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- 四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化肝组织中SHP2表达与在体肝星状细胞活化及增殖的关系
- 2023年
- 目的探讨四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化肝组织及在体肝星状细胞(HSC)的含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)表达变化与在体HSC活化及增殖的关系。方法随机将50只健康雄性SD大鼠分为对照组(10只)、模型组(40只),采用腹腔注射四氯化碳法构建大鼠肝纤维化模型,Masson三色及HE染色检测大鼠肝组织的病理组织学变化,免疫组织化学染色检测大鼠肝组织的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及SHP2表达,SHP2与α-SMA免疫荧光双标记检测大鼠肝组织中活化HSC的SHP2表达。结果与对照组大鼠肝组织的α-SMA阳性表达积分光密度值(IOD)(0.09±0.01)相比,造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织的α-SMA阳性表达IOD(0.13±0.01、0.18±0.01、0.24±0.02、0.28±0.02)显著增加(P<0.05),并随着造模时间延长逐渐升高(P<0.05),即在体HSC的活化及增殖逐渐加快(α-SMA是HSC的活化标志)。造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织的SHP2阳性表达IOD(0.23±0.01、0.27±0.01、0.30±0.01、0.33±0.01)较对照组(0.19±0.01)显著增加(P<0.05),且逐渐升高(P<0.05)。SHP2与α-SMA免疫荧光双标记检测显示,造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织中表达SHP2的活化HSC占总的活化HSC的百分比(54%±3%、62%±2%、73%±4%、86%±3%)逐渐升高(P<0.05)。结论在四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化模型中,肝组织及在体HSC的SHP2表达与在体HSC的活化及增殖呈显著正相关。
- 张朋垒张明婷郝礼森靳丽敏潘恩亮何宇苗笑佳王薇
- 关键词:肝星状细胞
- 大鼠纤维化肝组织中SHP1表达与肝星状细胞活化及增殖的关系
- 2022年
- 目的:探讨大鼠肝纤维化病理过程中肝组织及在体肝星状细胞(HSC)的含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP1)表达变化与在体HSC活化及增殖的关系。方法:随机将50只健康雄性SD大鼠分为对照组(10只)、模型组(40只),采用腹腔注射四氯化碳法建立大鼠肝纤维化模型,Masson三色染色及HE染色检测大鼠肝脏组织的病理组织学变化,SHP1与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光双标记检测大鼠肝组织中活化HSC的SHP1表达,免疫组织化学染色检测大鼠肝组织的α-SMA及SHP1表达,并分别对大鼠肝组织的SHP1表达及大鼠肝组织中活化HSC的SHP1表达与大鼠肝组织的α-SMA表达进行Pearson’s相关性分析。结果:大鼠肝纤维化模型成功构建,随着造模时间延长,大鼠肝纤维化逐渐加重。与对照组大鼠肝组织的SHP1阳性表达平均光密度值(MOD)(0.08±0.01)比较,造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织的SHP1阳性表达MOD(0.11±0.01、0.14±0.01、0.16±0.01、0.19±0.01)显著增加(P<0.05),并逐渐升高(P<0.05)。