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红毛五加多糖单一组分AHP-Ⅲ对巨噬细胞的免疫调节作用及其机制被引量：2: 2022年; 探讨红毛五加多糖(Acanthopanax giraldii Hams polysaccharide)单一组分AHP-Ⅲ(Acanthopanax giraldii Hams polysaccharideⅢ)对小鼠巨噬细胞RAW 264.7的激活作用及机制。不同浓度AHP-Ⅲ作用RAW 264.7细胞,中性红试验检测细胞吞噬能力;ELISA和Griess法检测其IL-6、TNF-α和NO的释放量;RT-qPCR检测iNOS、TNF-α和IL-6 mRNA相对表达水平;Western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白磷酸化水平。在实验浓度范围内,AHP-Ⅲ可显著增强RAW 264.7细胞的吞噬能力(P<0.05);促进RAW 264.7分泌NO、TNF-α和IL-6(P<0.05或P<0.001);并显著增加RAW 264.7细胞中IL-6、TNF-α和iNOS mRNA的表达量,呈剂量依赖性;Western blot结果表明,AHP-Ⅲ作用RAW 264.7细胞后,NF-κB中的p65、IKKβ、IκBα磷酸化水平明显升高。结果显示红毛五加多糖AHP-Ⅲ对小鼠巨噬细胞RAW 264.7具有显著激活作用。; 许财郭晓晓马媛王麒超孟爱霞陈永; 关键词：红毛五加多糖免疫调节

从红毛五加多糖提取液中高效快速脱除蛋白及色素的方法: 本发明提供了一种红毛五加多糖提取液脱蛋白、脱色素方法，在提取液中加入蛋白酶将蛋白质分子降解后，借助反胶束溶液处理技术将其中的蛋白质分子和色素分子一起去除，通过蛋白酶‑CTAB联合处理实现了蛋白类、色素类杂质的同步高效率去...; 陈永吴江梁淑娟; 文献传递

红毛五加多糖Ⅲ的荧光标记及其在小鼠体内的药动学研究: 2020年; 目的对红毛五加多糖Ⅲ(AHP-Ⅲ)的还原性末端进行选择性荧光标记,并研究AHP-Ⅲ在小鼠体内的药动学特征。方法利用胺化还原法对AHP-Ⅲ进行异硫氰酸荧光素(FITC)荧光标记,并通过荧光分光光度计和紫外可见光谱扫描对偶联标记结果进行确证。通过小鼠单次静脉注射给予FITC-AHP-Ⅲ(f-AHP-Ⅲ)后,检测不同时间点样品中的荧光强度,用DAS软件求算药动学参数并分析。结果AHP-Ⅲ荧光标记后,多糖得率和荧光标记效率分别为36.43%和0.48%。血清、尿液等样品中f-AHP-Ⅲ的线性范围为3.75~120μg·mL-1(R2>0.9982),日内和日间RSD值≤11.13%,相对回收率在84.20%~106.94%。单次静脉注射给药后,主要动力学参数为:Cmax为(43.01±0.80)mg·L-1,tmax为0.08 h,AUC0~t为(113.87±1.30)mg·h·L-1,AUC0~∞为(148.35±2.27)mg·h·L-1,t1/2为(23.66±1.32)h,CLz为0.27 L/(h·kg),MRT为(29.75±1.63)h,Vz为(9.20±0.39)L·kg-1。组织中药物含量检测显示,单次静脉给药后f-AHP-Ⅲ在小鼠体内主要分布在肾、小肠、肺及肝脏等组织中,其排泄主要是以尿液的形式。结论成功实现了AHP-Ⅲ的荧光标记,绝大多数药物聚集在肾、小肠、肺及肝脏。上述研究为进一步阐明AHP-Ⅲ药理作用机制奠定了基础。; 吴疆郭晓晓李儒月贾明珠李艳艳陈永; 关键词：荧光标记小鼠药动学

