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牛POLB基因核心启动子鉴定及转录调控分析: 2025年; 旨在筛选牛DNA聚合酶β(DNA polymeraseβ,POLB)基因核心启动子并对调控该基因表达的转录因子进行预测和鉴定。以牛POLB基因CDS区上游1751 bp序列为模板,构建5个包含不同截短长度的启动子报告基因载体,利用双荧光素酶报告基因系统鉴定核心启动子,利用AnimalTFDB 3.0预测核心启动子结合转录因子,过表达转录因子后分析其对牛POLB基因的转录调控功能。结果:在牛肌肉原代细胞中,构建的5个截短的启动子报告基因载体均具有转录起始活性,pGL3-151(-151~-1 bp)和pGL3-1351(-1351~-1 bp)的相对荧光素酶活性显著高于pGL3-551(-551~-1 bp)(P<0.001,P<0.0001),表明-151~-1 bp和-1351~-551 bp为牛POLB基因核心启动子区;AnimalTFDB 3.0预测核心启动子区存在转录因子特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)的结合位点;在牛肌肉原代细胞中过表达转录因子SP1,能够显著降低POLB基因的转录活性。本试验结果为进一步研究该基因表达调控机制提供参考。; 吕世杰张格阳王香南冯亚杰乔智慧祁兴山张子敬施巧婷王二耀; 关键词：核心启动子转录因子 SP1

猪CYP 3A29基因核心启动子鉴定及转录调控分析: 2025年; 旨在鉴定猪CYP 3A29基因核心启动子及相应的转录调控因子,分析转录因子对CYP 3A29启动子活性的调控。本研究以3头健康的大白母猪(30 kg)为试验材料,利用PCR和Western blot检测CYP 3A29基因在猪各组织(心、肝、脾、肺、肾、小肠、肌肉)中的表达分布;构建不同片段长度的CYP 3A29基因启动子双荧光素酶报告载体,转染293T和AML12细胞系,检测荧光素酶活性,确定CYP 3A29基因的核心启动子区域;利用Animal TFDB网站分析CYP 3A29核心启动子区域可能存在的转录调控因子,针对核心启动子区域构建分段缺失双荧光素酶报告载体,检测荧光素酶活性大小,确定转录因子结合位点;构建转录因子结合突变位点的双荧光素酶报告载体和转录因子shRNA载体,探讨转录因子对CYP 3A29核心启动子的调控作用。结果显示,CYP 3A29基因在猪肝脏中表达量最高;CYP 3A29启动子4个不同检测区域(-2026~+62 bp、-1526~+62 bp、-1026~+62 bp和-528~+62 bp)中-528~+62 bp活性最高,为CYP 3A29核心启动子区;CYP 3A29启动子-528~-448 bp区域负向调控核心启动子活性,且含有潜在的转录因子RUNX 1结合位点;突变RUNX 1结合位点可显著降低-528~+62 bp启动子的荧光素酶活性,而干扰RUNX 1基因则显著升高-528~+62 bp野生型启动子的荧光素酶活性,但对-528~+62 bp突变型启动子的荧光素酶活性无显著影响,提示RUNX 1转录因子可负向调控CYP 3A29基因核心启动子活性。本研究结果为进一步解析猪CYP 3A29基因的转录调控机制奠定了基础。; 王红赵为民赵为民程金花李惠侠; 关键词：核心启动子转录调控

FTO基因核心启动子区鉴定及对关岭牛前脂肪细胞分化的影响: 前脂肪细胞的增殖和分化是脂肪形成和沉积的重要过程,而脂肪和肥胖相关基因（FTO）在脂肪细胞增殖和分化中发挥重要作用,其可通过多种途径介导脂肪的沉积。而肌内脂肪的沉积对牛肉品质的改善有重要意义。关岭牛是贵州地方性优良肉牛品...; 吴刚; 关键词：FTO 脂肪细胞分化核心启动子

硒都黑猪NT5C1A基因核心启动子区鉴定及转录因子预测: 2024年; 本研究旨在探究猪胞质5'核苷酸酶1A基因(Cytosolic 5'-Nucleotidase1A,NT5C1A)启动子区序列的结构特性,确定其核心启动子区并分析其关键转录因子结合位点,为探究其表达调控机制提供理论依据。对NT5C1A互作蛋白进行预测,在线生物信息学分析软件预测猪NT5C1A基因核心启动子区,根据预测结果设计7对启动子缺失片段引物,以硒都黑猪血液基因组DNA为模板,通过PCR扩增和Sanger测序方法获得NT5C1A基因5'端7个启动子缺失片段并克隆至pGL3-Basic载体,以双荧光素酶报告基因检测试验对缺失片段进行荧光素酶活性检测,并通过转录因子在线预测软件预测核心启动子区潜在的转录因子。结果表明,NT5C1A基因核心启动子位于转录起始位点-290~+109bp的位置(ATG作为+1),该区域含有MYOD1、MYOG、MYF5和SP1等肌肉发育相关的转录因子结合位点。本试验为研究NT5C1A基因调控猪肌肉发育的分子机制提供了理论依据。; 任双吴俊静彭先文张志红周佳伟梅书棋乔木杜志强; 关键词：核心启动子区转录因子生物信息学

