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- 赵冬敏钱卫平于建宁赵芳林志平王慧利
- TRAF2在柯萨奇A组10型病毒感染细胞中的表达及作用
- 2025年
- 目的目的探讨TNF受体相关因子2(tumor necrosis factor receptor-associated factor 2,TRAF2)在柯萨奇A组10型病毒(coxsackievirus A10,CVA10)感染细胞模型和动物模型中的表达及其作用机制。方法方法将CVA10接种至非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)构建细胞模型,通过实时荧光定量PCR技术和Western blot技术检测核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)和TRAF2的表达水平;通过TRAF2过表达的CVA10感染细胞模型进一步验证其相互作用。同时,收集不同日龄ICR小鼠血液样本,检测TRAF2的表达;构建ICR小鼠CVA10感染模型,分析CVA10感染后,不同时间点的血清中TRAF2的含量变化。结果结果研究发现,CVA10感染细胞后,TRAF2的表达显著下降,NF-κB的磷酸化和总蛋白的水平明显提高;而在TRAF2过表达细胞模型中,CVA10的复制受到抑制,NF-κB的磷酸化和总蛋白的水平显著下降。正常小鼠在不同日龄血清中TRAF2的表达存在差异,从5天到8周龄呈现先上升后下降的趋势,而在CVA10感染小鼠模型中,同样发现TRAF2的表达显著下调。结论结论CVA10感染可激活NF-κB信号通路,而TRAF2通过NF-κB信号通路来参与调控CVA10病毒复制、感染细胞的过程。
- 金翠宁徐扬成昕宇全传松李玉明刘绍琼
- 关键词:病毒复制核转录因子KB
- 重组腺相关病毒感染细胞后目的蛋白表达水平检测方法的建立及验证
- 2024年
- 目的建立重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)感染细胞后目的蛋白表达水平的检测方法,并进行方法验证,以期用于rAAV9生产过程中不同阶段产物的质量监控。方法将rAAV9供试品用感染增强剂Envirus-AAV处理后,感染经羟基脲(hydroxyurea,HU)作用的人脑星形胶质母细胞瘤细胞U87-MG,以rAAV9参考品为标准,采用ELISA法检测细胞中目的蛋白戊二酰辅酶A脱氢酶(glutaryl-CoA dehydrogenase,GCDH)的表达水平,并验证方法的专属性、准确性、精密性、线性范围、定量限及耐用性。采用建立的方法检测8批rAAV9供试品。结果供试品缓冲液的A_(450)-A_(630)为0.3,略低于蛋白定量四参数标准曲线最低稀释点(1 ng/mL);150%、100%、50%理论相对效价水平样品平均回收率均在100.0%~107.3%范围内;同1名实验员重复3次及不同实验员检测3个理论相对效价水平样品的目的蛋白表达水平RSD均<25%;rAAV9供试品在50%~150%理论相对效价水平范围内,与相应的目的蛋白表达水平呈良好的线性关系,直线回归方程为y=1.077 x-0.022,R~2为0.984;方法的定量限为0.59,即6.0×10^(12)vg/mL;U87-MG细胞用HU孵育不同时间(18、21、24 h)、细胞培养上清液于不同条件(室温放置0.5 h、-60℃以下放置12 h、-60℃以下放置24 h)保存后,目的蛋白表达水平RSD均<25%。1~8批rAAV9供试品目的蛋白表达水平分别为111%、121%、72%、65%、86%、75%、102%、91%。结论建立的rAAV感染细胞后目的蛋白表达水平检测方法具有良好的专属性、准确性、精密性及耐用性,可用于rAAV9生产过程中不同阶段产物的质量监控。
- 裴德宁闫书美史新昌胡倩周勇刘宾
- 关键词:重组腺相关病毒目的蛋白羟基脲
- 体外病毒感染细胞后一种用于检测环状RNA hsa_circ_0058495的引物及其应用
- 本发明提供了体外病毒感染细胞后一种用于检测环状RNA hsa_circ_0058495的引物及其应用,涉及分子生物学技术领域。本发明用于检测环状RNAhsa_circ_0058495的引物序列包括正向引物和反向引物;正向...
- 谢鹤 陈利民 段晓琼 吴梅 孙巨军 王海宁
- 一种疫病病毒感染细胞光学检测方法及装置
- 本发明属于光学检测技术领域,尤其是一种疫病病毒感染细胞光学检测方法及装置,针对现有的病毒感染细胞光学检测装置在对检测过程是不连续的,在上一次检测完成后,需重新安置样本和荧光素工作液,这极大的减慢了装置在大批量的样本检测时...
