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骨髓间充质干细胞来源外泌体与硫酸软骨素酶ABC联合治疗大鼠脊髓损伤被引量：2: 2022年; 背景:如何改善损伤局部微环境,减少胶质瘢痕形成,促进神经元和轴突修复与再生,是治疗脊髓损伤的难点。研究发现,硫酸软骨素酶ABC可通过介导硫酸软骨素蛋白聚糖的降解,增强轴突的再生和可塑性;同时骨髓间充质干细胞来源外泌体可通过抗凋亡、调节免疫反应、增强神经元再生能力等途径在脊髓损伤修复中发挥作用。目的:研究骨髓间充质干细胞来源外泌体联合硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤的修复作用,并探讨其机制。方法:用外泌体提取试剂盒提取骨髓间充质干细胞外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测CD63、Alix表达。取50只SD大鼠随机分成5组:假手术组、模型组、硫酸软骨素酶ABC组、外泌体组、联合组,每组10只。采用改良Allen’s法构建大鼠脊髓损伤模型,硫酸软骨素酶ABC组、联合组用微量注射器直接向损伤局部注射硫酸软骨素酶ABC,术后2 h,外泌体组、联合组通过尾静脉注射骨髓间充质干细胞来源外泌体,每隔2 d注射1次,共注射3次。脊髓损伤后第1,3,7,14,28天进行后肢运动功能评分,第14天每组取6只大鼠经灌注取材做成石蜡切片,苏木精-伊红染色观察脊髓损伤区病理变化,免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白表达,免疫组化检测生长相关蛋白43表达。结果与结论:①外泌体呈圆形、椭圆形或"茶托样",大小不均;CD63、Alix呈阳性表达;②与模型组、硫酸软骨素酶ABC组、外泌体组相比,联合组BBB评分高,脊髓损伤区面积小,胶质纤维酸性蛋白表达降低,生长相关蛋白43表达升高(P均<0.05);③结果表明,骨髓间充质干细胞外泌体联合硫酸软骨素酶ABC能抑制损伤区胶质纤维酸性蛋白表达,上调生长相关蛋白43表达,减少胶质瘢痕形成,改善损伤局部微环境,从而促进大鼠脊髓损伤后神经元和轴突的修复与再生。; 谢兴奇胡伟屠冠军; 关键词：干细胞外泌体硫酸软骨素酶ABC 胶质纤维酸性蛋白生长相关蛋白43

KRP203联合硫酸软骨素酶ABC和外泌体治疗小鼠自身免疫性脑脊髓炎的研究: 多发性硬化症(Multiple sclerosis,MS)是由T淋巴细胞介导的慢性中枢神经系统(Central nervous system,CNS)脱髓鞘疾病,主要以神经炎症和进行性神经退行性病变为特征,全球患者超过2...; 李彤; 关键词：小鼠自身免疫性脑脊髓炎硫酸软骨素酶ABC 外泌体

用于纯化硫酸软骨素酶ABC的方法: 本发明公开了用于纯化硫酸软骨素酶ABC的方法。该方法包括使用固定有肝素的亲和柱，通过层析法从所述含有硫酸软骨素酶ABC的基质中获得纯化的所述硫酸软骨素酶ABC。该方法能够获得高纯度的硫酸软骨素酶ABC，并且具有简单和高回...; 黄炳镠钟玮康; 文献传递

一种重组硫酸软骨素酶ABC-I蛋白及其制备方法与应用: 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种重组硫酸软骨素酶ABC‑I蛋白及其制备方法与应用。本发明使用分子克隆技术通过提取硫酸软骨素酶ABC‑I基因设计引物，经PCR扩增后与表达载体连接，构建重组表达载体；将重组表达载体转化至...; 范小蔓黄佳滢张业旺; 文献传递

骨髓间充质干细胞外泌体与硫酸软骨素酶ABC联合治疗大鼠脊髓损伤: 目的:脊髓损伤(SCI)后,如何改善损伤局部微环境,减少胶质瘢痕形成,促进神经元和轴突修复与再生,是治疗SCI的难点。研究发现,硫酸软骨素酶ABC(Ch ABC)可通过介导硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPGs)的降解,增强轴突...; 谢兴奇; 关键词：骨髓间充质干细胞外泌体硫酸软骨素酶ABC 脊髓损伤 GFAP GAP-43; 文献传递

不同连接肽在硫酸软骨素酶ABC I重组表达中的应用研究: 2020年; 硫酸软骨素酶ABC I(ChSase ABC I)是一类能够将硫酸软骨素、软骨素、透明质酸等糖胺多糖降解为寡糖及不饱和二糖的裂解酶。该研究将硫酸软骨素酶ABC I基因与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因分别用FFFFF和RRRRR两种连接肽连接,并克隆到pMAL-c2X载体上,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)高效表达。结果表明,重组酶MBP-FFFFF-ChSase ABC I的酶活和比酶活分别为716.5 IU/L发酵液和1.15 IU/mg蛋白,重组酶MBP-RRRRR-ChSase ABC I的酶活和比酶活分别为741.0 IU/L发酵液和1.13 IU/mg蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,重组酶MBP-FFFFF-ChSase ABC I和MBP-RRRRR-ChSase ABC I的分子质量均为130 kDa,并且都为可溶性蛋白。; 李晔陈振娅王瑞丽沈荣危晴陈亮; 关键词：普通变形杆菌连接肽