与对照组大鼠肝组织的α-SMA阳性表达MOD(0.04±0.01)比较,造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织的α-SMA阳性表达MOD(0.06±0.01、0.09±0.01、0.12±0.01、0.16±0.02)明显增加(P<0.05),并逐渐升高(P<0.05),即在体HSC的活化及增殖逐渐加快(α-SMA是HSC的活化标志)。SHP1与α-SMA免疫荧光双标记检测显示,造模2周、4周、6周、8周大鼠纤维化肝组织中表达SHP1的活化HSC占总的活化HSC的百分比(26.49%±3.44%、37.14%±4.57%、44.90%±2.94%、58.09%±5.33%)逐渐升高(P<0.05)。上述大鼠纤维化肝组织的SHP1表达及大鼠纤维化肝组织中表达SHP1的活化HSC占总的活化HSC的百分比均与大鼠纤维化肝组织的α-SMA表达呈显著正相关(r值为0.926,0.984,P<0.05)。结论:在大鼠肝纤维病理过程中,肝组织及在体HSC的SHP1表达与在体HSC的活化及增殖呈显著正相关。
- 郝礼森陈盼盼靳丽敏展宗媛杨小师季景秀蒋美钰莫艳波
- 关键词:肝星状细胞增殖
- gp73在小鼠肝纤维化肝组织中的表达及机制被引量:8
- 2020年
- 目的在小鼠肝组织中探讨高尔基体跨膜糖蛋白73(gp73)在肝纤维化进程中的变化及机制。方法腹腔注射CCl4构建C57BL/6J小鼠肝纤维化模型;用ELISA检测小鼠血清中gp73的水平;用免疫组织化学染色检测肝组织内gp73的表达;用密度梯度离心法分离肝星状细胞(HSC)并检测其中gp73的表达;用免疫组织化学染色法检测肝组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)的表达;接下来分别转染IGF2BP3过表达与敲低的质粒,用RT-PCR检测GP73蛋白的编码基因GOLM1的表达变化;流式细胞计量术检测基因敲除鼠肝纤维化模型中HSC内gp73的表达。结果在肝纤维化模型的小鼠血清(P<0.01)、肝组织(P<0.05)及原代HSC(P<0.001)中gp73蛋白表达水平均升高,同时组织中的IGF2BP3蛋白表达也升高(P<0.05)。细胞系中转入IGF2BP3的过表达及敲低质粒后,成功过表达IGF2BP3(P<0.001)和敲低(P<0.01),GOLM1的表达也随之上调(P<0.001)和下调(P<0.01)。随后在IGF2BP3敲除鼠的肝纤维化模型的HSC中检测发现gp73表达降低(P<0.01)。结论在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中,由HSC表达的gp73蛋白水平升高,而RNA结合蛋白IGF2BP3是促进其表达的潜在调控因素。
- 马玲玉甄一宁罗云萍段昭君
- 关键词:肝纤维化GP73
- 实时组织弹性成像弹性定量参数与大鼠免疫性肝纤维化肝组织Ⅰ型胶原纤维和Ⅲ型胶原纤维的相关性研究
- 2020年
- 目的通过研究实时组织弹性定量参数与免疫性肝纤维化肝组织的Ⅰ型胶原纤维(ColⅠ)和Ⅲ型胶原纤维(ColⅢ)的相关性研究,从分子水平探讨弹性成像定量参数评价肝纤维化分期的可行性。方法共60只SD大鼠,随机选取52只作为实验组,8只作为对照组。实验组通过尾静脉注射猪血清,对照组注射等剂量0.9%氯化钠注射液。自造模第2周起,每2周从实验组与对照组分别随机取6只和1只大鼠进行实时组织弹性成像(RTE)检查,取得12个弹性定量参数。处死大鼠,取肝右叶组织进行病理检查及应用蛋白质印迹法技术定量检测。结果41只大鼠成功造模;RTE弹性定量参数与ColⅠ及ColⅢ的表达水平具有相关性,其中LF Index相关性最强(r=0.614,P<0.05),MEAN次之(r=-0.556,P<0.05),差异有统计学意义。结论RTE弹性定量参数与ColⅠ、ColⅢ表达水平具有相关性,在一定程度上可以评价肝组织的纤维化程度。
- 郝磊土继政邬晓春王兴华
- 关键词:弹性成像技术
- SHP2在大鼠纤维化肝组织中的动态表达及其与在体肝星状细胞增殖和凋亡的关系
- 目的:探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SH2domain-containing protein tyrosine phosphatase2,SHP2)在四氯化碳(CCI4)诱导的肝纤维化大鼠肝组织中的动态表达及其...
