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用高分辨率质谱法量化胰岛素生长因子-I和胰岛素生长因子-II
提供了使用高分辨率/高准确度质谱法测定品中IGF‑I和/或IGF‑II蛋白的量的方法。所述方法一般包括使品中的IGF‑I和/或IGF‑II蛋白富集,电离来自所述品的IGF‑I和/或IGF‑II蛋白以产生IGF‑I和...
C·拜尔斯特姆S·胜N·J·克拉克R·瑞茨
文献传递
哲罗鱼胰岛素生长因子-II的原核表达与活性分析被引量:4
2015年
在鱼类胚胎发育过程中,胰岛素生长因子-II(insulin-like growth factors-II,IGF-II)起着关键的作用。本研究根据Gen Bank收录的鲑鳟鱼IGF-II基因序列设计引物,以哲罗鱼(Hucho taimen)肝RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出哲罗鱼IGF-II基因开放阅读框。将目的基因IGF-II与原核表达载体p SUMO连接构建出重组表达载体p SUMO-IGF。将该重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示,约在40 k D处含有清晰的条带,与预期结果相符;目的蛋白以包涵体形式存在。对包涵体进行变性/复性后获得较纯的目的蛋白,利用ELISA和MTT方法对目的蛋白进行免疫学活性及生物学活性分析。ELISA结果显示该目的蛋白能够与商品化的抗鲑鳟鱼IGF-II的抗体发生特异性反应,并且呈现抗原浓度依赖性,该结果说明本研究获得了具有良好免疫原性的IGF-II蛋白;MTT方法测定IGF-II蛋白对鲤(Cyprinus carpio)上皮细胞(epitheliaoma papulosum cyprini,EPC)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)性腺细胞(rainbow trout gonad,RTG-2)的增殖效果来鉴定IGF-II蛋白的生物学活性,结果显示所表达的哲罗鱼IGF-II蛋白能够有效的刺激EPC细胞和RTG-2细胞增殖。该结果表明利用原核表达系统获得的哲罗鱼IGF-II蛋白具有良好的生物学活性。本研究为哲罗鱼的生长模式和生长繁殖的研究奠定了基础。
吴秀梅徐黎明赵景壮刘淼曹永生卢彤岩尹家胜
关键词:胰岛素样生长因子-II哲罗鱼生物活性MTT
用高分辨率质谱法量化胰岛素生长因子-I和胰岛素生长因子-II
提供了使用高分辨率/高准确度质谱法测定品中IGF-I和/或IGF-II蛋白的量的方法。所述方法一般包括使品中的IGF-I和/或IGF-II蛋白富集,电离来自所述品的IGF-I和/或IGF-II蛋白以产生IGF-I和...
C·拜尔斯特姆S·胜N·J·克拉克R·瑞茨
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用高分辨率质谱法量化胰岛素生长因子-I和胰岛素生长因子-II
提供了使用高分辨率/高准确度质谱法测定品中IGF-I和/或IGF-II蛋白的量的方法。所述方法一般包括使品中的IGF-I和/或IGF-II蛋白富集,电离来自所述品的IGF-I和/或IGF-II蛋白以产生IGF-I和...