红毛五加多糖对大鼠肝细胞免疫损伤的保护作用及其机制被引量：4: 2019年; 红毛五加属于五加科植物,而五加科植物大多具有调节免疫力的双向调节作用,红毛五加多糖是从中药红毛五加中提取的单一组分,目前关于红毛五加多糖的抑炎作用还少有报道。为了探究红毛五加多糖AHP-Ⅱ对LPS导致的大鼠肝细胞免疫损伤的保护作用及其作用机制,该研究将实验分为空白组、模型组(LPS,40μg·mL^-1)和AHP-Ⅱ低、中、高剂量组(25,50,100μg·mL^-1)五组,以LPS(40μg·mL^-1)来制备大鼠肝细胞免疫损伤模型,先用ELISA方法检测细胞分泌TNF-α的水平及流式检测ROS的含量,来探究AHP-Ⅱ不同剂量对炎症因子的抑制作用,再用western方法检测P-JNK2的蛋白水平来进一步探究AHP-Ⅱ的抑制作用机制。结果表明:低、中、高剂量组的AHP-Ⅱ均可使肝细胞损伤后的TNF-α含量下降。同时,AHP-Ⅱ中、高剂量组均可使损伤后的肝细胞ROS的分泌量下降,且AHP-Ⅱ高剂量组抑制ROS的作用最强。在加入AHP-Ⅱ后,JNK2蛋白的磷酸化水平呈剂量依赖性降低,AHP-Ⅱ高剂量组抑制作用最强。这说明红毛五加多糖AHP-Ⅱ可以通过降低P-JNK2的蛋白含量来抑制炎症因子TNF-α及ROS的水平,以发挥免疫保护作用。; 李青青吴疆郑碧荣李儒月王书贤朱耀强; 关键词：红毛五加多糖脂多糖 JNK

从红毛五加多糖提取液中高效快速脱除蛋白及色素的方法: 本发明提供了一种红毛五加多糖提取液脱蛋白、脱色素方法，在提取液中加入蛋白酶将蛋白质分子降解后，借助反胶束溶液处理技术将其中的蛋白质分子和色素分子一起去除，通过蛋白酶‑CTAB联合处理实现了蛋白类、色素类杂质的同步高效率去...; 陈永吴江梁淑娟

红毛五加多糖对心衰大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达影响的机制研究被引量：7: 2019年; 目的探讨红毛五加多糖(AGP)对心衰大鼠心肌细胞凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法将120只2~3月龄SPF级SD大鼠(雌雄各半)随机分为假手术组、心力衰竭模型组和AGP低、中、高剂量组,每组20只。AGP低中高剂量组皮下注射AGP(10、20、30mg·kg^-1·d^-1),假手术组和模型组皮下注射等量生理盐水。预给药4d后采用左冠状动脉前降支结扎术建立大鼠心衰模型。建模42d后,通过超声检测左室短轴缩短率(FS)及左室射血分数(EF);邻苯三酚法及硫代巴比妥酸法分别测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;TUNEL试剂盒测定心肌细胞凋亡率;免疫印迹检测Bcl-2、Bax、PI3K和p-ATK蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组EF值和FS值明显降低[(31.88±2.56)%比(99.71±0.42)%、(18.02±1.52)%比(91.12±3.44)%,均P<0.05)],SOD活性明显降低[(90.21±6.12)nU/ml比(124.93±8.87)nU/ml,P<0.05)],MDA含量明显升高[(6.47±0.68)nmol/ml比(3.68±0.39)nmol/ml,P<0.05)],心肌细胞凋亡率明显升高[(22.38±1.42)%比(5.02±0.51)%,P<0.05)],Bcl-2、PI3K和p-ATK蛋白表达明显降低(0.087±0.010比0.762±0.059、0.052±0.005比0.859±0.072、0.021±0.005比0.151±0.016,均P<0.05),Bax蛋白表达明显升高(0.087±0.010比0.762±0.059,P<0.05)。与模型组比较,低、中、高剂量AGP组EF值、FS值、SOD活性均明显升高(均P<0.05),MDA含量、心肌细胞凋亡率明显降低(均P<0.05),Bcl-2、PI3K和p-ATK蛋白表达明显升高(均P<0.05),Bax蛋白表达明显降低,且有浓度依赖性(P<0.05)。结论AGP可降低心衰大鼠心肌细胞凋亡,机制可能与抑制氧化应激及激活PI3K/AKT信号通路有关。; 刘敏李永翔朱玉森杨茂勇菅向东; 关键词：心衰大鼠心肌细胞红毛五加多糖凋亡

