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一种抗胃肠道酶降解的高Fe<Sup>2+</Sup>结合活性肽及其应用
本发明公开了一种抗胃肠道酶降解的高Fe<Sup>2+</Sup>结合活性肽及其应用,涉及生物技术领域。本发明通过对GL‑Hyp‑GPSGEEGKR肽链中特定氨基酸进行精准磷酸化,同时对肽链中关键位点进行特异性叶酸修饰,获...
林善婷胡晓李振兴李来好陈胜军
一种检测双特异性抗体结合活性的方法及试剂盒
本申请公开了一种检测双特异性抗体结合活性的方法及试剂盒。本申请检测双特异性抗体结合活性的方法,包括将与待测双特异性抗体结合的第一抗原固定在固体介质上,将待测双特异性抗体与第一抗原结合,将带有组氨酸标记的与待测双特异性抗体...
靳翠翠吴三星苏吾娇何宇君
具有TrkB结合活性的肽复合物
[本发明的解决课题]提供一种具有TrkB结合活性的新的化合物。[本发明的解决方案]一种具有TrkB结合活性的肽复合物,其包括第一肽,所述第一肽是具有以X<Sup>1</Sup>-X<Sup>2</Sup>-X<Sup>3...
铃木芳典柴田宪宏
胰腺多肽纳米抗体的制备及结合活性分析
2024年
胰腺多肽(pancreatic polypeptide,PP)是一种含36个氨基酸的胰腺激素,在评估胰腺功能和辅助诊断相关疾病中发挥重要作用。以PP为靶点,筛选特异性的PP纳米抗体,评估其与PP抗原是否具有结合活性。利用原核表达系统制备了高纯度的PP抗原,经免疫羊驼后构建了高库容和高丰度的胰腺多肽免疫的纳米抗体噬菌体文库,并通过噬菌体展示技术进行文库筛选,获得8株胰腺多肽纳米抗体。选取1株纳米抗体(PP-VHH)构建原核表达体系,经IPTG诱导表达、纯化与鉴定,通过间接ELISA和双抗夹心ELISA分别检测和评价抗原抗体的结合活性和血清中PP含量,结果显示,PP-VHH与PP具有结合活性,且PP-VHH可用于检测鸡和人血清中的PP。建立的双抗夹心ELISA法拟合曲线R^(2)为0.9868,可检测不同个体鸡血清中PP浓度为48~55 pg/mL。而人血清中PP浓度范围波动较大。综上所述,本研究筛选到的1株纳米抗体PP-VHH,可用于检测鸡和人血清中的PP含量,为评估胰腺功能异常或诊断相关疾病提供基础。
任泓睿贾琼王家庆田婧婧李荣杰郝花花李建丽渠志灿范瑞文
关键词:原核表达结合活性
痘苗病毒蛋白D8纳米抗体的原核表达及结合活性分析
2024年
利用SUMO标签制备痘苗病毒(vaccinia virus,VACV)蛋白D8的纳米抗体,并分析其与抗原是否具有结合活性。设计并合成序列,构建原核表达质粒pKMD-SUMO-D8,将其转化大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3)感受态细胞并诱导表达;纯化带有His标签和SUMO标签的抗体Anti-SUMO-D8,之后利用SUMO蛋白酶切除His标签和SUMO标签,进一步获得Anti-D8;最后,应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)及间接免疫荧光试验(IFA)对其结合活性进行检测并分析。结果显示,成功构建了原核表达质粒pKMD-SUMO-D8和重组菌株,在30℃条件下,终浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导表达菌株4 h时,Anti-SUMO-D8表达量最佳;获得了高纯度的Anti-SUMO-D8和Anti-D8纳米抗体;间接ELISA结果显示,Anti-SUMO-D8和Anti-D8与抗原均具有结合活性;在相同条件下,Anti-D8与VACV及E8L的结合活性高于Anti-SUMO-D8。间接IFA结果显示,VACV侵染48 h后,试验组部分细胞核在荧光显微镜下可见绿色荧光。利用SUMO标签可高效制备VACV蛋白D8的纳米抗体,且制备的纳米抗体具有一定的结合活性。本研究结果为纳米抗体的制备提供了新思路,也为深入研究VACV蛋白D8纳米抗体的生物学功能奠定了基础。
田婧婧杨晓岚李涛王慧范瑞文
关键词:痘苗病毒SUMO结合活性
拟南芥CaM5的不同剪接产物对其蛋白质结合活性的影响
2024年
