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一种细胞生长曲线的绘制方法及绘制系统
本发明提出了一种细胞生长曲线的绘制方法及绘制系统,预设在面积为Y的培养区域内培养细胞并对细胞核进行荧光染色,每个观察时刻在培养区域内随机确定一个观察区域并预设观察区域面积为b,对观察区域内的荧光细胞核进行计数为a,换算获...
邓福林董垚包春平
B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞生长曲线及HSP70表达研究被引量:1
2021年
目的探索B6-Co小鼠与正常C57BL/6小鼠眼睑成纤维细胞增殖能力与HSP70蛋白表达的差异。方法C57BL/6(B6)小鼠按雌雄小鼠2∶1的比例配种获取孕鼠;B6-Co小鼠按B6(雄)×B6-Co(雌)=1∶2或B6(雌)×B6-Co(雄)=2∶1比例配种获得孕鼠,取18.5 d的孕鼠腹中胚胎,再取胚胎眼睑组织培养小鼠眼睑成纤维细胞;用免疫荧光、HE染色鉴定原代细胞、观察成纤维细胞形态。根据血球计数板直接计数法观察两种细胞生长曲线的差异,用Real-time PCR和Western blot检测两种细胞中HSP70的表达量。体外构建HSP70基因siRNA干扰载体,Lipofectamin2000转染B6小鼠眼睑成纤维细胞;Real-time PCR和Western blot实验从mRNA和蛋白水平分别检测HSP70的相对表达量,测定其干扰效率;Transwell实验检测B6小鼠眼睑成纤维细胞的迁移能力。结果小鼠眼睑成纤维细胞生长曲线结果表明,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞增殖速度慢于B6小鼠眼睑成纤维细胞(P<0.01)。B6-Co小鼠成纤维细胞中HSP70表达量远远低于B6小鼠成纤维细胞,具有显著性差异。B6小鼠眼睑成纤维细胞转染HSP70 siRNA干扰载体后,siRNA-HSP70-3干扰效率最强,mRNA和蛋白水平均被有效抑制,干扰效率高达70%(P<0.05);siRNA-HSP70组在迁移能力上亦显著低于对照组(P<0.05)。结论HSP70基因及蛋白表达下调影响B6-Co的成纤维细胞生长曲线,构建的siRNA-HSP70-3干扰载体能够有效抑制B6小鼠眼睑成纤维细胞中HSP70基因的表达,并显著抑制细胞迁移。HSP70可能参与成纤维细胞胚胎期发育的调控,是造成其EOB表型的重要原因之一。
姬桂青邱天景瑾朱顺星邵义祥
关键词:HSP70C57BL/6迁移
人乳腺癌细胞、结肠癌细胞和宫颈癌细胞生长曲线测定被引量:1
2011年
为检测比较人乳腺细胞(MDA-MB-231、MCF-7、HBL-100)、人结肠癌细胞(HCT-8)和人宫颈癌细胞(HeLa)生长曲线的差异性。本实验首先常规培养MDA-MB-231、MCF-7、HBL-100、HCT-8和HeLa细胞,然后应用MTT方法测定这几种细胞生长曲线。在本实验条件下,这几种细胞生长速度从高到低依次为HeLa、MCF-7、HCT-8、MDA-MB-231、HBL-100细胞,并且细胞生长速度一直升高。HeLa、MCF-7、HCT-8、MDA-MB-231和HBL-100都是癌症细胞,但是其生长速度却不相同,不同癌症的发生和发展都存在着一定的差异性,而同为乳腺癌的细胞生长速度也不相同,这可能是与这些细胞在乳腺癌中来源有一定的关系。
李鹏马艳娇宫鹏涛李建华欧阳红生张西臣