一种红毛五加多糖的超声波提取方法: 本发明提出了一种红毛五加多糖的超声波提取方法，属于中药制药领域。依次包括：红毛五加70～80℃烘干，粉碎机粉碎；按照红毛五加与水重量比为1∶20～22加水浸泡，并以超声波辅助提取红毛五加多糖，过滤后得提取液；将提取液减压...; 陈永梁淑娟; 文献传递

红毛五加多糖、提取及提纯方法、组成分析方法及用途: 本发明涉及一种红毛五加多糖的提取方法、提纯方法、组成分析方法以及该提纯后的红毛五加多糖及其用途，所述提取方法包括A、原料预处理；B、分步酶解；C、液液萃取；D、醇沉，得红毛五加粗多糖，该方法通过独特的原料预处理、分步酶解...; 陈永梁淑娟; 文献传递

红毛五加多糖AHP-II对THP-1源巨噬细胞中酶活性的影响被引量：5: 2016年; 本研究检测红毛五加多糖AHP-II对THP-1巨噬细胞内多种酶活性的影响。通过PMA诱导THP-1成为巨噬细胞,用不同浓度的AHP-II与巨噬细胞共孵育48 h后,测定超氧化物歧化酶(SOD)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACP)、ATP酶的活性及溶菌酶(LZM)含量变化。结果显示AHP-II能显著增强细胞内的SOD、SDH、ACP和ATP酶的活性及LZM的含量。; 蔡文娣陈永陈志婷徐止露付晓燕; 关键词：红毛五加多糖巨噬细胞 ACP ATPASE

红毛五加多糖AHP-Ⅱ的荧光标记及其在小鼠腹腔巨噬细胞上的定位被引量：3: 2016年; 目的:对红毛五加多糖AHP-Ⅱ的还原性末端进行选择性荧光标记,并观察AHP-Ⅱ与小鼠腹腔巨噬细胞结合情况。方法:利用胺化还原法对AHP-Ⅱ进行异硫氰酸荧光素(FITC)荧光标记,并通过紫外吸收光谱扫描和荧光分光光度术对偶联标记结果进行确证。通过测定多糖标记前后对小鼠腹腔巨噬细胞激活情况,检验该标记方法对AHP-Ⅱ生物学活性的影响。采用荧光显微技术和流式细胞术观察AHP-Ⅱ与小鼠腹腔巨噬细胞的结合情况。结果:AHP-Ⅱ荧光标记后的多糖得率和荧光标记效率分别为20.57%和0.809%。生物活性检测发现,AHP-Ⅱ还原性末端荧光标记后,对其激活小鼠腹腔巨噬细胞的能力没有显著影响(P>0.05)。荧光显微观察显示AHP-Ⅱ-FITC定位在小鼠腹腔巨噬细胞表面,流式细胞术检测发现在试验剂量范围内(50~200μg·m L^(-1)),巨噬细胞的荧光强度与AHP-Ⅱ-FITC加入量呈正相关,且荧光标记多糖与未标记多糖间存在竞争关系。结论:该方法可用于AHP-Ⅱ的标记研究,AHP-Ⅱ可与小鼠腹腔巨噬细胞细胞膜结合。; 陈永张青孙风祥李桂芝孟爱霞陈志婷黄传洲刘志军; 关键词：红毛五加多糖生物活性检测流式细胞检测巨噬细胞

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