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- 杨鑫王红宁倪瑞琪侯承尧雷昌伟李豪晏文俊
- 一种熊猫PLA2g10基因的合成方法及其腺病毒表达载体构建方法
- 本发明公开了一种熊猫PLA2g10基因的合成方法及其腺病毒表达载体构建方法,涉及生物技术领域。本发明包括查小鼠pla2g10的CDS;用小鼠的CDS去熊猫的基因转录数据库进行Blast比对,找出同源性最高的基因片段;设计...
- 冯斌廖文浩王海瑞吴德方正锋车炼强林燕徐盛玉卓勇花伦江雪梅李健
- 一种重组腺病毒表达载体及以其制备的多价诺如病毒疫苗
- 本发明提供了一种重组腺病毒表达载体,以及以该一种重组腺病毒表达载体为活性成分的多价诺如病毒疫苗。本发明的重组腺病毒表达载体,可同时表达诺如病毒GI.1、GII.3、GII.4、GII.17亚型主要病毒衣壳蛋白VP1,小鼠...
- 周东明邢嫚周萍
- 腺病毒表达载体及生产方法和细胞系
- 提供了一种腺病毒表达载体。该腺病毒表达载体可以包括:a)使腺病毒不能复制的一种或多种突变;b)编码蛋白质或RNA的至少一个核苷酸序列。还提供了一种合成腺病毒载体的方法。该合成方法可以包括:a)产生多个重叠的腺病毒子片段,...
- C·埃克斯莱恩H·刘S·史蒂文斯
- 一种重组腺病毒表达载体及以其制备的多价诺如病毒疫苗
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- 一种基于腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法
- 本发明公开了一种基于人稀有血清型腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法,其是以野生型腺病毒HAd49的基因组为基础,通过基因组直接克隆方法,删除E1编码区和E3编码区,在E1删除区插入I‑CeuI和PI‑Sce...
- 黎诚耀罗升学刘博超张攀丽
- 文献传递
- Bak1腺病毒表达载体的构建及对人成骨肉瘤细胞的影响被引量:1
- 2018年
- 目的构建人Bcl2拮抗1(Bak1)基因重组表达腺病毒pAd-Bak1,并感染人成骨肉瘤细胞MG63建立过表达Bak1的细胞模型,检测其对细胞活性的影响。方法利用qPCR扩增Bak1全长cDNA,利用穿梭质粒pENTER构建载有Bak1基因的重组穿梭质粒pENTER-Bak1,通过基因测序鉴定载体序列。将重组载体PmeⅠ线性化、脱磷酸化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAd-Amp的感受态BJ5183细胞中进行基因同源重组。将重组腺病毒质粒pAD-Bak1经PacⅠ酶切线性化后,用Lipofectamine 2000脂质体转染到HEK-293细胞中进行包装扩繁,荧光定量PCR法测定病毒滴度。感染MG63细胞,qPCR和Western blot检测Bak1的表达,MTT检测细胞活性。结果测序及酶切验证pENTER-Bak1构建成功。pAD-Bak1感染MG63细胞,qPCR检测到细胞中Bak1基因过表达(与NC对照组和空白对照组相比P<0.01、P<0.01),Western blot检测到细胞中Bak1蛋白过表达。MTT检测显示与NC对照组相比,细胞活性减弱(P<0.05)。结论成功构建了Bak1重组表达腺病毒,验证了其能够感染MG63细胞表达Bak1蛋白,证明了过表达Bak1可以减弱细胞的活性。为进一步研究Bak1的功能奠定了基础。
- 柴爽黄红万雷王吉利王伟黄宏兴
- 关键词:重组腺病毒载体
- 大鼠MK-shRNA腺病毒表达载体的构建
- 2017年
- Midkine(MK)基因是在1988年日本学者Kadomatsu等发现的一种cDNA克隆。其表达产物在胚胎发育早期至中期时在多种组织中表达,但随着胚胎的发育而逐渐减少,在成体鼠只有肾脏和子宫两个脏器有表达。因为能与肝素结合并相互作用,又被称为肝素结合生长因子。MK在神经系统的发育生长中有诸多功能,本课题组也已经证明在脑缺血的急性期其表达增高,近年也相继报道MK在多种肿瘤组织中有高表达[4]。
- 吴晓冬薄立华王小昆朱辉
- 关键词:腺病毒载体基因沉默ECORI
- 大鼠Hes1腺病毒表达载体构建及功能鉴定
- 2017年
- 目的构建高滴度大鼠Hes1腺病毒过表达载体(Ad-Hes1)。方法以大鼠cDNA文库为模板,PCR法扩增Hes1,通过定向克隆构建pShuttle-CMV-Hes1穿梭质粒,再以pShuttle-CMV-Hes1为基础,构建pAdeno-Hes1病毒质粒,将pAdenoHes1转染293细胞,包装Ad-Hes1,利用改进TCID50法进行病毒滴度测定。Ad-Hes1感染H9c2心肌细胞,Western blot检测Hes1表达。结果pShuttle-CMV-Hes1穿梭质粒、pAdeno-Hes1病毒质粒构建成功,总滴度为1.6×1011 PFU,Ad-Hes1可在H9c2心肌细胞内正常表达,其MOI值为30。结论 Ad-Hes1包装成功,为进一步研究Hes1的心肌保护作用奠定实验基础。
- 周学亮方义湖赵勇邹斌徐华刘季春
- 关键词:腺病毒科HES1质粒构建
- 人源G9a及其重组腺病毒表达载体在制备治疗糖尿病药物中的应用
- 本发明公开了一种人源G9a及其重组腺病毒表达载体在制备治疗糖尿病药物中的应用,属于生物医药卫生领域。本发明证实,用所构建的表达人源G9a的重组腺病毒感染db/db小鼠,可明显增加其肝脏中G9a的表达,并明显改善了db/d...
- 郑凌黄昆薛伟丽吴琼
- 文献传递
相关作者
- 毋丽娜

- 作品数:10被引量:22H指数:2
- 供职机构:北京大学肿瘤医院
- 研究主题:增殖抑制基因 肿瘤基因治疗 腺病毒表达载体 肿瘤细胞 启动子
- 邱晓彦

- 作品数:87被引量:98H指数:8
- 供职机构:北京大学
- 研究主题:IGG 唾液酸化 IG 肿瘤 肿瘤基因治疗
- 罗高兴

- 作品数:440被引量:861H指数:15
- 供职机构:第三军医大学西南医院
- 研究主题:烧伤 一氧化氮 创面愈合 CTLA4IG 小鼠
- 彭旭

- 作品数:189被引量:149H指数:8
- 供职机构:第三军医大学西南医院
- 研究主题:关节镜 踝关节 髋关节 踝关节镜 近期疗效
- 穆传杰

- 作品数:87被引量:122H指数:8
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所
- 研究主题:RB94基因 小鼠 E838 重组腺病毒 肿瘤细胞