关键词:人乳腺癌细胞结肠癌细胞宫颈癌细胞
石墨碳纳米颗粒对体外培养细胞生长曲线及周期的影响
2009年
背景:有报道指出石墨碳纳米颗粒具有强大的吸附能力,只要尽可能将其控制在有效浓度范围内,石墨碳纳米颗粒会具有很好的细胞相容性、增敏效应。目的:观察石墨碳纳米颗粒对体外培养细胞生长增殖、细胞周期及凋亡的影响。设计、时间及地点:细胞-材料学体外实验,于2007-01/2008-12在国家卫生部纳米生物技术重点实验室完成。材料:石墨碳纳米颗粒由中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心自制。人肝细胞(L02)、人肝细胞(Hl7702)、小鼠细胞(3T3)、人肝癌细胞(HepG2)购自湘雅医院中心实验室公司。方法:取石墨碳纳米颗粒母液,稀释10倍后,采用激光粒度分析仪观察石墨碳纳米颗粒的大小及Zeta电位。取含胎牛血清的RPMI-1640培养基,设立11瓶,分别加入适量石墨碳纳米颗粒母液,使其含石墨碳纳米颗粒的浓度分别为100,75,50,25,20,15,12.5,10,7.5,5,0mg/L。将L02细胞、Hl7702细胞、3T3细胞、HepG2细胞密度均调整为1×109L-1,接种后置37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度培养箱中,取处于指数生长期的细胞用于各项指标测定。主要观察指标:MTT比色法测定细胞数量,流式细胞仪检测细胞周期,计算细胞凋亡率。结果:石墨碳纳米颗粒的粒径约20nm,带有负电荷,其电位值为-14.8mV。与未加石墨碳纳米颗粒的空白对照组比较,除人肝癌细胞(HepG2)外,不同浓度的石墨碳纳米颗粒对其余3株细胞增殖均有促进作用,且浓度为7.5mg/L时促细胞增殖作用最强。在石墨碳纳米颗粒浓度为7.5mg/L条件下,4株细胞的凋亡率均明显低于空白对照组。石墨碳纳米颗粒作用24h的L02肝细胞周期发生改变,G0期细胞数减少,更多的细胞进入到S期和G2期。结论:石墨碳纳米颗粒能进入体外培养细胞内,并对细胞生长、增殖产生促进作用,不诱导细胞凋亡,其作用强度与浓度有关。
刘东京张阳德吴季霖刘美洲刘东非潘一峰陈伟刘辉曾庆仁
关键词:人肝癌细胞株细胞周期
医学论文中有关细胞生长曲线的问题辨析
2008年
对文献中一些细胞生长曲线存在的形式或者内容方面的问题进行辨析,并指出其对论文内容客观性和参考价值的影响,希望作者写作和编辑加工时引起注意。
甘可建庄爱华钱朝南
关键词:细胞生长曲线医学论文
XTT比色法测定细胞生长曲线被引量:10
2007年
目的:研究XTT比色法用于细胞生长曲线检测的可行性。方法:采用XTT比色法检测卵巢癌细胞株3AO的细胞生长曲线,并与MTT法相比较。结果:XTT比色法检测获得的3AO细胞生长曲线与应用MTT法获得的细胞生长曲线大致相同,且比MTT法更加快速简便。结论:XTT比色法不仅可替代MTT法用于细胞生长曲线的检测,而且优于MTT法。
吴楠崔恒温凯辉胡春艳李萍
关键词:比色法XTTMTT细胞生长卵巢癌细胞株
基因枪转导K-ras突变反义基因对人胰腺癌细胞生长曲线的影响被引量:1
2007年
目的探讨基因枪转导K-ras突变反义基因对胰腺癌细胞生长的影响。方法利用基因枪技术,将反义基因转导入宿主细胞,通过活细胞计数试剂盒Cell Counting Kit-8和Thermo Multiskan Ascant酶标仪观察K-ras突变特异性反义基因转导后对AsPC-1、MiaPaCa-2和BxPC-3三种人胰腺癌细胞生长曲线变化情况。结果转导K-ras突变特异性反义基因后,突变型AsPC-1和MiaPaCa-2胰腺癌细胞生长曲线明显向右下移动。结论转导K-ras突变特异性反义基因后,具有突变型K-ras基因的胰腺癌细胞系的生长都受到明显抑制。
