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一种快速区分猪{1}病毒1型、2b型和嵌合型猪{1}病毒C1-233株的引物及其应用: 本发明提供了一种快速区分猪{1}病毒1型、2b型和嵌合型猪{1}病毒C1‑233株的引物及其应用，属于生物技术领域。本发明提供的引物能够确保PCR扩增的猪{1}病毒1型毒株基因组不含Ssp I酶切位点，扩增的猪{1}病毒2b型0...; 高崧潘昊纯郇长超

猪{1}病毒1型、2型、3型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR鉴别方法的建立及应用: 2023年; 猪{1}病毒(PCV)包括猪{1}病毒1型(PCV1)、猪{1}病毒2型(PCV2)、猪{1}病毒3型(PCV3)。近些年来,PCV1、PCV2、PCV3基因型之间存在共感染,因此建立一种快捷、特异、敏感的PCV1、PCV2、PCV3的SYBR GreenΙ实时荧光定量PCR鉴别检测方法显得尤为必要。本试验通过特异性引物筛选,各项反应条件优化,建立了实时荧光定量PCR鉴别方法。结果表明:PCV1、PCV2、PCV3检测下限分别为40.3、25.2、22.4 copies/μL。与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应。批内及批间变异系数均小于1%。对98份PCV疑似阳性病料检测结果表明,PCV1、PCV2、PCV3感染率分别为10.2%、65.3%、53.1%,共感染率为7.1%。该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为PCV1、PCV2、PCV3的早期检测、定量检测及后期研究提供了技术手段。; 田瑶时建立彭喆李琛徐绍建吴晓燕李佳昕杨莹王硕刘畅刘畅韩红韩先杰; 关键词：猪圆环病毒特异性敏感性

1例猪{1}病毒1型和巴氏杆菌混合感染的诊治: 2023年; 江苏淮安某猪场出现疫情,通过临床检查、PCR{1}鉴定及实验室细菌检测,确诊为猪圆环{1}1型和多杀性巴氏杆菌混合感染。借助药敏试验,筛选出青霉素、氯霉素、氟苯尼考等敏感药物,经过采取有针对性的综合防治措施,有效控制了疫情。; 侯庆同; 关键词：多杀性巴氏杆菌 PCR 药敏试验

疫苗原辅料中猪{1}病毒1型、2型和猪细小病毒PCR检测方法的建立及验证: 2022年; 目的建立疫苗原辅料中猪{1}病毒1型(porcine circovirus type 1,PCV1)、2型(porcine circovirus type 2,PCV2)和猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法并进行验证。方法根据NCBI公布的PCV1、PCV2和PPV基因序列设计了3对特异性引物,通过优化反应条件,建立起检测疫苗原辅料中PCV1、PCV2和PPV的PCR检测方法,并对方法的重复性、中间精密度、专属性、耐用性和检测限进行了验证。结果PCR反应的退火温度为55℃,特异性引物浓度为10μmol/L。该方法重复性、中间精密度、专属性和耐用性均良好,对PCV1、PCV2、PPV的最低检测限分别为1 pg/μL、100 fg/μL和10 fg/μL。结论PCR检测方法可以有效检测出疫苗原辅料中外源病毒污染情况,能为生产合格的疫苗提供质量保证。; 施金荣程小玲申瑷琳张雪婷程尧何婧雯段凯; 关键词：猪圆环病毒1型细小病毒外源病毒

一种快速区分猪{1}病毒1型、2b型和嵌合型猪{1}病毒C1-233株的引物及其应用: 本发明提供了一种快速区分猪{1}病毒1型、2b型和嵌合型猪{1}病毒C1‑233株的引物及其应用，属于生物技术领域。本发明提供的引物能够确保PCR扩增的猪{1}病毒1型毒株基因组不含Ssp I酶切位点，扩增的猪{1}病毒2b型0...; 高崧潘昊纯郇长超; 文献传递

猪{1}病毒1型LAMP检测方法的建立及初步应用被引量：6: 2021年; 为建立猪{1}病毒1型(PCV1)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,为现场诊断提供技术支持,本试验根据GenBank公布的PCV1全基因组序列,在其保守区设计了4条特异性LAMP引物,并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测,首次建立了PCV1的LAMP检测方法。结果表明,62℃水浴60min为最佳反应条件;LAMP的检出限为1×10^(1)copies/μL,普通PCR最低检测限为1×10^(3)copies/μL;对猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪{1}病毒2型(PCV2)、猪{1}病毒3型(PCV3)进行扩增,结果显示为阴性;应用该方法对103个临床疑似病料进行检测,阳性率为34.0%(35例),普通PCR阳性率为29.1%(30例),两种检测方法符合率为89.5%。本试验为PCV1临床检测提供了一种特异、快速、成本低廉的方法。; 田瑶李佳昕杨莹王硕时建立彭喆李琛徐绍建吴晓燕刘畅刘畅韩红; 关键词：猪圆环病毒1型环介导等温扩增技术特异性敏感性

