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1株血清2型副猪嗜血杆菌的分离鉴定及致病性研究: 2025年; [目的]明确浙江地区某猪场副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)感染情况,明确分离株的血清型、生物学特性及致病性,为临床控制副猪嗜血杆菌提供理论参考。[方法]从发病猪的肺脏、心脏血液、关节液等病料中分离、纯化菌株,并对其进行革兰染色镜检、16S rRNA基因PCR扩增及测序,明确分离株的血清型,检测分离株携带毒力基因情况、对常见抗菌药物的敏感性及对小鼠的致病性,使用饱和硫酸铵法提取菌株分泌蛋白,并通过电泳分析蛋白主要富集区域。[结果]分离株在TSA培养基上生长出圆形、光滑湿润、颜色灰白、边缘整齐的针尖大小的菌落;接种至TSB培养基后,1~3 h生长缓慢,3~4 h进入对数生长期,4~12 h进入生长稳定期;革兰染色镜检呈红色短杆状、长杆状,长度不等,疑似副猪嗜血杆菌。16S rRNA基因PCR扩增结果显示,出现680 bp的特异性条带,与预期相符。血清型鉴定结果显示,检测到2型血清型副猪嗜血杆菌特异性条带。BLAST比对显示该分离株为血清2型副猪嗜血杆菌。毒力基因检测结果显示,分离株携带cdtA、cdtB、cdtC、vtaA1、rfaD、rfaE、gnd、cpaD、espP2、vacJ、rfaF、vtaA2、htrA和ompP2基因。该菌株以1.0×10^(9) CFU/mL剂量感染BALB/c小鼠,在5~10 h出现死亡,并引起小鼠肝脏细胞核浓缩、坏死,肺泡腔内有大量浆液性渗出物,混有红细胞和菌体,脾脏组织炎性细胞浸润。药敏试验结果显示,分离株对头孢哌酮、头孢呋辛钠、哌拉西林、青霉素等药物耐药,对氯霉素表现中介,对环丙沙星、左氧氟沙星、阿奇霉素等药物敏感。该菌株分泌蛋白大小主要集中在25~180 ku。[结论]本研究分离鉴定获得1株血清2型副猪嗜血杆菌,该分离株编码多种毒力基因,具有致病性,对多种常用抗菌药物有明显的耐药性,并分泌多种蛋白。试验结果提示该猪场可使用喹诺酮类、大环内酯类及氨基糖苷类药物进行; 李倩文华涛常晨常晨李军星唐波; 关键词：副猪嗜血杆菌血清型

血清2型鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的功效模拟方法及系统: 本发明涉及生物技术领域，具体为血清2型鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的功效模拟方法，包括如下步骤：S1、疫苗剂量和接种方案输入，输入高、中、低剂量剂量的灭活疫苗的信息，以及单次接种、加强免疫免疫方案；S2、免疫反应模拟模型，通过...; 郭莉莉陈蕊王守杰祝宁郭晓乐李晓彤

血清2型猪链球菌酪氨酸激酶Cps2C突变株致病力分析: 2024年; 目的对血清2型猪链球菌酪氨酸激酶Cps2C的生物学功能进行生物信息学预测,并分析其对血清2型猪链球菌致病力的影响。方法利用生物信息学在线工具对Cps2C编码基因定位、蛋白保守结构域、跨膜结构域、蛋白相似性以及蛋白三维结构进行分析和预测。利用BALB/c小鼠感染模型,分别用野毒株05ZYH33和cps2C基因敲除株Δcps2C感染小鼠,对发病小鼠临床表征、小鼠死亡率、血液细菌载量进行比较分析。进一步对受感染小鼠的心脏、大脑和关节组织进行HE染色,对病理切片染色结果进行比较分析。结果Cps2C蛋白编码基因位于荚膜生物合成基因座cps上游,该蛋白无跨膜结构域,属于肺炎链球菌酪氨酸激酶CpsD同源蛋白,与其氨基酸序列相似性为64%,可能参与细菌荚膜合成调控。Cps2C缺失导致S.suis 2对小鼠的致病力显著减弱(P<0.05),与野毒株05ZYH33相比Δcps2C菌株的血液细菌含量降低(P<0.0001)。野毒株05ZYH33和Δcps2C菌株经腹腔注射感染的小鼠心脏、大脑和关节各组织结构完整,未见水肿、出血及炎症细胞浸润,未见心内膜炎、脑膜炎及关节炎等病变特征。结论血清2型猪链球菌酪氨酸激酶Cps2C可能是荚膜生物合成的重要调节因子,Cps2C缺失导致细菌血液存活能力下降,对小鼠致病力降低。; 林苗倪华汪雨荷郑峰唐成亮潘秀珍; 关键词：酪氨酸激酶致病力荚膜