在磁场作用下载硫酸软骨素酶ABC纳米微粒可影响许旺细胞的迁移: 2020年; 背景:由于缺乏轴突再生微环境以及神经胶质瘢痕的形成,使脊髓损伤修复的临床效果通常不尽如人意。许旺细胞作为神经再生的支持细胞,因其在星形胶质细胞丰富的中枢神经系统的迁移能力差而限制了其对轴突再生的作用。目的:将载有硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)的超顺磁性纳米微粒导入许旺细胞,探讨在外部磁场的作用下对许旺细胞在星形胶质细胞区域迁移的影响。方法:从出生1-3d的SD大鼠坐骨、臂丛神经和大脑皮质分别提取许旺细胞和星形胶质细胞并纯化,通过免疫荧光染色鉴定其纯度。以超顺磁性纳米微粒(PEI-SPIONs)最佳转染质量浓度2 mg/L且与ChABC最佳质量比为1∶4对许旺细胞进行转染,同时给予外部磁场强度1.4 T作用2 d,用细胞迁移实验评估单纯许旺细胞、PEI-SPIONs/ChABC转染的许旺细胞以及外部磁场作用下PEI-SPIONs/ChABC转染的许旺细胞在星形胶质细胞区域的迁移能力。结果与结论:①许旺细胞和星形胶质细胞的纯度分别达到(91.7±1.2)%和(93.3±2.2)%;②与许旺细胞组相比,PEI-SPIONs/ChABC转染的许旺细胞进入星形胶质细胞区域的数量明显增加(P<0.05);③与许旺细胞组相比,在外部磁场的作用下PEI-SPIONs/ChABC转染的许旺细胞进入星形胶质细胞区域的数量和迁移距离显著增加(P<0.005);④结果表明,PEI-SPIONs/ChABC转染可以增强许旺细胞突破胶质瘢痕的能力,且增加了与星形胶质细胞的融合;同时在外部磁场的引导下显著增强了许旺细胞的迁移能力,该方法可能成为治疗脊髓损伤后轴突再生的一种新策略。; 高楗勃夏冰李胜友杨雨洁马腾于芃罗卓荆黄景辉; 关键词：许旺细胞迁移硫酸软骨素酶ABC

一种细菌及其产生的硫酸软骨素酶ABC: 本发明属于生物技术领域，提供了一种细菌及其产生的硫酸软骨素酶ABC。本发明涉及一种来源于潮间带污泥的不动杆菌（<I>Acinetobacter</I>sp.C26），该菌株具有营养条件简单、易培养、代时短的特点；使用本发...; 江晓路朱常亮; 文献传递

硫酸软骨素酶ABC联合脊髓康对大鼠脊柱脊髓损伤后的神经功能恢复、TGF-β1、HIF-1α、Nogo-NgR信号通路的影响被引量：6: 2019年; 目的:探究硫酸软骨素酶ABC(Ch ABC)联合脊髓康对大鼠脊柱脊髓损伤后的神经功能恢复及TGF-β1、HIF-1α、Nogo-NgR信号通路的影响。方法:60只大鼠随机分为4组,分别为对照组、模型组、Ch ABC组和Ch ABC+脊髓康。使用Allen’s法建立大鼠脊柱脊髓损伤模型。Basso Beattie Bresnah-an(评分)和体感诱发电位(sEP)检测评估脊髓神经功能。使用RT-qPCR检测mRNA水平,Westernblot检测蛋白水平。结果:建模后大鼠BBB评分显著降低(P<0.05),干预后3组的BBB评分均有提高,其中Ch ABC+脊髓康组BBB评分显著高于Ch ABC组(P<0.05)。建模后大鼠SEP显著升高(P<0.05),干预后3组的BBB评分均有降低,其中Ch ABC+脊髓康组BBB评分显著低于Ch ABC组(P<0.05)。干预后Ch ABC组和Ch ABC+脊髓康组TGF-β1显著高于模型组,HIF-1α显著低于模型组(P<0.05)。且干预后Ch ABC+脊髓康组TGF-β1的水平显著高于Ch ABC组而HIF-1α显著低于Ch ABC组(P<0.05)。干预后Ch ABC组和Ch ABC+脊髓康组Nog-oNgR通路表达水平显著低于模型组(P<0.05),并且干预后Ch ABC+脊髓康组的Nogo-A、NgR、LINGO-1表达水平显著低于ChABC组(P<0.05)。结论:ChABC联合脊髓康具有更强的促进神经功能恢复的作用,脊髓康的联合使用可进一步抑制HIF-1α水平而提高TGF-β1水平,提高预后促进脊柱愈合。并且联合用药的作用机制可能与其具有抑制Nogo-NgR信号通路促进神经元生长的作用有关。; 黄贻泽彭琳张戈; 关键词：脊髓损伤脊椎损伤硫酸软骨素酶ABC 脊髓康

一种外切型硫酸软骨素酶ABC及其制备方法与应用: 本发明提供一种外切型硫酸软骨素酶ABC，其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供一种外切型硫酸软骨素酶ABC融合蛋白，该融合蛋白融合有上述外切型硫酸软骨素酶ABC和纯化标签。同时，本发明还提供一种含有上述外...; 李晔周朝兰蓉辛秀兰袁其朋; 文献传递

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