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肺炎衣原体特异性抗原多肽的制备方法
本发明公开了肺炎衣原体特异性抗原多肽的制备方法,通过肺炎衣原体蛋白酶样活性因子CPAF(1-250)特异性抗原多肽,含该多肽的融合蛋白,其编码DNA,携带该DNA的重组载体,含该重组载体的转化子,产生抗体的方法,检测...
易银沙曹蓬荣刘彩云
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梅州地区儿童社区获得性肺炎肺炎衣原体的流行特征被引量:2
2015年
目的分析梅州地区儿童社区获得性肺炎肺炎衣原体感染的流行情况。方法对2013年2月~2014年1月梅州地区社区获得性肺炎患儿均留取咽拭子和血清标本;采用巢氏PCR法检测患儿咽拭子标本中的Cpn主要外膜蛋白基因片段;采用ELISA检测患儿血清中Cpn-Ig M;以上两项检验中一项为阳性即确认为Cpn感染阳性样本。结果 986例患儿中确认为Cpn感染的有143例,阳性率为14.5%;〉6岁组感染率最高为28.12%,并与其它组差异有统计学意义;四季均可发病,冬季感染率最高为20.80%,与其它季组差异有统计学意义(P〈0.05);巢氏PCR法检出率高于ELISA检测Cpn-Ig M法,但两者一致率较高,差异实际意义不大。结论梅州地区儿童社区获得性肺炎肺炎衣原体感染好发于冬春季节,感染率男女患儿之间无显著差异,随着年龄的增加,感染率随之增高。
肖光文曾令斌谢彦鹏乔亚峰
关键词:肺炎儿童社区获得性肺炎肺炎嗜衣原体
肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0147诱导单核细胞分泌TNF-α和IL-8
2015年
目的:探讨肺炎衣原体( Cpn)包涵体膜蛋白Cpn0147诱导人单核细胞分泌炎症因子的分子机制。方法用去除内毒素活性的不同浓度Cpn0147重组蛋白(1.0、10.0、30.0和50.0μg/mL)刺激THP-1细胞0~48 h,ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-8(IL-8)的分泌水平;实时定量PCR检测TNF-α和IL-8 mRNA的表达;用Toll样受体2( TLR2)和TLR4中和抗体处理THP-1细胞,或采用 TLR2和 TLR4 siRNA沉默其表达, ELISA检测THP-1处理前后TNF-α和IL-8分泌的变化。结果 Cpn0147可诱导THP-1细胞表达TNF-α和IL-8的mRNA和蛋白;同时,不同时间点Cpn0147对TNF-α和IL-8的诱导水平有所不同,Cpn0147作用2~6 h后即可诱导TNF-α和IL-8分泌,12 h时达到峰值,随后逐渐下降。采用TLR2和TLR4中和抗体封闭THP-1细胞后,TNF-α和IL-8分泌水平明显减少,采用TLR2和TLR4 siRNA干扰其表达后,TNF-α和IL-8的分泌也得到了类似的结果。结论 Cpn0147可能通过TLR2和TLR4介导TNF-α和IL-8分泌。
吴华卿文衡刘军张黎黎
关键词:肺炎嗜衣原体TOLL样受体2白介素-8
肺炎衣原体特异性抗原多肽的制备方法
本发明公开了肺炎衣原体特异性抗原多肽的制备方法,通过肺炎衣原体蛋白酶样活性因子CPAF(1-250)特异性抗原多肽,含该多肽的融合蛋白,其编码DNA,携带该DNA的重组载体,含该重组载体的转化子,产生抗体的方法,检测...
易银沙曹蓬荣刘彩云
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肺炎衣原体AlphaLISA检测方法研究
本研究旨在前期肺炎肺炎衣原体流行病学研究的基础上,进一步深入分析肺炎衣原体外膜主蛋白的抗原表位分布,通过基因工程方法表达、纯化特异性重组抗原,免疫动物,制备多克隆抗体和单克隆抗体,建立特异性强、灵敏度高的肺炎衣原体...
