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OTUD7A在人胶质瘤中的表达变化及其对人胶质瘤细胞U251功能影响的研究
周晓彤
TIM-3在人胶质瘤中的表达及其对人胶质瘤细胞U251凋亡与侵袭的作用研究
2023年
目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(TIM-3)在人胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞U251凋亡与侵袭的影响。方法收集2018年3月—2019年3月在我院进行手术切除的30例胶质瘤患者术后的组织和旁正常组织,免疫组化检测胶质瘤组织中TIM-3的表达情况。将胶质瘤U251细胞分为正常组、对照组、实验组:正常组细胞常规培养,不做任何处理;对照组和实验组细胞分别转染TIM-3-siRNA-NC和TIM-3-siRNA。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞中TIM-3 mRNA的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测各组细胞的增殖活力,流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,Transwell小室检测各组细胞的侵袭能力。结果TIM-3的表达主要定位在胞质中。TIM-3在Ⅰ级和Ⅱ级胶质瘤组织中的阳性表达率为(48.37±4.68)%,在Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤组织中的阳性表达率为(87.94±6.41)%,与正常组织中的阳性表达率[(12.34±4.92)%]相比,差异均有统计学意义(t=24.87,P<0.05)。与正常组细胞相比,实验组细胞中TIM-3的表达水平、细胞的增殖和侵袭能力均明显下降,凋亡率明显上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TIM-3在胶质瘤中呈高表达,沉默其表达能明显抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭,并促进其凋亡。
赵强罗霜马栋斌
关键词:胶质瘤凋亡
欧当归内酯A对人胶质瘤细胞U251细胞凋亡及自噬的影响
2022年
目的探讨欧当归内酯A(LA)对人胶质瘤细胞U251凋亡及自噬的影响。方法将对数生长期的U251细胞随机分为空白组、30μmol·L^(-1)LA组、60μmol·L^(-1)LA组、90μmol·L^(-1)LA组,分别用含有0、30、60、90μmol·L^(-1)的LA培养基培养24、48、72 h,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测4组细胞的增殖能力,应用流式细胞术检测4组细胞培养24 h时的细胞凋亡率。将对数生长期的U251细胞分为空白组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、90μmol·L^(-1)LA组、30μmol·L^(-1)LA+3-MA组、60μmol·L^(-1)LA+3-MA组、90μmol·L^(-1)LA+3-MA组,空白组不加LA和3-MA,其余5组分别加入含0、90、30、60、90μmol·L^(-1)LA和1、0、1、1、1 mmol·L^(-1)3-MA的培养基培养24 h,采用CCK-8检测各组细胞活性。应用Western blot法检测空白组、30μmol·L^(-1)LA组、60μmol·L^(-1)LA组、90μmol·L^(-1)LA组细胞中p53、B淋巴细胞-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3、微管相关蛋白1A/1B-轻链3抗体(LC3)-Ⅰ及LC3-Ⅱ蛋白相对表达量。结果培养24、48、72 h时,30μmol·L^(-1)LA组、60μmol·L^(-1)LA组和90μmol·L^(-1)LA组的细胞增殖能力显著低于空白组,60μmol·L^(-1)LA组和90μmol·L^(-1)LA组细胞增殖能力显著低于30μmol·L^(-1)LA组,90μmol·L^(-1)LA组细胞增殖能力显著低于60μmol·L^(-1)LA组(P<0.05)。空白对照组培养24、48、72 h时的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。30μmol·L^(-1)LA组培养72 h时的细胞增殖能力显著高于培养24、48 h时(P<0.05),培养24 h与48 h时的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);60μmol·L^(-1)LA组培养48、72 h时的细胞增殖能力显著低于培养24 h时(P<0.05),培养48 h与72 h时的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。90μmol·L^(-1)LA组培养48、72 h时的细胞增殖能力显著低于培养24 h时,培养72 h时的细胞增殖能力显著低于48 h时(P<0.05)。30μmol·L^(-1)LA组、60μmol·L^(-1)LA组、90μmol·L^(-1)LA组细�
王利莹陆玉成王丽娟王蒙恩韦志永车峰远
关键词:胶质瘤细胞凋亡自噬
CDK7抑制剂THZ1对人胶质瘤细胞 U251放疗的增敏性被引量:4
2021年
目的探讨细胞周期蛋白酶抑制剂7(CDK7)THZ1对人胶质瘤细胞U251的体外放射增敏性。方法体外培养人胶质瘤细胞U251。MTT检测THZ1对U251的毒性作用,绘制不同浓度(0、8、16、32、64、128、256、512 noml/L)THZ1处理下的细胞存活曲线,并计算其IC50及IC20,将IC20作为后续试验的药物作用浓度。克隆形成实验检测射线联合THZ1对U251的作用,计算放射敏感性参数,绘制集落形成数量曲线。流式细胞术检测各组细胞周期分布。Westernblotting检测CDK7细胞周期蛋白、Bax凋亡相关蛋白及γH2AX蛋白表达。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用独立样本t检验,2因素组间对比采用析因设计方差分析。结果 THZ1对U251具有增殖抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;单独应用THZ1可使CDK7细胞周期蛋白抑制,X射线(6 Gy)联合IC20浓度THZ1(10 nmol/L)能够降低U251的克隆能力,放射增敏比为1.478,同时可使G0/G1期细胞比例由67%减少到11%、G2/M期细胞比例由12%增加到70%;凋亡相关蛋白Bax表达增加,DNA双链断裂标志γH2AX蛋白表达增加。结论 THZ1对U251具有放射增敏作用,其可能的机制是THZ1联合射线降低细胞损伤修复能力,诱导细胞凋亡,调节凋亡相关蛋白的表达,改变细胞生长周期。
李文清叶兰姜玉华
关键词:放射增敏细胞周期
抑制OGG1增加替莫唑胺对神经胶质瘤细胞U251的敏感性及机制探讨被引量:2
2020年
目的探讨8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)对神经胶质瘤细胞增殖及替莫唑胺(temozolomide,TMZ)化疗敏感性的影响。方法采用光镜、CCK-8、活性氧(ROS)检测试剂盒DCFH-DA探针、Western blot观察及检测替莫唑胺处理后神经胶质瘤细胞的形态、细胞活力、细胞内活性氧水平及OGG1蛋白的表达水平;Real time-PCR技术检测OGG1 mRNA干扰率;OGG1下调后,U251细胞存活率及OGG1蛋白的表达水平。结果与对照组相比,替莫唑胺处理后,U251细胞的生存能力显著下降(P<0.05),ROS水平显著增加(P<0.05),OGG1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),当替莫唑胺剂量为100μmol/L时,对U251细胞的损伤最大(P<0.01)。当OGG1 siRNA干扰U251细胞OGG1后,OGG1 mRNA及OGG1蛋白的表达水平降低(P<0.05),而利用低剂量的替莫唑胺对U251细胞处理时,细胞存活率显著降低(P<0.05)。结论OGG1通过ROS通路,介导替莫唑胺对神经胶质瘤细胞U251的氧化损伤,OGG1抑制可增强神经胶质瘤细胞对TMZ的化疗敏感性。
王潇娅唐辉邵川何家全
关键词:胶质瘤替莫唑胺U251细胞
沉默APN对胶质瘤细胞U251的增殖、侵袭和凋亡的影响及其作用机制
目的:探究AminopeptidaseN(APN)对胶质瘤细胞U251增殖能力、迁移侵袭能力和凋亡等生物学行为的影响及可能的作用机制。  方法:通过RNA干扰技术沉默胶质瘤细胞U251中APN的表达后,然后通过相适应的功...
董云朋
关键词:胶质瘤U251细胞分子机制
文献传递
沉默APN对胶质瘤细胞U251增殖、侵袭和凋亡的影响被引量:1
2020年
目的探究aminopeptidase N(APN)对胶质瘤细胞U251增殖能力、迁移侵袭能力和凋亡等生物学行为的影响及可能的作用机制。方法通过RNA干扰技术沉默胶质瘤细胞U251中APN的表达后,运用RT-qPCR的方法检测APN mRNA表达,采用Western blot检测APN蛋白表达水平,CCK-8检测各组U251细胞的增殖活性;采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;采用细胞划痕实验检测U251细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力;采用Western blot检测STAT3通路蛋白t-STAT3、p-STAT3、Bcl-2和MMP-2的蛋白表达水平。结果与空白对照组和阴性对照组相比,沉默U251中APN的表达后APN在基因和蛋白表达水平下降(P<0.01),沉默APN后U251的增殖活性明显下降(P<0.05),细胞周期停滞在G0/G1期,并且凋亡率明显增加(P<0.01);另外沉默APN的表达后U251细胞的迁移能力和侵袭能力明显下降(P<0.01);沉默APN后STAT3磷酸化水平下降,引起下游蛋白Bcl-2和MMP-2等蛋白表达下降(P<0.05)。结论沉默APN可通过STAT3信号途径抑制胶质瘤细胞U251增殖、迁移和侵袭,诱导凋亡。
董云朋程远陈晋
关键词:胶质瘤AMINOPEPTIDASERNA干扰STAT3
miR-124靶向STAT3抑制胶质瘤细胞U251免疫逃逸被引量:3
2020年