- 赵文娟 张倩韩猛立 董峰张星星 钟发钢黄新吴桐忠
- 一种针对大口黑鲈虹彩病毒感染细胞的核酸适配体及其应用
- 本发明公开了一种针对大口黑鲈虹彩病毒感染细胞的核酸适配体及其应用,所述核酸适配体的核苷酸序列为5’‑GCCCGAGCACGCAGATCTTGCGCATAAAGCTTACGACCTCTTGTTACGTTGCCTTCA‑3’...
- 李鹏飞余庆刘明珠苏美珍卓晓菲王浩王高学
- 两种块染技术对病毒感染细胞超薄切片染色效果的评价
- 2024年
- 目的评价锇-硫代碳酰肼-锇(osmium-thiocarbohydrazide-osmium,OTO)及还原锇-硫代碳酰肼-锇(ferrocyanide-reduced-osmium-thiocarbohydrazide-osmium,ROTO)两种块染技术对病毒样品超薄切片的染色效果。方法收集四种病毒(人5型腺病毒、I型单纯疱疹病毒、人肠道病毒、呼吸道合胞病毒)感染的细胞样品,分别用OTO及ROTO技术进行块染,并以常规超薄切片染色为对照,通过透射电子显微镜观察并拍照,统计分析OTO及ROTO技术制备的病毒样品染色效果。结果OTO及ROTO法对病毒感染细胞样品的染色效果良好,病毒结构清楚,与常规染色效果相比无显著差异。结论OTO及ROTO技术可适用于多种类型病毒样品的块染处理,为病毒感染细胞样本的连续超薄切片、大尺度样品制备及电镜观测提供了依据。
- 冯红丽彭宇宁宋敬东
- 关键词:病毒超薄切片透射电子显微镜
- ssDNA核酸适配体在识别大口黑鲈虹彩病毒感染细胞中的应用
- 本发明公开了一种ssDNA核酸适配体及其在识别大口黑鲈虹彩病毒感染细胞中的应用,所述ssDNA核酸适配体的核苷酸序列为5’‑GGCGGTCCCGATGGCGAGCAAGCCAATAACCC CCCATGCACATCGTT...
- 李鹏飞余庆刘明珠苏美珍卓晓菲王浩王高学
- HIV病毒感染细胞的体内分布及关键抑制因素
- 2024年
- 目的 研究HIV感染细胞的体内分布及关键抑制因素,了解HIV在体内的生物学特性,了解艾滋病毒在患者体内的分布,并对抑制因素的分析发现新的治疗靶点和药物,为艾滋病的预防和治疗提供科学依据。方法 采用横断面回顾分析,选取2020年4月至2022年4月贵州某医院感染科接受治疗的艾滋病患者252例为研究对象。按照疾病分期将患者病例分为感染期和艾滋病期,记录两组患者的一般资料,根据两组患者艾滋病毒体内分布、关键抑制因素及不同分期感染病毒载量的分析来判断艾滋病病毒对不同分期患者产生的影响。结果 两组患者的性别、年龄、吸烟史、高血压、糖尿病史、饮酒史等指标比较均无差异(P>0.05);两组患者唾液、汗液和尿液比较均无差异(P>0.05);两组患者未检出率以及各病毒载量的区间差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者血液、精液/阴道分泌物、关节液、腹腔积液中的病毒载量对比差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者体内GP160、GP120、GP41及P24的产生情况比较均无差异(P>0.05);P66、P55、P51、P31、P17的产生情况差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 艾滋病患者血液、精液/阴道分泌物、关节液、腹腔积液中的病毒载量较多,且艾滋病期患者体内的病毒载量要明显高于感染期;艾滋病患者体内P66、P55、P51、P31、P17特异性抗体与感染期患者均有统计学差异,提示可作为艾滋病分期的参考指标。
- 宋晓钰商正玲冯勤颖周信忠葛章文
- 关键词:艾滋病毒病毒载量
- 15种岭南中草药抑制新冠假病毒感染细胞的药效筛选研究
- 2024年
- 目的筛选防治新型冠状病毒感染(COVID-19)的岭南特色中草药。方法通过荧光素酶发光检测技术,采用假病毒中和药效实验方法,对15种岭南地区特有中草药进行筛选并评估。结果草药降真香展示出较为明显的中和病毒作用,其抑制率为(83.6±4.0)%,草药山大颜与布渣叶有轻度的中和病毒作用,抑制率分别为(46.1±3.2)%、(58.7±5.9)%,其他草药则未表现出明显的中和病毒作用。结论岭南特色道地中药材在COVID-19的临床防治中具有潜在的应用价值,本研究结果为进一步的药物筛选和临床用药提供参考依据。
- 章晶王祥红钟志勇陈登科
- 关键词:新型冠状病毒
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- 曹亮

- 作品数:364被引量:1,145H指数:20
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- 王振中

- 作品数:1,559被引量:5,870H指数:34
- 供职机构:江苏康缘药业股份有限公司
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