- 张朋垒
- 关键词:肝纤维化肝星状细胞细胞增殖细胞凋亡
- SHP1在大鼠纤维化肝组织中的动态表达及其与在体肝星状细胞活化和增殖的关系
- 目的:探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(src-homology domain2-containing protein tyrosine phosphatase1,SHP1)在四氯化碳(CCI4)诱导的肝纤维化大鼠...
- 靳丽敏
- 关键词:肝星状细胞细胞活化
- 基于CCl_4诱导大鼠纤维化肝组织microRNA差异表达分析加减三甲散改善大鼠肝纤维化的分子机制被引量:1
- 2016年
- 目的:研究加减三甲散对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化大鼠模型microRNAs的影响,从基因水平探索该方抗肝纤维化的分子机制。方法:采用micro RNA高通量测序技术检测正常组、模型组与加减三甲散组肝组织microRNAs表达;取正常较模型组差异miro RNAs与模型组较加减三甲散组差异miro RNAs的交集进行靶基因预测,对靶基因进行GO分析和Pathway分析。结果:正常较模型组、模型组较加减三甲散组差异miro RNAs的交集中,筛选出14个差异micro RNAs;GO分析和Pathway分析提示,差异micro RNAs调控细胞内有机/无机物质的应答,细胞化学平衡、抗凋亡作用、积极的调节蛋白激酶活性、脂肪酸代谢过程等;显著信号转导通路主要包括钙信号通路、PPAR信号通路,Wnt信号通路、MAPK信号通路,凋亡,TGF-β信号通路等。结论:加减三甲散通过调控多个miro RNAs,进而调控多个生物学功能和多个信号转导通路进行抗肝纤维化治疗。
- 刘业方张传涛郭尹玲李白雪王宝家王政舒发明罗雪梅杨宇
- 关键词:微小RNA肝纤维化
- 祛风药对大鼠肝纤维化肝组织病理损伤的影响被引量:1
- 2015年
- 目的:观察祛风药对大鼠肝纤维病理损伤的影响。方法:将SD雄性大鼠80只随机分为正常对照组(8只)与模型组(72只)。模型组用50%CCl4橄榄油溶液皮下注射制造大鼠肝纤维化模型共12周,8周造模成功后,将模型大鼠随机分为祛风药组(防风、羌活、白芷)、下瘀血汤组、秋水仙碱组、病理模型组,继续造模的同时分别给予相关药物干预,观察各组大鼠一般情况变化和肝组织的病理组织学变化。结果:与病理模型组比较,光镜下秋水仙碱组大鼠肝细胞可见假小叶,下瘀血汤组和祛风药组大鼠光镜下可见灶性正常肝细胞索,未见肝假小叶形成,且祛风药组优于下瘀血汤组。电镜下可见秋水仙碱组、祛风药组和下瘀血汤组都能抑制细胞器变性,祛风药组的抑制效果优于秋水仙碱组和下瘀血汤组。结论:祛风药对大鼠肝纤维化有一定的抑制作用,可为临床抗肝纤维化提供新的治疗思路。
- 彭宁静金钊黄文强吕德何利黎敬樱
- 关键词:祛风药病理损伤羌活白芷
- CCl_4诱导大鼠纤维化肝组织microRNA差异表达及其初步分析被引量:2
- 2015年
- 目的探索microRNA在四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠纤维化肝组织中的差异表达及其意义。方法采用microRNA高通量测序分析技术检测对照组(n=10)与模型组(n=10)肝脏组织microRNA表达,对差异microRNA进行靶基因预测,对靶基因进行基因本(GO)分析、pathway分析。结果对照组与模型组间筛选出37个差异microRNA,上调29个,下调8个;从microRNA-基因网络图中发现关键上调为miR-184、miR-10b-5p、miR-199a-3p等;关键下调为miR-200b-3p、miR-199a-5p、miR-125b-5p等。结论模型组microRNA表达谱变化明显,肝纤维化的形成与microRNA调控细胞增殖、凋亡、细胞周期等有关。