李晓冬马毓梅蔡建辉张峰
关键词:胰腺癌基因枪基因治疗反义基因
重组人DNMT1真核表达质粒对胆管癌细胞DNMT1基因mRNA水平及细胞生长曲线的影响被引量:7
2006年
目的观察重组人 DNMT1真核表达质粒转染对胆管癌细胞 DNMT1基因 mRNA 表达水平和细胞生长曲线的影响。方法将构建好的正义和反义 DNMT1真核表达质粒用脂质体转染入人胆管癌细胞株 QBC-939,然后用 G418进行筛选,得到阳性克隆细胞株后,用半定量 RT-PCR 检测 DN-MT1基因的 mRNA 水平的变化,用 MTT 法观察细胞生长曲线。结果正义 DNMT1真核表达质粒能使 QBC-939细胞中的 DNMT1基因的 mRNA 水平增加,而反义 DNMT1真核表达质粒则使其 mRNA水乎降低;正义质粒可使 QBC-939细胞增殖速度加快,反义质粒使其增殖速度减慢。结论重组人DNMT1真核表达质粒转染能影响胆管癌细胞 DNMT1基因的 mRNA 表达水平和细胞生长曲线
左石汤聪徐立宁邹声泉
关键词:DNMT1表达质粒细胞生长曲线
丁酸钠对结肠癌细胞生长曲线细胞周期的影响被引量:1
2005年
采用M TT试验比较了不同浓度的丁酸钠干预后,结肠癌HT-29细胞和结肠癌Lovo细胞生长曲线变化,并采用流式细胞术研究了丁酸钠对结肠癌细胞周期的影响。结果与对照组相比,1.25mm o l/L浓度组在各观察时间点均未显示出对Lovo细胞的抑制;2.5mm o l/L以上浓度(2.5、5、10mm o l/L)在各观察点显示出明显的生长抑制作用,各组之间差异有显著性(P<0.01);随着丁酸钠浓度的升高,越来越多的HT-29细胞被阻滞在G0/G1期,越来越多的Lovo细胞处于G2/M期。证实丁酸钠对肿瘤细胞增殖的抑制作用具有浓度、时间依赖性,这种作用是通过G2/M期或G0/G1期阻滞实现的。
黄丽华刘成霞张孝卫王兵李铁军张静张尚忠
关键词:LOVO细胞HT-29细胞流式细胞术丁酸钠细胞周期
应用噻唑蓝比色法进行大肠癌与胆囊癌细胞生长曲线的对比测定被引量:8
2005年
目的探索大肠癌及胆囊癌细胞株的最佳体外药敏实验条件。方法应用MTT比色测定法进行细胞生长曲线的测定,以了解两种细胞的对数生长期(最佳实验干预期)、最佳培养接种浓度等。结果分裂增殖快的大肠癌174细胞株可选用630nm波长进行吸光度测定,分裂增殖慢的胆囊癌细胞株450nm波长更优。结论大肠癌174细胞株的最佳细胞接种浓度为1.5~5.0×104/ml,对数生长期为接种后的3~5天;胆囊癌细胞株的最佳细胞接种浓度为1.4~2.6×104/ml,对数生长期为接种后的4~7天。
王建华张涛纪宗正贡桑明久王小强张小燕
关键词:大肠癌胆囊癌

相关作者

梅丽娟
作品数:290被引量:625H指数:13
供职机构:中国科学院西北高原生物研究所
研究主题:黑果枸杞 黄绿蜜环菌 洗脱 藏药 硅胶柱层析
王启兰
作品数:201被引量:1,438H指数:26
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党军
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