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乙型肝炎病毒X蛋白通过诱导P3启动子低甲基化促进胰岛素生长因子-II基因表达被引量:2
2014年
目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对胰岛素生长因子-II(IGF—II)基因P3启动子驱动的mRNA表达的影响及其表观遗传机制。方法分别采用定量RT-PCR和亚硫酸氢盐测序法检测HBV感染阳性和阴性肝癌组织中P3mRNA、HBxmRNA表达水平及P3启动子甲基化状态;进一步分析稳定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx及其对照细胞株HepG2-control中P3mRNA表达水平及P3启动子甲基化状态;最后,将体外甲基化的IGF—II基因P3启动子驱动的荧光酶报告载体pGL3-P3及携带HBx基因的pCMV-tag2B—X质粒共转染HepG2细胞,采用亚硫酸氢盐测序法及双萤光酶试验检测HBx蛋白对P3启动子转录活性和甲基化状态的影响。计数资料采用x^2或Fisher精确检验,计量资料采用独立本f检验或Mann-WhitneyU检验,线性相关分析采用Pearson相关系数评价。结果(1)HBV感染阳性的肝癌组织中P3mRNA表达水平(△cT为-9.59±3.22)明显高于HBV阴性的肝癌组织(△cT为-12.97±3.08),P=0.006;而P3启动子17个cpG位点的平均甲基化水平(36.9%土15.5%)明显低于HBV阴性的肝癌组织(52.1%±19.1%),P:0.025;P3mRNA丰度与HBxmRNA表达水平呈正相关,而与P3启动子甲基化水平呈负相关。(2)在HepG2-HBx及其对照细胞中,也显示了类似的P3mRNA表达水平及P3启动子甲基化水平变化。(3)体外转染的HBx蛋白显著降低了P3启动子甲基化水平,提高了其转录活性。结论HBx蛋白可能通过降低P3启动子甲基化水平促进肝细胞癌IGF—II基因表达,本结果为充分理解HBx蛋白介导的肝细胞癌发病机制提供了新的信息。
汤绍辉张少华张小娟吴胜兰李俊峰江向武周鸿科罗羽宏曹明溶
关键词:胰岛素样生长因子II低甲基化
用高分辨率质谱法量化胰岛素生长因子-I和胰岛素生长因子-II
提供了使用高分辨率/高准确度质谱法测定品中IGF-I和/或IGF-II蛋白的量的方法。所述方法一般包括使品中的IGF-I和/或IGF-II蛋白富集,电离来自所述品的IGF-I和/或IGF-II蛋白以产生IGF-I和...
C·拜尔斯特姆S·胜N·J·克拉克R·瑞茨
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肝癌组织乙型肝炎病毒复制转化生长因子-β1和胰岛素生长因子-II表达的关系分析
目的 分析肝癌组织。HBV复制与转化生长因子(TGF)-β 1和胰岛素生长因子(IGF)-II表达间的关系。方法以自身对照法收集人HCC组织及非癌组织,以生物标记的HBV-DNA探针检测肝癌组织中HBV—DNA ;采...
吴玮姚登福严晓娣陈洁蔚丹丹
关键词:IGF-II
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肝癌组织乙型肝炎病毒复制转化生长因子-β1和胰岛素生长因子-II表达的关系分析
目的 分析肝癌组织。HBV复制与转化生长因子(TGF)-β 1和胰岛素生长因子(IGF)-II表达间的关系。方法以自身对照法收集人HCC组织及非癌组织,以生物标记的HBV-DNA探针检测肝癌组织中HBV—DNA ;采...
关键词:IGF-II
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胰岛素生长因子-II及基质金属蛋白酶-9与早期自然流产的相关性研究
目的: 初步探讨胰岛素生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在正常早孕绒毛发育过程中及早期自然流产发生机制中的作用,以及两者的相关性。 方法: 选择2011年3月至2011年10月因计划生育因自...
张旭东
关键词:基质金属蛋白酶-9自然流产实时荧光定量免疫组织化学染色
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子痫前期患者胎盘组织中胰岛素生长因子-II与肿瘤转移抑制基因-1蛋白和mRNA的表达水平及意义
研究背景: 子痫前期属妊娠期高血压疾病范畴,其发病机制尚未完全阐明,其病因学始终是产科领域的研究热点。正常妊娠绒毛外滋养细胞(extravillous trophoblast,EVT)侵入子宫蜕膜、肌层内1/3(间质浸润...
李利玲
关键词:子痫前期胎盘滋养细胞浸润胰岛素样生长因子-II逆转录聚合酶链反应
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相关作者

宋俊芬
作品数:45被引量:81H指数:5
供职机构:河北医科大学第四医院
研究主题:卵巢肿瘤 卵巢上皮性癌 卵巢癌 卵巢上皮性 P53
王利红
作品数:39被引量:165H指数:7
供职机构:山东大学
研究主题:二至天癸颗粒 卵细胞质量 冷冻保存 胚胎发育 体外受精-胚胎移植周期
王伟萍
作品数:6被引量:35H指数:4
供职机构:北京市普仁医院
研究主题:表达及意义 卵巢上皮性 肿瘤组织 明胶酶A 明胶酶
单保恩
作品数:986被引量:3,371H指数:25
供职机构:河北省肿瘤研究所
研究主题:食管癌 抗肿瘤作用 乳腺癌 细胞凋亡 抗肿瘤
杜晓岩
作品数:56被引量:143H指数:7
供职机构:佳木斯大学附属第二医院
研究主题:骨髓间充质干细胞 修复骨缺损 骨碎补 成骨分化 重睑术