5株湖南猪{1}病毒1型全基因组测序与遗传进化分析被引量：2: 2021年; 为了解湖南猪群猪圆环病毒1型(PCV1)的遗传变异情况,以PCV1阳性DNA为模板,使用PCR方法分两段扩增PCV1全基因序列并进行拼接。结果共获得5个PCV1全基因组,其中3株全基因大小为1759 bp,另外2株分别为1758 bp和1760 bp。5株全基因组同源性为98.4%~99.7%,与国内外的PCV1全基因组同源性为98.1%~99.7%;ORF2序列同源性为97.6%~99.6%,与国内外的PCV1 ORF2同源性为96.1%~99.9%。系统发育树显示,5株PCV1均属于同一分支,并显示出一定的地理差异,但差异较小。结果表明,湖南省流行的PCV1毒株基因较为稳定,分离株间差异较小。本研究为湖南省猪圆环病毒病防控及相关研究奠定了基础。; 何世成王紫微王成胡巧云唐小明王卫国谢怡灵王昌建; 关键词：猪圆环病毒1型遗传进化分析

猪{1}病毒1型和2型核酸定性标准样品的研制被引量：1: 2021年; 为了研制猪{1}病毒1型(PCV1)、猪{1}病毒2型(PCV2)核酸定性标准样品,分别将PCV1和PCV2病毒全序列克隆至pMD18-T载体中并进行稀释分装。制备后进行均匀性评估、稳定性评估、定值和临床试用。结果:制备的标准样品的参考值分别为:1.33×10^(4) copies/μL(PCV1)和1.11×10^(4) copies/μL(PCV2);样品均匀;-20℃可稳定保存24个月以上,4℃可稳定2个月以上。经国家标准化管理委员会组织的专家评审,达到了国家标准样品的要求,可作为核酸扩增检测的猪{1}病毒核酸标准样品。; 董浩原霖毕一鸣刘洋刘颖映刘玉良陈亚娜顾小雪王传彬; 关键词：猪圆环病毒核酸扩增

猪{1}病毒1型病毒核酸参考品及其制备方法与应用: 本发明涉及一种猪{1}病毒1型病毒核酸参考品及其制备方法与应用，所述猪{1}病毒1型病毒核酸参考品从含有猪{1}病毒1型病毒的Rotarix疫苗中，利用Vero细胞传代分离培养，大量扩增，纯化后灭活、分装得到。本发明的有益效果...; 于晴川国泰刘艳杜加亮刘悦越赵荣荣韩娟韩菲张永; 文献传递

猪{1}病毒1型与2型双重PCR检测方法的建立及应用被引量：7: 2019年; 【目的】建立一种可同时检测猪{1}病毒1型(PCV1)和2型(PCV2)的双重PCR检测方法并进行临床应用。【方法】对PCV1和PCV2的单项PCR方法分别进行条件优化后对两种病毒的双重PCR进行条件优化并进行特异性与敏感性试验,然后用单项PCR方法和双重PCR对临床样品进行比较检测。【结果】双重PCR检测方法对PCV1和PCV2的检测灵敏度分别为1.7×10~3、4×10~3 copies/μL,该方法对当前常见猪源DNA病毒的检测结果都是阴性。该方法对2013—2017年15个猪场的145份断奶仔猪样品的检测结果显示,PCV1和PCV2的个体阳性率分别为11.7%和77.2%,与单项PCR方法检测结果无显著(P>0.05)差异,且两种方法检出的PCV1或PCV2的阳性猪场完全一致;临床样品中PCV2的猪场阳性率与个体阳性率都极显著(P<0.01)高于PCV1。【结论】建立了一种有较高敏感性与特异性的PCV1和PCV2的双重PCR检测方法,当前猪场中PCV2感染较PCV1感染明显占优势。; 王立娇胡胜云张雪张雪于红欣周双海; 关键词：猪圆环病毒1型猪圆环病毒2型双重PCR

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