- 刘业方张传涛李白雪郭尹玲王宝家唐洪屈王政张凤杨宇
- 关键词:微小RNA肝纤维化四氯化碳
- 大鼠纤维化肝组织匀浆上清液诱导人脐带间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究被引量:7
- 2015年
- 目的探讨大鼠纤维化肝组织匀浆上清液对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)向肝细胞分化的诱导作用。方法取健康SD大鼠(体重180~220 g),采用腹腔注射3%硫代乙酰胺生理盐水溶液(200 mg/kg,2次/周,共4周)方法制备大鼠肝纤维化模型,取造模成功的纤维化肝组织用于制备肝纤维化诱导培养基。取第3代HUCMSCs进行分组培养7 d,对照组以含10%FBS的DMEM/F12培养基培养,实验组以含10%FBS及50 g/L肝纤维化诱导培养基上清的DMEM/F12培养基培养。倒置显微镜下观察两组细胞形态学变化;取培养7 d的对照组及实验组细胞,采用Western blot法检测甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18)、CYP3A4表达情况,采用糖原过碘酸-雪夫(periodic acid-schiff,PAS)染色检测细胞储存糖原的能力,分别采用二乙酰肟比色法及ELISA法测定两组细胞培养液中尿素(blood urea nitrogen,BUN)和白蛋白(albumin,ALB)的含量。结果与对照组长梭形细胞相比,实验组细胞于诱导1 d时即可见到细胞两极回缩,胞体变短;诱导7 d时,细胞呈不规则形或类圆形,胞体丰满。Western blot检测示,对照组细胞未见AFP、CK18、CYP3A4表达;实验组细胞可表达肝细胞特异性标志物AFP、CK18及与代谢功能相关的重要蛋白CYP3A4。对照组上清液中BUN、ALB浓度分别为(0.43±0.07)mmol/L和(8.08±0.41)μg/mL,实验组分别为(2.52±0.20)mmol/L和(41.48±4.11)μg/mL,比较差异均有统计学意义(t=24.160,P=0.000;t=19.810,P=0.000)。PAS染色示,对照组HUCMSCs细胞核呈深蓝色,细胞质呈淡紫色;实验组细胞整个胞体被染成深紫色,细胞核可见。结论大鼠纤维化肝组织匀浆上清液可快速诱导HUCMSCs向肝细胞分化,形成的肝样细胞不仅具备肝细胞表面标志物,同时有肝药酶的表达,并具有储存糖原、合成BUN及分泌ALB的能力,可部分替代肝细
- 闫成薛改吴丽颖刘建芳侯艳宁
- 关键词:人脐带间充质干细胞细胞分化微环境
相关作者
- 刘成海
- 作品数:584被引量:3,895H指数:35
- 供职机构:教育部
- 研究主题:肝纤维化 扶正化瘀方 肝硬化 抗肝纤维化 肝星状细胞
- 张英博
- 作品数:125被引量:439H指数:13
- 供职机构:齐齐哈尔医学院
- 研究主题:阿尔茨海默病 蝙蝠葛碱 海马 小鼠海马 小鼠
- 刘平
- 作品数:712被引量:5,018H指数:41
- 供职机构:上海中医药大学附属曙光医院
- 研究主题:肝纤维化 肝硬化 扶正化瘀方 抗肝纤维化 二甲基亚硝胺
- 杨雁
- 作品数:93被引量:823H指数:18
- 供职机构:安徽医科大学基础医学院
- 研究主题:黄芪总提物 护肝片 肝纤维化 细胞凋亡 肝星状细胞
- 吴义春
- 作品数:47被引量:128H指数:6
- 供职机构:安徽医学高等专科学校
- 研究主题:病理学 组织芯片 护肝片 纤维化肝组织 肝纤维化