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尖吻蝮蛇蛇毒酒的安全性评价研究: 2024年; 系统评价尖吻蝮蛇蛇毒酒(Deinagkistrodon acutus snake venom wine,DSVW)的出血、水肿、肌肉、肝肾毒性,为DSVW的安全生产和运用提供参考。取尖吻蝮蛇的新鲜蛇毒,加入高粱酒炮制获得DSVW;运用小鼠模型皮下注射DSVW研究出血、水肿、肌肉毒性等急性毒性,通过口服21 d研究其对肝、肾组织的慢性毒性。结果表明,DSVW注射(5 mg/mL)的小鼠背部皮肤都没有明显的出血点(≤2.4 cm^(2)),小鼠小腿增重与空白对照组无显著差异,肌酸激酶为(0.32±0.03)U/mL与CK组(0.34±0.02)U/mL无显著差异,DSVW无显著的急性出血、水肿、肌肉毒性;DSVW灌胃[0.024 mg(/g·d)]的小鼠血清尿素、肌酐、谷丙转氨酶、谷草转氨酶分别为(6.04±0.83)μmol/L、(13.00±2.93)mmol/L、(36.67±9.29)U/L、(89.67±7.09)U/L,与CK组无显著差异,且体重、肾肝质量、肝肾/体重、肝肾组织病理切片均无显著差异,DSVW无显著的慢性肝、肾毒性。经炮制获得的DSVW的无出血、水肿、肌肉、肝肾毒性,为尖吻蝮蛇蛇毒酒安全生产和使用提供了理论依据。; 杨静丽方昕悦李治宽张中华谭发祥戴奎李宇王晴芳罗凯何美军; 关键词：肌肉毒性肝肾毒性

尖吻蝮蛇蛇毒降纤酶的分离纯化及其经直肠给药的实验研究: 2024年; 目的:通过层析法从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化降纤酶,探索降纤酶经直肠给药进入血液循环而降低体内纤维蛋白原水平的可行性。方法:从尖吻蝮蛇蛇毒粗毒中分离降纤酶,经小鼠直肠给药后动物成像观察降纤酶在小鼠脏器中的分布,病理学检测降纤酶对组织的影响,质谱测定小鼠血浆成分,ELISA检测血浆纤维蛋白原水平。结果:尖吻蝮蛇蛇毒粗毒分离纯化获得电泳纯的降纤酶,经直肠给药后其安全性高,无急性毒性反应,直肠组织无明显病理改变。免疫组化结果显示降纤酶分布于直肠组织中(P<0.01),Shotgun质谱测得给药1 h后小鼠血浆存在降纤酶片段,动物成像显示给药3 h后染料标记的降纤酶分子分布大量分布于盲肠组织中,并随时间的延长其含量逐步减少。降纤酶经直肠给药能降低体内纤维蛋白原水平(P<0.01)。结论:尖吻蝮蛇蛇毒粗毒经二步层析法分离获得电泳纯的降纤酶;降纤酶可经直肠给药后吸收进入血液循环并降低体内纤维蛋白原水平。; 孔露平廖明张学荣周怡张昊胡少聪肖曼琪张子彦罗小玲; 关键词：降纤酶尖吻蝮蛇蛇毒直肠给药分离纯化

皖南尖吻蝮蛇蛇毒抑瘤组分Ⅰ促进Erastin诱导人口腔鳞癌Hsc3细胞发生铁死亡的相关机制: 2024年; 目的研究皖南尖吻蝮蛇蛇毒抑瘤组分Ⅰ(anti-tumor component Ⅰ from Agkistrodon acutus venom, AAVC-Ⅰ)是否能够促进Erastin诱导口腔鳞癌细胞铁死亡的水平并初步探索相关机制。方法通过CCK8检测细胞活力,通过流式细胞仪检测细胞中活性氧、脂质氧化以及线粒体膜电位水平,通过Western-blot检测细胞内胱氨酸谷氨酸转运受体(system XC-,xCT)、谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione Peroxidase 4,GPX4)蛋白表达水平,通过还原性谷胱甘肽(Glutathione, GSH)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)试剂盒检测细胞内GSH、MDA水平。结果经Erastin和浓度为2μg/ml的AAVC-Ⅰ联合处理后,细胞活力相比于单独的Erastin处理出现了明显下降(P<0.05),并且可以被铁死亡抑制剂Fer-1所逆转(P>0.05),同时联合处理组细胞中活性氧、脂质氧化水平出现了明显上升(P<0.05),而线粒体膜电位、GSH水平明显下降(P<0.05),此外xCT、GPX4蛋白表达被抑制(P<0.05)。结论浓度为2μg/ml的AAVC-Ⅰ可以促进Erastin诱导口腔鳞癌细胞铁死亡的水平,其机制可能是通过抑制xCT/GPX4使细胞抗氧化能力下降,氧化应激水平增加。; 陶桃陶志豪邢新张方王之恒柴琳; 关键词：蛇毒口腔鳞癌