1株血清2型鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定、致病性研究及灭活疫苗制备: 2024年; 【目的】本研究拟对从1例死亡雏鸭体内分离获得的鸭疫里默氏杆菌进行生物学特性和疫苗效果分析,旨在为鸭传染性浆膜炎的防治提供指导。【方法】采集送检雏鸭的脑、心脏和肝脏组织进行细菌分离培养,通过菌落形态观察、革兰染色镜检、16S rDNA PCR扩增测序鉴定菌株并分析其遗传进化关系;采用玻片凝集法鉴定菌株血清型,检测菌株对常见抗菌药物的敏感性及致病性;利用分离株制备灭活疫苗,测定其免疫保护效果。【结果】分离株在血平板上呈半透明、露滴状圆形小菌落,革兰染色可见多个丝状排列的阴性短杆菌,瑞氏染色可见两级浓染的短小杆菌。16S rDNA测序结果显示,分离株与鸭疫里默氏杆菌参考株CZ-RA03处于同一分支,相似性>99.9%。血清型鉴定结果显示,分离株为鸭疫里默氏杆菌血清2型。药敏试验结果显示,分离株对氧氟沙星、链霉素、卡那霉素等药物耐药,对氟苯尼考、四环素、多西环素等药物敏感。致病性试验结果显示,分离株对7日龄雏鸭的半数致死量(LD 50)为1.51×10^(7)CFU,雏鸭感染后肾脏载菌量最高,为2.15×10^(6)CFU/g。利用分离株制备油乳剂灭活疫苗免疫7日龄雏鸭,其免疫攻毒后存活率为86.67%。【结论】本研究从发病雏鸭中分离鉴定出1株具有较高致病性的血清2型鸭疫里默氏杆菌,以该菌制备的油乳剂灭活疫苗具有良好的免疫保护效果。研究结果为鸭传染性浆膜炎的防治提供了理论基础。; 戴婷婷刘荣昌陈海玉庄丽云韦玉帆谭慧敏刘洋唐福川黄瑜程艳青包银莉郑新添; 关键词：鸭疫里默氏杆菌生物学特性免疫原性