一种用于检测HBV前C区及核心启动子区突变的引物组、检测方法及其试剂盒: 本发明公开了一种用于检测HBV前C区及核心启动子区突变的引物组、检测方法及其试剂盒。引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～2所示，使用引物组配制PCR扩增体系和测序体系，经过PCR扩增反应和测序反应，再进行测序，获...; 李葆华甘小洪刘菲余治学陈曦

一种检测绵羊IGF2BP2基因核心启动子区与生长性状相关的SNP分子标记的方法及其应用: 本发明公开了一种检测绵羊<I>IGF2BP2</I>基因核心启动子区与生长性状相关的SNP分子标记的方法及其应用。本发明筛选出绵羊<I>IGF2BP2</I>基因的核心启动子区域，并在核心启动子区域内鉴定出与绵羊生长性状...; 孙伟顾亦飞凌晨曹修凯袁泽湖王善禾吕晓阳杨会国蒋永清

一种降低大白果糯株高、提高产量并缩短生育期的方法以及SD1基因核心启动子和应用: 本发明属于植物基因工程技术领域，涉及作物育种技术领域，具体涉及一种降低大白果糯株高、提高产量并缩短生育期的方法以及SD1基因核心启动子和应用。育种方法包括对SD1基因的启动子区域进行基因编辑，经基因编辑获得大白果糯突变株...; 方中明聂圣松谢鹏飞骆骏吴博文

基于TARGETGAN生成具有目标活性的植物核心启动子: 合成生物学通过设计和改造生物元件促使生物系统实现目标功能,而控制基因表达通常是其中的重要一步。在植物领域,合成生物学期望能够控制植株表现出特定性状,从而提高作物产量、品质和确保粮食安全。基因的精确表达受众多因素调控,其中...; 戈圆歆; 关键词：合成生物学基因表达

山羊NPC1基因核心启动子鉴定与转录调控分析: 2024年; NPC1基因编码的C型尼曼匹克蛋白1(NPC1)参与脂筏形成、病原微生物内吞以及内吞体的胞内转运等过程。本试验旨在阐明海南黑山羊NPC1基因的转录调控机制,为研究病原微生物与宿主细胞互作提供理论参考。首先,以山羊NPC1基因1466 bp启动子序列为模板,构建9个启动子5'端连续缺失的双荧光素酶报告载体,筛选NPC1基因核心启动子区;继而对核心启动子区的关键转录因子进行预测分析,构建转录因子结合位点缺失的双荧光素酶报告载体,筛选NPC1基因的关键转录因子结合位点。结果表明:山羊NPC1基因的核心启动子区位于转录起始位点上游-195 bp至-60 bp,并且该区域存在E2F3(-134/-120 bp)、SREBP-1(-107/-96 bp)、SP1(-68/-62 bp)等多个转录因子结合位点。双荧光素酶报告实验结果表明,缺失E2F3、SREBP-1、SP1三个转录因子结合位点均会使山羊NPC1基因启动子的转录活性显著下降(P<0.01),且缺失SREBP-1结合位点后NPC1基因转录活性下降最显著。提示,SREBP-1转录因子对海南黑山羊NPC1基因转录活性具有重要的调控作用。本试验成功鉴定山羊NPC1基因的核心启动子区(-195/-60 bp)及该区域的关键转录因子结合位点SREBP-1,为进一步研究山羊NPC1基因介导病原微生物与宿主互作分子机制提供理论基础。; 李崇瑞陈思翟哲王雪梅吴艳茹刘志勇蒋俊明满初日嘎杜丽王凤阳; 关键词：海南黑山羊转录调控核心启动子 SREBP-1

ki-67核心启动子调控E1A表达的腺病毒的构建和鉴定: 2024年; 目的构建含有ki-67启动子的腺病毒Ad-pki-67-E1A-GFP,实现特异在ki-67阳性的脑胶质瘤细胞中复制。方法利用分子生物学的方法将ki-67启动子序列克隆到pGL3-basic载体中,双荧光素酶报告基因实验检测ki-67启动子活性;将ki-67启动子构建到穿梭质粒,并与辅助质粒共转染293T细胞,重组腺病毒Ad-pki-67-E1A-GFP;Ad-pki-67-E1A-GFP加入到脑胶质瘤细胞中,荧光显微镜观察GFP表达情况,同时实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测细胞中ki-67基因表达、腺病毒复制必需基因E1A表达和病毒拷贝数。结果克隆的ki-67序列在脑胶质瘤细胞中能够启动报告基因表达;酶切和测序证明ki-67启动子构建到穿梭质粒中,并重组得到腺病毒Ad-pki-67-E1A-GFP;Ad-pki-67-E1A-GFP能够感染脑胶质瘤细胞,并且E1A的表达和病毒拷贝数与细胞中ki-67表达呈正相关。结论ki-67启动子改造后的腺病毒在脑胶质瘤细胞中复制,为进一步改造用于基因治疗恶性脑胶质瘤奠定了基础。; 张俊文方胜王佳琳王佩文张文欣金贵善刘福生; 关键词：腺病毒脑胶质瘤

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