为探究miR-124在胶质瘤细胞免疫逃逸中的作用及分子机制,qPCR法检测胶质瘤患者肿组织及正常组织中miR-124表达量;ELISA和qPCR检测IL-2刺激下NK细胞系(NK-92)中IFN-γ和miR-124表达量;共培养NK细胞胶质瘤U251细胞,细胞毒实验检测NK细胞中过表达miR-124对细胞毒性及IFN-γ水平的影响;生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀实验验证miR-124和信号转导及转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)的靶向调控关系;Western blotting检测过表达和抑制miR-124表达对STAT3蛋白水平的影响;细胞毒实验检测共转染过表达pcDNA-STAT3载体对miR-124作用下NK细胞U251细胞细胞毒性及IFN-γ水平的影响。结果显示,与正常组织相比,miR-124在患者胶质瘤组织中的表达量显著降低(P<0.05);与对照组相比,IFN-γ和miR-124在IL-2激活的NK-92细胞中表达量显著增加(P<0.05);miR-124过表达通过促进NK细胞分泌IFN-γ显著促进NK细胞细胞毒性;miR-124与STAT3存在直接靶向作用;过表达miR-124显著抑制IL-2作用下NK-92细胞STAT3蛋白水平,抑制miR-124表达则促进STAT3蛋白表达;转染pcDNA-STAT3可逆转过表达miR-124对NK细胞细胞毒性、IFN-γ分泌的影响。以上结果表明,miR-124通过靶向抑制STAT3抑制胶质瘤细胞U251免疫逃逸。
孙军温昌明张保朝闻公灵刘义锋汪宁刘开祥李巍
关键词:胶质瘤免疫逃逸信号转导及转录激活因子3
环氧木香内酯通过NF-κB信号通路下调MMP-2/9抑制胶质瘤细胞U251侵袭和迁移被引量:4
2020年
目的探讨环氧木香内酯(EMCL)对胶质瘤U251细胞侵袭和迁移的抑制作用及其机制。方法不同浓度EMCL处理胶质瘤U251细胞48 h后,用CCK-8法检测EMCL对胶质瘤细胞增殖抑制作用及半数抑制浓度IC50;采用划痕实验和Transwell侵袭实验检测EMCL对胶质瘤U251细胞侵袭迁移的影响;采用Western blot检测胶质瘤细胞中MMP-2、MMP-9、p-p65和p65蛋白的表达。结果胶质瘤U251细胞经EMCL处理后,细胞数目显著减少,细胞形态变圆、变小,细胞细胞间的接触、丝状伪足均显著减少;胶质瘤U251细胞迁移和侵袭能力随着EMCL浓度的升高而显著下降;MMP-2和MMP-9蛋白表达均下调;p-p65/p65的表达下调。结论环氧木香内酯能够抑制胶质瘤U251细胞侵袭和迁移能力。
孙欢朱佳斌赵晓瑾尚发军
关键词:胶质瘤NF-ΚB
甘草查尔酮A通过调控内质网应激促进胶质瘤细胞U251凋亡被引量:2
2019年
目的探讨内质网应激对甘草查尔酮A(licochalcone A,Lico A)促进胶质瘤细胞U251凋亡的影响。方法以胶质瘤细胞株系U251细胞为研究模型,设置了正常对照组(即control组)、Lico A低浓度组(15μmol/L Lico A)、Lico A中浓度组(30μmol/L Lico A)和Lico A高浓度组(45μmol/L Lico A)。CCK-8法检测甘草查尔酮A对U251细胞增殖的影响; Hoechst 33258染色法观察甘草查尔酮A对U251细胞凋亡的影响; Western blot检测细胞甘草查尔酮A对U251细胞凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)和内质网应激相关蛋白(GRP78、Chop和cleaved caspase-12)的影响。结果 CCK-8法检测发现低、中、高浓度的Lico A处理组与control组比较U251细胞数目明显降低,且呈浓度依赖性(P <0. 05)。Hoechst 33258染色发现低、中、高浓度的Lico A处理组与control组比较Hoechst 33258染色阳性U251细胞数目明显增加。Western blot检测发现低、中、高浓度的Lico A处理组与control组比较U251细胞中Bax蛋白表达明显增加(P <0. 05),Bcl-2蛋白表达明显降低(P <0. 05)。同时,Western blot检测发现低、中、高浓度的Lico A处理组中内质网应激相关蛋白GRP78、Chop和cleaved caspase-12蛋白与control组比较均显著增加(P <0. 05)。结论甘草查尔酮A通过上调内质网应激相关蛋白诱导U251细胞凋亡。
徐高峰鲍钢白晓斌祁磊谢万福李瑞春
关键词:内质网应激脑胶质瘤

相关作者

范月超
作品数:80被引量:223H指数:7
供职机构:徐州医学院附属医院
研究主题:胶质瘤 迁移 垂体腺瘤 垂体瘤 细胞周期
林毅
作品数:4被引量:25H指数:2
供职机构:湖北医药学院附属人民医院
研究主题:脑胶质瘤细胞U251 生物学特性 神经胶质瘤 高血压脑出血 开颅手术
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供职机构:东南大学医学院
研究主题:交变磁场 胶质瘤细胞U251 卡氮芥 磁流体 DMSA
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研究主题:开颅手术 脑胶质瘤细胞U251 生物学特性 神经胶质瘤 高血压脑出血
代建国
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