钙离子(Ca^(2+))/钙调素(calmodulin, CaM)信号参与植物生长发育和对外界刺激响应的调节。拟南芥(Arabidopsis thaliana)CaM家族共有7个基因,编码的蛋白质氨基酸序列具有高度保守性。该研究通过酵母双杂交及生物信息学分析等方法,对CaM5的2个剪接体CaM5.1和CaM5.3进行蛋白结合活性分析。结果表明,拟南芥钙调素结合蛋白(calmodulin-binding protein,CaMBP)IQM3(IQ motif-containing protein 3)能在酵母中与除CaM5.3外的CaM家族的成员结合。生物信息学分析表明,CaM5.3比CaM5.1和其他CaM亚型成员多出1个由35个氨基酸残基组成的C-末端序列(C-terminal domain,CTD),可能影响CaM5.3与IQM3结合。在CaM5.1的C-末端添加CML10的CTD,将重组蛋白与IQM3进行结合,证实CaM5.3的CTD是影响其与IQM3结合的关键序列。因此,拟南芥CaM5的不同剪接方式影响其蛋白结合活性,为研究钙调素及钙调素结合蛋白的结合活性提供参考。
李树强余洁雨王韫慧吕天晓范甜周玉萍田长恩
关键词:钙调素
具有人鼠交叉结合活性的抗IL-1R3抗体的筛选与鉴定
2024年
目的:IL-1受体辅助蛋白(IL-1R3)是炎症调控的潜在新靶点。筛选获得具有人鼠交叉结合活性的抗IL-1R3抗体,为炎症干预机制探究与新药开发奠定基础。方法:基于对人源和鼠源IL-1R3氨基酸序列与结构的比对,采用交替包被人源和鼠源IL-1R3的策略对噬菌体抗体库进行筛选;将获得的抗体可变区基因克隆到真核表达载体,制备抗体样品;在分子和细胞水平对候选抗体的结合活性与功能活性进行评价;采用重新配对抗体轻链与重链的策略获得新抗体,尝试改善其特性。结果:筛选获得5个具有人鼠交叉结合活性的抗IL-1R3抗体,其中4个对人源和鼠源IL-1R3的亲和力相当,均在10^(-7)mol/L水平;2个溶解度较好的抗体在细胞水平上具有阻断活性;重新配对候选抗体的轻链与重链,获得1个溶解度明显提升且结合活性有所改善的新抗体。结论:优选获得2个具有人鼠交叉结合活性的抗IL-1R3抗体AET1907和4H6L,为后续深入探索奠定了物质基础。
秦慧郁心蕊刘娇古丽赛娜·恰尔谢崔靖敏王茜杜鹏周春阳
关键词:抗体噬菌体展示抗体库
脂肪酸修饰胰岛素与白蛋白结合活性的研究
2024年
文章对胰岛素-白蛋白体外结合活性测定方法进行研究,以判定自制长效胰岛素TQ05849与原研药物的相似性,同时探索脂肪酸链在该结合过程中的作用。通过活性琼脂糖基质固定化白蛋白体外结合长效胰岛素、SPR亲和力及结合/解离动力学测定两种方法对结合率进行测定,并设置长效胰岛素前体为阴性对照组,考察脂肪酸链在长效胰岛素与白蛋白结合过程中发挥的作用。通过固定化白蛋白体外结合长效胰岛素的方法测得TQ05849及原研制剂的体外白蛋白结合率分别为86.52%及86.71%,通过SPR亲和力及结合/解离动力学测定法测得TQ05849及原研制剂体外白蛋白亲和力R_(max)值分别为332及346 RU,KD值分别为124.8及122.4μmol/L,均基本一致,且结合/解离动力学图谱无显著差异。两种方法中阴性对照组长效胰岛素前体与白蛋白基本无结合,自制长效胰岛素TQ05849与原研制剂体外白蛋白结合活性相似,脂肪酸链在长效胰岛素与白蛋白体外结合过程中起主要作用。
胡宏飞徐同杰魏莹张甜甜秦宇
关键词:长效胰岛素白蛋白表面等离子共振脂肪酸
洗涤剂组合物中包含碳水化合物结合活性的多肽及其在减少纺织品或织物中的褶皱的用途
披露了具有碳水化合物结合特性的多肽例如CBM用于在洗衣中减少褶皱的用途。还披露了包含CBM的洗涤剂组合物。
L.鲍恩斯加德K.詹森M.D.莫兰特
多肽与受体结合活性预测模型的训练方法、装置及设备
本发明涉及生物医药技术领域,公开了一种多肽与受体结合活性预测模型的训练方法、装置及设备,该方法包括:获取第一样本多肽序列和第一样本受体序列;针对每一对第一样本多肽序列和第一样本受体序列,获取对应的第一序列信息对、第一结构...
宋更申赵化建

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靳彦文
作品数:77被引量:99H指数:6
供职机构:安徽大学
研究主题:抗体 人源化抗体 肿瘤细胞生长 结合活性 编码基因
戴维·威孚
作品数:26被引量:0H指数:0
供职机构:军事医学科学院生物工程研究所
研究主题:抗体 人源化抗体 肿瘤细胞生长 结合活性 编码基因
曹诚
作品数:245被引量:488H指数:11
供职机构:安徽大学
研究主题:抗体 人源化抗体 编码基因 肿瘤细胞生长 抗原
米歇尔·瑞奇韦兹
作品数:24被引量:0H指数:0
供职机构:军事医学科学院生物工程研究所
研究主题:抗体 肿瘤细胞生长 人源化抗体 编码基因 结合活性
蒋华良
作品数:541被引量:656H指数:13
供职机构:中国科学院上海药物研究所
研究主题:药物组合物 化合物 类化合物 药物设计 疾病