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奶牛腐蹄病节 瘤 拟 杆菌 PCR检测法研究 被引量：2 2014年 节 ,病肢明显跛行,并伴有全身性症候。腐蹄病是奶牛蹄病中危害性极为严重的一类疾病,病畜食欲减退、泌乳量下降、繁殖能力降低,病情严重者将被迫淘汰,严重影响奶牛业的发展,造成严重的经济损失。鉴于该病对奶牛业的严重危害,奶牛出现蹄病时的及时、准确临床诊断,以及与其他蹄病的鉴别诊断,对于奶牛蹄病的临床治疗和预防具有重要的实际指导意义。本试验根据节 瘤 拟 杆菌 纤毛蛋白基因序列的特异性,设计1对引物BPP并建立了PCR检测方法。试验结果表明,引物BPP具有相对较高的特异性和敏感性,其敏感性达到了152.5 pg,且引物FLP具有很好的特异性,能够准确诊断出节 瘤 拟 杆菌 的存在。关键词：奶牛 腐蹄病 节瘤拟杆菌 PCR诊断 节 瘤 拟 杆菌 PCR检测方法的初步应用2006年 节 瘤 拟 杆菌 PCR检测方法的基础上,将PCR方法用于临床样品的检测。PCR检测发现制约PCR直接检测临床样品检出率的主要因素是临床样品中细菌外的抑制物;采自趾叉皮炎的临床样品16份PCR检测呈阳性,趾叉皮炎是腐蹄病的初期感染症状;而其它蹄病后期症状临床样品PCR检测均为阴性,表明PC R检测方法适宜腐蹄病的早期诊断。关键词：腐蹄病 节瘤拟杆菌 PCR检测 腐蹄病节 瘤 拟 杆菌 的分子致病机制的研究进展 被引量：3 2006年 节 瘤 拟 杆菌 是致病作用的主要病菌之一,它是通过IV型纤毛和细胞外蛋白酶而产生作用。但从腐蹄病发病症状看,节 瘤 拟 杆菌 所致疾病的严重程度不是相同的,据此节 瘤 拟 杆菌 被分为毒性、弱毒性和良性菌,这种分类通过对该菌基因组毒性关联蛋白Vap(Virulence-associated protein)区域和毒性相关位点vrl(Virulence Related Locus)区域的研究,发现其致病特点与基因的顺序有很大联系。关键词：节瘤拟杆菌 VAP 节 瘤 拟 杆菌 PCR检测方法的建立被引量：2 2005年 节 瘤 拟 杆菌 特有保守序列设计引物,利用聚合酶链式反应(PCR)建立了一种鉴别检测该菌的方法。对可能影响PCR检测结果的一系列因素进行了较详细的研究,选择了适宜PCR检测的快捷处理病样获得反应模板的方法,对PCR反应条件进行了优化,使对已知菌株培养物检测灵敏性最高可到30个菌/30μL反应体系;用广泛的相关菌株和菌群验证引物的特异性,证明设计的引物特异性强。将PCR方法用于临床病样的初步检测,部分病样PCR检测阳性。为用PCR方法检测节 瘤 拟 杆菌 引发的牛、羊、鹿腐蹄病奠定了基础。关键词：腐蹄病 节瘤拟杆菌 PCR检测 节 瘤 拟 杆菌 K-凝集试验方法的建立2005年 节 瘤 拟 杆菌 (D.nodosus)特异的表面抗原———K抗原具有凝集反应的特性,建立了检测抗节 瘤 拟 杆菌 抗体的方法———K-凝集试验方法。节 瘤 拟 杆菌 液体培养物接种兔,制备节 瘤 拟 杆菌 阳性血清;福尔马林灭活肉汤培养物制备抗原,结果表明,该方法使用方便、特异性强。关键词：节瘤拟杆菌 抗体 节 瘤 拟 杆菌 早期鉴别诊断—PCR检测方法的建立与应用节 瘤 拟 杆菌 特有保守序列设计引物，利用聚合酶链式反应(PCR)建立了一种简单区分该菌菌群的检测方法，结果表明，PCR检测方法适宜腐蹄病的早期诊断;用病样对应血清与纤毛抗原琼扩实验，健康动物存在该菌的抗体，表明通过...关键词：节瘤拟杆菌 腐蹄病 文献传递 腐蹄病节 瘤 拟 杆菌 纤毛蛋白与绵羊IL-2融合基因的分泌型表达 2004年 节 瘤 拟 杆菌 抗血清与提取的融合蛋白进行对流免疫电泳 。关键词：腐蹄病 节瘤拟杆菌 分泌型表达 白细胞介素2 免疫佐剂 腐蹄病节 瘤 拟 杆菌 纤毛蛋白与绵羊白细胞介素-2融合基因在PAK/2pfs细胞中的表达与鉴定 2004年 节 瘤 拟 杆菌 纤毛蛋白与绵羊白细胞介素-2(Pilin-IL-2)融合基因表达载体的PAK/2pfs工程菌[1]接种于营养肉汤,40℃培养16～18h,离心,向上清液中加入饱和(NH4)2SO4提取Pilin-IL-2融合基因表达蛋白。用羊抗兔E型节 瘤 拟 杆菌 抗血清与提取的融合蛋白进行对流免疫电泳,证明该融合蛋白具有特异性,且有较高的表达量。经SDS-PAGE电泳和Westernblot确证其为Pilin-IL-2融合蛋白。关键词：融合基因 白细胞介素-2 腐蹄病 绵羊 对流免疫电泳 鹿腐蹄病A型节 瘤 拟 杆菌 纤毛蛋白与绵羊IL-2融合基因表达载体的构建与表达 节 瘤 拟 杆菌 是引起鹿、牛、羊等反刍动物腐蹄病的主要菌型之一.菌体纤毛蛋白是其主要保护性抗原.白细胞介素2(IL-2)在特异性免疫应答中起主要作用,能促进T、B淋巴细胞的增殖和分化.已有很多实验证明IL-2作为佐剂能提高...关键词：腐蹄病 节瘤拟杆菌 白细胞介素2 文献传递 腐蹄病C型节 瘤 拟 杆菌 纤毛蛋白基因工程疫苗对绵羊的免疫试验 被引量：1 2003年 节 瘤 拟 杆菌 纤毛蛋白基因表达质粒的工程菌PAK/2pfsC在含羧苄青霉素的营养肉汤中表达,用MgCl2法在培养物上清中提取表达产物(纤毛蛋白)。将表达的纤毛蛋白用弗氏完全佐剂乳化,制成疫苗,疫苗免疫4只健康绵羊,定期采血,用对流免疫电泳和K凝集试验检测实验绵羊的体液免疫应答及抗体水平。结果发现,免疫后5d即可产生相应抗体,21d后抗体效价达到1∶4000以上。试验表明,腐蹄病C型节 瘤 拟 杆菌 纤毛蛋白基因工程疫苗对绵羊具有较好的免疫应答和免疫保护性。关键词：反刍动物 腐蹄病 基因工程疫苗 绵羊 免疫保护性
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