张存亮
关键词:衣原体单克隆抗体肺炎
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肺炎衣原体MOMP基因的克隆与原核表达
2014年
克隆了肺炎衣原体外膜主蛋白(major out membrane protein,MOMP)基因,并进行了原核表达。根据GenBank公布的肺炎衣原体MOMP基因序列,设计克隆引物后用普通PCR方法扩增出肺炎衣原体MOMP基因的完整片段,将其克隆到pMD-19T后进行测序,经序列比对正确后将此片段亚克隆到表达载体pET-32a(+)中,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达,再采用SDS-PAGE和Western-Blot检测重组蛋白的表达情况。结果表明:本研究克隆了肺炎衣原体MOMP基因并在原核系统中成功表达了MOMP重组蛋白,且WesternBlot显示该重组蛋白具有免疫学活性。
张存亮聂福平王昱杨俊李应国蔡家利
关键词:肺炎嗜衣原体克隆原核表达
慢性支气管炎患者血清中肺炎衣原体感染的血清学检测及临床意义
2013年
肺炎衣原体(Chlamydophila pneumonia,CPN)是于1989年确定的一种严格真核细胞内寄生的原核细胞型微生物,是引起社区获得性肺炎、咽炎、鼻窦炎、支气管炎以及慢性支气管炎(chronic bronchitis,CHB)急性发作的一个常见病原体,而且CPN还与动脉硬化、冠心病、心肌梗死甚至心脑血管疾病的发生密切有关。
马红梅代敏
关键词:支气管炎患者肺炎嗜衣原体慢性支气管炎血清学检测衣原体感染PNEUMONIA
肺炎衣原体热休克蛋白10促炎症作用及其机制的初步研究被引量:2
2013年
目的探讨肺炎衣原体(Chlamydophila pneumoniae,Cpn)热休克蛋白(heat shock protein,HSP)10(CHSP10)诱导人单核细胞分泌炎症因子的作用及Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2、TLR4与此作用的相关性。方法以去内毒素活性的不同质量浓度CHSP10(0.5、1、5、10、20、30μg/ml)刺激THP-1细胞0、6、12、24、36、48、60 h,检测蛋白未处理组、加热处理组、去蛋白处理组中IL-1β及IL-6水平;用CHSP10刺激C3H系野生型(C3H/HeN)和TLR4缺陷型(C3H/HeJ)小鼠腹腔巨噬细胞,分别检测IL-1β及IL-6水平;用CHSP10刺激被抗TLR2/TLR4抗体处理的THP-1细胞,检测IL-1β、IL-6的变化。结果 CHSP10可诱导THP-1细胞产生炎症因子IL-1β、IL-6;CHSP10诱生C3H系野生型小鼠细胞分泌的炎症因子明显高于TLR4缺陷型小鼠细胞;用TLR2和/或TLR4抗体封闭后,CHSP10诱生的IL-1β、IL-6不同程度减少。结论 CHSP10可能作为炎症相关蛋白参与了Cpn对宿主细胞的致炎作用;并且TLR2及TLR4在该炎症刺激信号的传递过程中发挥一定的作用。
周洲陈丽丽刘良专李忠玉游晓星陈曦吴移谋
关键词:衣原体炎症反应白细胞介素
老年慢性支气管炎患者肺炎衣原体感染的检测诊断150例分析被引量:9
2013年
[目的]探讨老年慢性支气管炎(chronic bronchitis,CB)患者血清中肺炎衣原体(chlamydophila pneumonia,CPN)感染的检测方法及其临床意义。[方法]75例老年CB患者为实验组,75例健康老年志愿者为对照组;分别采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测研究对象的肺炎衣原体IgG(chlamydophila pneumonia-IgG,CPN-IgG)和主要外膜蛋白(major outer membmne protein,MOMP):CPN MOMP也称为外膜蛋白A(存在于Cpn原体和网状体,主要包括MOMP)。实验组与对照组均用了上述两种方法。[结果]实验组CPN MOMP阳性、CPN-IgG阳性的构成比分别为64.0%和89.3%,均明显高于对照组的12.0%、25.3%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结果显示,PCR和ELISA两种检测方法均能反映发生肺炎衣原体感染。[结论]ELISA和PCR法均可对CPN进行检测,两种方法同时运用能提高老年CB的临床诊断率,降低假阴性的发生,利于改善预后。
潘小成
关键词:CB老年CPN预后
肺炎衣原体的一种重组主要外膜蛋白及其制备方法
本发明公开了肺炎衣原体的一种重组主要外膜蛋白及其编码基因与制备方法。本发明所提供的肺炎衣原体重组主要外膜蛋白,是具有序列表中序列2氨基酸残基序列的蛋白质,或者是将序列2的氨基酸或者是将序列2的氨基酸残基序列经过一个或...
端青李岩伟朱虹宋立华何君檀华左庭婷
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吴移谋
作品数:415被引量:1,610H指数:18
供职机构:南华大学
研究主题:梅毒螺旋体 衣原体 沙眼衣原体 肺炎嗜衣原体 重组蛋白
周洲
作品数:68被引量:164H指数:7
供职机构:南华大学医学院病原生物学研究所
研究主题:沙眼衣原体 衣原体 肺炎嗜衣原体 THP-1 肺炎衣原体
刘良专
作品数:59被引量:152H指数:5
供职机构:南华大学
研究主题:肺炎嗜衣原体 THP-1 沙眼衣原体 脂肽 支原体
陈丽丽
作品数:87被引量:231H指数:8
供职机构:南华大学公共卫生学院
研究主题:衣原体 沙眼衣原体 肺炎嗜衣原体 鹦鹉热衣原体 泌尿生殖道感染
陈虹亮
作品数:65被引量:183H指数:8
供职机构:郴州市第一人民医院
研究主题:肺炎嗜衣原体 小鼠 解脲脲原体 衣原体 疫苗免疫