,72℃延伸10 min。利用捷克孟德尔大学园艺学院构建的杏PPV抗性分离F1群体,采用SSR分子标记技术和集团分离分析法(BSA)相结合的策略,首先在抗PPV和易感PPV的对等基因间进行多态性标记的筛选,初步筛选得到6个SSR位点(PGS1. 23、PGS1. 24、Pa CITA5、UDAP-414、Pchcms4和Pchgms4)在两亲本间和2个对等基因池间的多态性是一致的,并进一步在F1分离群体间进行复选和验证,最终筛选到1个与PPV抗性性状连锁程度较高的SSR分子标记PGS1. 23,此标记检测杏资源分离群体PPV抗性的符合度达到了78. 3%。进而利用该标记在37份我国杏种质中进行了PPV抗性评价,结果筛选出了5份抗PPV的杏资源,分别是菜籽黄、杨继元、垂枝山杏、大早熟和媳妇杏,为今后杏的抗PPV育种提供较好的亲本材料,也为进一步挖掘抗PPV基因的深度研究奠定了基础。; 张俊环孙浩元Boris Krska杨丽姜凤超张美玲王玉柱; 关键词：李痘病毒分子检测 BSA

胶体金免疫层析法快速检测李痘病毒的研究: 2017年; 用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体p ET29(a)上,得到p ET29a-PPV重组载体,然后将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导PPV CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达。回收表达蛋白后免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定其效价达到3.2×104,然后采用该抗血清制备出专门检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条,测试结果表明,该试纸条不仅特异性强、稳定性好,灵敏度也高,可以检测到1μg/m L粗提病毒和稀释100倍的病汁液,操作简便,10分钟之内即可出检测结果,特别适宜口岸检疫和田间快速诊断。; 陈定虎朱祺钢苏斐陈萍陈文聪郑传发吴颖儿魏梅生; 关键词：李痘病毒免疫层析

利用基因芯片技术检测李痘病毒主要株系的研究被引量：2: 2017年; 针对我国检疫性植物病毒即李痘病毒主要6个株系设计了6个特异性探针,同时设计了扩增该6个株系的一对通用引物,并确定了靶基因的PCR扩增体系和芯片杂交体系。对6个探针核酸序列进行同源性比对,结果表明探针之间的同源性只有39-61%,而各探针与本株系的同源性达到95%以上,因此适合作为检测李痘病毒主要株系的探针。成功设计的李痘病毒各主要株系的通用引物能够一次性扩增6个株系中的任何一个株系,而不需要做多重PCR,标记的扩增片段即可同芯片进行杂交,不但可以检测出李痘病毒,而且还能够明确是该病毒的哪个株系,检测结果直观明了,易于判定。芯片特异性好,能够正确区分6个株系,而且与其他植物病毒没有交叉反应。芯片的灵敏度高,可达到5pg/μL DNA模板浓度。; 陈定虎何春梅苏斐冯黎霞熊仁广郑传发陈文聪刘运方腾奎; 关键词：基因芯片李痘病毒

李痘病毒在中国的入侵风险评估被引量：6: 2016年; 为评价李痘病毒入侵中国的危险程度及可能造成的影响,采用Maxent生态位模型,根据现有分布点及目标地区的环境变量运算出预测模型,再结合地理信息系统Arc GIS绘制李痘病毒在中国的适生等级预测图,将适生等级分成高适生区、中适生区、低适生区和非适生区;并以多指标综合评价体系为标准,从传入的可能性、定殖的可能性、扩散的可能性、受害寄主的经济重要性和病毒危险性的管理难度等5个准则层、共18个指标层因子,对该病毒在中国的入侵风险进行了定性和定量的分析。结果表明,李痘病毒在中国的适生区主要集中在华东和华南地区,经纬分布于101.93°-122.75°E,19.60°-40.76°N之间,占中国行政区划面积的25%-50%,适生范围较广。李痘病毒在中国的入侵风险指标值R值为2.49,属于高风险的有害生物,鉴于该病毒在中国暂无分布记录,建议在进境检疫中对其实施严格检疫,必须通过2种以上检测手段（必须包括血清学和分子生物学）进行排查及2年以上的隔离试种,以防止该病毒进入中国进一步蔓延传播。; 林司曦丁晓磊叶建仁赵琪; 关键词：李痘病毒

检疫性有害生物李痘病毒调查及防控方法: 2016年; 李痘病毒是危害核果类果树的重要病原物。在我国,李痘病毒作为检疫性植物,目前已有发生,为了防止其进一步扩散传播。本文从寄主范围、病原、侵染循环方面阐述了李痘病毒的研究进展,并归纳总结了该病的调查、样品采集、检测、防控方法。; 黄霞; 关键词：李痘病毒

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