目的 在河北省传染病病原鉴定分析与流行病学重点实验室建立肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Spn)脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis, PFGE)分型方法,为河北省肺炎链球菌引起的相关疾病的流行病学监测与调查提供可靠的技术支撑。方法 参照美国PulseNet手册标准方法和《国家致病菌识别网技术手册》,在河北省传染病病原鉴定分析与流行病学重点实验室进行肺炎链球菌PFGE分型实验,同时对缓冲液种类、限制性核酸内切酶浓度、酶切时间和电泳条件进行优化。结果 利用优化后的条件对收集到的肺炎链球菌菌株进行PFGE分型分析,所得到的酶切电泳图谱条带清晰,分辨率高。结论 河北省传染病病原鉴定分析与流行病学重点实验室建立和优化了肺炎链球菌PFGE分型分析方法,今后可用于肺炎链球菌的分子特征分析。
目的了解不同来源金黄色葡萄球菌(AS)携带葡萄球菌肠毒素(SE)基因种类与同源性,为防控AS性食物中毒提供依据。方法AS分离、鉴定和确认采用GB/T 4789.10方法;9种SE测定采用PCR法;PFGE分型采用CDC Pulse Net USA方法;药敏试验采用ABTGP-67卡法。结果63株AS检出9个SE基因型。中毒组检出a、b、d、e、h和j型6个SE;食品和院感组检出除d型外的8个SE基因,以b型检出最多,达74.60%。PFGE分型中毒组AS(包括食品分离株)其条带100%相同,食品和院感组分为12个PFGE型,有8株AS的PFGE带型与中毒组的带型相同。3种来源AS对青霉素G抗生素均有较高的耐药性。中毒组AS仅对青霉素G耐药;食品和院感组对7种抗生素耐药率超过50%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分别为12.00%和42.31%,以院感株耐药性最强,其次为食品株和中毒株。结论SE和PFGE对AS食物中毒病因关联性追踪有重要的意义,能快速查明食物中毒原因,提高食物中毒调查的查明率。
目的了解红河州2011~2018年食品中沙门氏菌血清型分布及分子分型特征,初步建立沙门氏菌脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分型的数据库。方法使用全自动微生物鉴定系统对收集的49株沙门氏菌进行鉴定,依据沙门氏菌White-Kauffmann-LeMinor抗原表用沙门氏菌属诊断血清确定血清型,参照国家食源性疾病分子溯源网络(TraNet)的沙门氏菌P F G E分子分型法进行基因分型,用Bi〇mimeriCS(7.6)软件聚类分析。结果49株沙门氏菌属于B、C、D、E和G群5个群25个血清型;伦敦沙门氏菌是主要血清型,占24.5%(12/49);49株沙门氏菌分成了42个PFGE带型(P001-P042),其中P038型包含8株菌,其余各型分别只包含1株菌。结论红河州食品中沙门氏菌具有不同血清型及PFGE型别,相同血清型菌株PFGE型别聚集成簇。
目的 比较研究四川省鸭和猪源鼠伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分型与耐药特征,为分析鼠伤寒沙门菌食品来源提供支持。方法 将鸭和猪源监测中分离的47株鼠伤寒沙门菌进行PFGE分型,并采用最小抑菌浓度法测定9种药物敏感性。结果 鸭和猪源中分离的鼠伤寒沙门菌在PFGE分型和耐药上存在差异。鸭源菌株聚集于簇I,而猪源菌株聚集于簇II。簇II菌株对氨苄西林、环丙沙星、氯霉素、庆大霉素、四环素、复方新诺明6种药物的耐药率高于簇I菌株。不同的PFGE分型鼠伤寒沙门菌在监测地区和耐药谱存在差异。SCSTm-10型菌株均分离于绵阳地区,SCSTm-11型主要分离于资阳地区。SCSTm-10型菌株对复方新诺明和环丙沙星的耐药率高于SCSTm-11型菌株。结论 PFGE分型可以获取四川省鼠伤寒沙门菌分离来源、分离地点和耐药的聚类信息,为鼠伤寒沙门菌食物中毒提供流行病学调查支持。