猪链球菌血清2型、7型、9型疫苗候选菌株筛选及免疫效果的初步评估: 刘洪硕

禽腺病毒血清2型分离鉴定及感染SPF鸡发病模型建立: 2023年; 【目的】建立禽腺病毒血清2型(FAdV-2)的发病模型,为评价FAdV-2的免疫原性和疫苗有效性提供参考。【方法】对疑似禽腺病毒感染的样品进行分离鉴定,对分离株Fiber基因和Hexon基因序列进行遗传演化分析,使用DNAStar和MEGA7.0软件对分离株和其他FAdV代表株进行核苷酸和氨基酸同源性比较。在确定分离到的病毒为FAdV-2后,通过动物实验分析分离株在不同感染途径和不同感染剂量下对6周龄SPF鸡的致病性,筛选出建立FAdV-2血清型发病模型的最佳感染方式和最佳感染剂量。【结果】从发病鸡组织样品中成功分离得到1株FAdV-2血清型毒株,命名为KM株。遗传演化分析表明,KM株和GX01株同属于禽腺病毒Ⅰ群D种中的FAdV-2血清型;同源性分析结果显示,KM株和GX01株的Fiber基因和Hexon基因核苷酸序列同源性分别为98.9%和99.3%,推导出氨基酸同源性分别为98.9%和98.8%。KM株静脉注射感染途径的致病性高于肌肉注射,试验鸡出现明显的心包积液-肝炎综合征;KM株发病模型的感染途径为静脉注射,感染剂量为108.0 TCID50,感染后鸡群死亡率为50%,剖检病死鸡可见明显的病理变化,鸡群感染后1 d泄殖腔排毒阳性。【结论】首次验证了FAdV-2能引发心包积液-肝炎综合征,建立了FAdV-2感染SPF鸡的发病模型,可为药物研发和疫苗评价提供一定参考,将有效预防和减少FAdV-2传播。; 胡鑫宇孙敏华曾庆航谢梓民袁朝霞廖明; 关键词：禽腺病毒

副猪格拉菌血清2型毒力及耐药性分析被引量：1: 2023年; 【目的】副猪格拉菌是引起猪格拉泽氏病的病原,是危害养猪业最为严重的细菌性病原之一,该菌血清型众多,不同血清型之间交叉保护力弱。血清2型是中等毒力毒株,近年来临床分离比例越来越高,危害越来越严重。从河南某规模化猪场保育猪群分离到副猪格拉菌血清2型并进行系列试验,为科学防控该病提供参考。【方法】对副猪格拉菌临床疑似病例猪只无菌采集肺脏、气管、心血等样品,通过细菌分离纯化、革兰氏染色镜检、常规PCR、豚鼠致病性试验及琼脂扩散药敏试验等方法,对疑似细菌进行形态观察、鉴定、血清型分型、毒力基因检测、耐药基因检测、致病性和耐药性等一系列生物学特性研究。【结果】从肺脏样品中分离获得1株副猪格拉菌,经鉴定为血清2型,该菌株携带vta1、vta2、vta3、wza、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、cdtC、espP2毒力基因,对豚鼠有较强的致病力。该菌株携带有aadA1、strA、strB、aphA1、tet(B)、sul2多个耐药基因,对青霉素G、卡那霉素、阿米卡星、链霉素、四环素、土霉素、复方新诺明有较强的耐药性;对头孢噻呋、头孢他啶、阿莫西林、氨苄西林、左氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星敏感性较好,临床用药效果显著。【结论】分离出的副猪格拉菌2型菌株毒力较强,且能透过血脑屏障,有明显的多重耐药性。研究结果可为副猪格拉菌血清2型流行病学调查、致病机制研究以及临床防控措施制定提供参考。; 王治方徐引弟朱文豪焦文强张青娴李海利许峰王克领; 关键词：毒力基因药敏试验耐药基因

禽腺病毒血清2型KM株分离鉴定、发病模型和免疫原性分析: 禽腺病毒（FAd V）感染可引发包涵体肝炎、肝炎-心包积液综合征和肌胃糜烂,自2015年在我国大规模爆发,对养禽业造成了极大损失。FAd V中包括鸡源病毒血清型12个,这12个血清型的病毒均可引发包涵体肝炎,但仅有FAd...; 胡鑫宇; 关键词：免疫原性分析

血清2型登革病毒特异性纳米抗体的构建与功能鉴定研究: 登革病毒（Dengue virus，DENV）主要以伊蚊为传播媒介，目前共有4个亚型的DENV在人群中传播，感染后机体会产生相应血清型抗体，对其他血清型不能起到保护作用。研究表明，DENV重要包膜蛋白（Envelope ...; 陈玲玲; 关键词：登革病毒免疫功能实验药理

四株血清2型猪链球菌广东分离株的耐药及致病性分析: 字嘉鑫

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