长白山白眉蝮蛇蛇毒的凝胶柱HPLC指纹图谱检测方法: 本发明属于医药技术领域，具体涉及长白山白眉蝮蛇蛇毒的指纹图谱检测方法，所述方法包括如下步骤：(1)供试品溶液和对照品溶液的制备：分别取长白山白眉蝮蛇蛇毒供试品和长白山白眉蝮蛇蛇毒对照品，用水溶解并稀释，离心，取上清液，过...; 王艳秋靳美霞杜宏明聂丽

长白山白眉蝮蛇蛇毒的反相HPLC指纹图谱检测方法: 本发明属于医药技术领域，具体涉及长白山白眉蝮蛇蛇毒指纹图谱的检测方法，其步骤：(1)供试品和对照品溶液制备：分别取长白山白眉蝮蛇蛇毒供试品和长白山白眉蝮蛇蛇毒对照品，用溶剂溶解并稀释，离心，取上清液，过滤；(2)指纹图谱...; 王艳秋靳美霞杜宏明聂丽

一种蝮蛇蛇毒中微量元素含量的检测方法及系统: 本发明涉及生物物质的化学分析技术领域，尤其涉及一种蝮蛇蛇毒中微量元素含量的检测方法及系统，其方法包括步骤1.获取三种蛇，提取三种蛇的蛇毒；步骤2.将三种提取液制成三种蛋白质溶液；步骤3.采用液质联用质谱检测方法检测三种蛋...; 莫之准温羚玲刘禹翔曾仲意曾林生

尖吻蝮蛇蛇毒检测实验方法的探索性研究: 目的和意义:通过三种不同的抗体纯化方法(饱和硫酸安法、饱和硫酸铵联合阴离子交换层析法、饱和硫酸铵联合亲和层析法)获取相应马抗尖吻蝮蛇蛇毒IgG。最后,筛选最优马抗尖吻蝮蛇IgG进行尖吻蝮蛇蛇毒检测,探索一种替代传统尖吻蝮...; 谭兴领; 关键词：亲和层析法尖吻蝮蛇蛇毒

尖吻蝮蛇蛇毒中一种类凝血酶的分离纯化及性质研究: 尖吻蝮（Agkistrodon acutus）是蛇亚目蝰蛇科蝮亚科下的一种单型毒蛇，主要分布于我国的华东地区，是国家二级濒危保护陆生野生动物。尖吻蝮蛇蛇毒(Agkistrodon acutus venom，AAV)中主要...; 杨涵; 关键词：尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶抗血栓作用

一种基于改良双抗体夹心ELISA法的尖吻蝮蛇蛇毒检测试剂盒的制备方法: 本发明公开了一种基于改良双抗体夹心ELISA法的尖吻蝮蛇蛇毒检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：步骤一：初步提纯，采用饱和硫酸铵方法初步纯化马抗尖吻蝮蛇血浆中的马抗尖吻蝮蛇IgG；步骤二：重复提纯，采用亲和层析法对马抗尖...; 宁宗谭兴领杨霞

基于特征肽的超高效液相色谱-串联质谱法检测矛头蝮蛇蛇毒种属来源及类凝血酶含量被引量：7: 2022年; 蛇毒血凝酶类药物是以蝮蛇蛇毒为原料制备的止血药,主要活性成分为蛇毒类凝血酶(svTLEs)。不同蛇种来源的svTLEs结构不同,止血机制不同,药理作用也存在差异,因此准确鉴别蛇毒种属来源和svTLEs含量对于保障该类产品的质量至关重要。研究基于蛋白质组学技术,筛选出了具有种属特异性的矛头蝮蛇svTLE特征肽,并建立了基于特征肽的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)检测矛头蝮蛇蛇毒种属来源及类凝血酶含量的方法。采用胰蛋白酶对纯化的矛头蝮蛇svTLE进行酶解,利用纳升液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(Nano LC-Q-Exactive-MS)和Proteome Discoverer^(2).2软件分别进行多肽的检测和鉴定,通过BLAST搜索与Uniprot数据库对比分析,筛选出具有种属特异性的矛头蝮蛇svTLEs特征肽“EAYNGLPAK”。针对该特征肽对酶解温度、酶解时间和酶用量等样品前处理方法进行了优化,利用超高效液相色谱-串联质谱,以m/z 481.9>315.2和481.9>485.2作为检测离子对,采用ESI+模式进行了多反应监测(MRM)定性定量分析。结果显示,特征肽在2.5~30 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(r)大于0.9996,多水平加标回收率范围为95.5%~101.9%,各水平平行测定结果的相对标准偏差(RSD)为1.1%~3.2%,完全能够满足实际样品检测需求。方法简便快捷,灵敏度高,专属性强,可用于矛头蝮蛇蛇毒种属鉴别及svTLE含量测定,从源头保证血凝酶类产品的质量,并可为其他蛇毒类产品的质量控制提供参考。; 咸瑞卿咸瑞卿巩丽萍王聪聪张迅杰彭丽石峰; 关键词：超高效液相色谱-串联质谱蛇毒类凝血酶蛇毒

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