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一种用于生物合成增值产品的甲基营养型酵母的无甲醇培养方法: 本文描述了一种生产转基因细胞产物的方法，其中感兴趣的基因可操作地链接到除AOX1以外的可诱导启动子。当宿主细胞在非抑制性碳源上生长以解除对可诱导启动子的抑制时激活转基因细胞产物的产生，且向宿主细胞培养物添加足够量的诱导剂...; 奥列格·秋林孙铭阳

一株嗜甲醇的甲基营养型酵母的筛选与鉴定: 2018年; 从东经119°2′16″、北纬33°32′47″的湖泊岸边土壤中筛选到一株理想的甲基营养型酵母。该菌呈长圆形,直径3μm,长可以达到5μm,经18SrDNA分析鉴定其为赭色掷孢酵母(Sporobolomyces carnicolor);该菌除可利用甲烷外,亦可利用甲醇、乙醇、葡萄糖、甘油、淀粉等,甲醇是其最佳碳源,最佳浓度为2.0%;采用甲醇-甲烷两段法培养,该菌的OD600值可达到2.1。; 缑仲轩叶立生朱芮王露璇陆华建薛冰斌; 关键词：甲醇甲烷单细胞蛋白甲基营养型酵母

用于基因工程改造甲基营养型酵母的表达构建体和方法: 本发明提供了用于基因工程改造甲基营养型酵母的方法和材料。; S·尚卡尔M·A·霍伊特; 文献传递

甲基营养型酵母中蛋白质糖基化修饰: 本发明涉及用于生产具有哺乳动物样糖基化的糖蛋白的方法和基因工程化甲基营养型酵母菌株。本发明还涉及用于产生能生产具有哺乳动物样糖基化的糖蛋白的甲基营养型酵母菌株的载体。本发明还提供由所述基因工程化甲基营养型酵母菌株生产的糖...; 罗兰德·孔特雷拉斯尼科·L·M·卡勒瓦特沃特·韦尔夫肯弗拉迪米尔·凯戈罗多夫; 文献传递

汉坦病毒76-118株G2基因的克隆及其在甲基营养型酵母中的表达被引量：2: 2003年; 目的　获得汉坦病毒囊膜蛋白G2体外表达产物。方法　应用RT -PCR方法扩增汉坦病毒 76 -118株M片段编码的G2蛋白基因 ,并将扩增产物分别插入pPIC9K和pHIL -S1载体 ,命名为pPIC9K -G2和pHIL -S1-G2 ,分别与酵母的α因子信号肽和PH0 1信号肽 3’端融合 ,处于醇氧化物酶 (AOX1)启动子下游。这 2个载体经线性化后分别转化甲基营养型酵母菌株GS115和SMD116 8,筛选后分别得到His+ Muts 转化子和His+ Mut+ 转化子 ,诱导表达后 ,用Dot ELISA检测。结果　Dot-ELISA检测为阳性。结论　成功地表达了汉坦病毒G2囊膜蛋白 ,为进一步研究其结构功能以及生物学特性奠定了良好基础。; 姚智慧祝晓春董关木贺争鸣俞永新; 关键词：G2基因克隆甲基营养型酵母

甲基营养型酵母表达载体系统研究进展被引量：16: 2001年; Methylotrophic yeast expression system is one of the eukaryotic expression systems which was widely applied and devoloped fast in rencent years. Expression of the methanol inducible genes, expression vector, fermentation, purification and character of secretion proteins, factors affecting heterologous gene expression, comparision of methylotrophic yeast and other yeasts are reviewed in this paper. Ref; 欧阳菁龙綮新杨林王珣章; 关键词：甲基营养型酵母表达载体系统

甲基营养型酵母系统表达的重组人表皮生长因子的纯化及其性质被引量：18: 2001年; 目的获得可用于动物试验和临床试验的人表皮生长因子原料药。方法化学合成的人表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中表达并分泌到培养基中的人表皮生长因子蛋白经 Phenysepharose 6 Fast Flow（ high sub）柱、 Q-sepharose High Performance柱、 Superdex 30柱纯化后进行生物学性质检测。结果纯化后的蛋白产物纯度达 98％，是无热源、无内毒素、无甲基营养型酵母染色体 DNA污染的，有正确的分子量、等电点、氨基末端氨基酸顺序、肽图、紫外光谱、及生物活性性质的重组蛋白。结论纯化蛋白符合动物试验和临床试验的要求，为制备多种人表皮生长因子制剂进行动物实验和临床试验打下了基础。; 黄秉仁蔡良婉王欣马雪梅马晓骊李旌军李红卓韦忠明梁青郑华军唐琪浩唐申秀廖洪涛向绪传; 关键词：重组人表皮生长因子纯化生物活性

戊型肝炎病毒（HEV）开读框架2（ORF2）1．3kb基因片段在甲基营养型酵母（Pi: 1999年; 戊型肝炎病毒（HEV）整个基因组有3个开放性阅读框架（ORFs)，ORF2是主要结构基因编码区，将戊型肝炎病毒（HEV）ORF21．3kb基因定向亚克隆到甲基营养型酵母－巴斯德毕赤酵母（Pichia Pastoris)分泌性表达质粒pHIL-S1和pPIC9中，转化入大肠杆菌，筛选出阳性重组株，重组质粒pPIC9HEV和pHILS1HEV分别经限制性内切酶Sal I和Bg1 II线化，电转化入巴斯德毕赤酵母GS115。与宿主GS115染色体发生整合，整合方式不同，产生两种表型，分别为HIS＋MUT＋）甲醇诱导快的，HIS＋MUTS（甲醇诱导慢的），通过营养缺陷性选择性培养基筛选出阳性菌株，经PCR技术确认外源基因整合在酵母染色体中，重组菌株先在甘油培养基中充分增殖，然后转移到甲醇培养基中诱导，取上清液，用ELIAA，SDS－PAGE，Western-blot检测到特异性HEVORF2蛋白，得到有效表达HEVORF2蛋白的菌株。; 张春江; 关键词：戊型肝炎病毒巴斯德毕赤酵母电转化

甲基营养型酵母基因表达系统被引量：1: 1998年; 甲基营养型酵母为第二代酵母表达系统，具有表达水平高，产物活性好，培养成本低，易扩大为工业化生产等特点，近来得到越来越广泛的应用。本文就该系统的载体构件、外源基因与宿主染色体的整合、分泌表达。; 汪德刚李河民; 关键词：甲基营养型酵母酵母基因表达系统表达量

利用甲基营养型酵母表达外源基因被引量：1: 1998年; 甲基营养型酵母是一种新型外源基因表达系统,它兼具原核细胞良好的可操作性和真核系统的后加工,其发酵条件简单,表达水平高,适宜高密度培养,并且具有分泌型表达的优势,为工业化生产和纯化提供极大的方便.它作为一个具有广阔前景的系统正日益受到人们的重视.; 曹勇; 关键词：甲基营养型酵母外源基因

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