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二至丸改善自然衰老大鼠卵母细胞线粒体功能的机制研究: 2024年; 目的:研究二至丸对自然衰老大鼠卵母细胞线粒体改善的效应与机制。方法:选用SPF级SD雌性大鼠,随机分为8周龄青年对照组、20周龄老年对照组、20周龄二至丸用药低剂量组和高剂量组。用药30 d后,进行腹腔注射孕马血清促性腺激素(20 IU/只),2 d后给予人绒毛膜促性腺激素(10 IU/只),干预12 h后观察卵母细胞腺苷三磷酸(ATP)、活性氧(ROS)含量及线粒体的数目、形态,检测线粒体动态调控蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)、视神经萎缩蛋白1(OPA1)、PTEN诱导蛋白激酶1(PINK1)的蛋白表达水平。结果:和青年对照组相比,老年对照组卵巢卵母细胞ATP的含量减少(P<0.05),细胞内线粒体数量下降,结构紊乱,部分呈空泡化,PGC-1α、OPA1及PINK1蛋白水平下降(P<0.05);二至丸低、高剂量组可提高老年大鼠卵母细胞ATP的浓度(P<0.05),增加细胞内线粒体含量、改善结构及减少ROS的生成(P<0.05),促进PGC-1α、OPA1和PINK1的表达(P<0.05)。结论:二至丸可以改善衰老卵巢内的卵母细胞线粒体的结构和功能,提高线粒体自我更新以达到修复自然衰老卵母细胞的作用。; 益敏辉王永峰郝小白唐虹李林霞; 关键词：二至丸线粒体能量代谢

亚甲基蓝改善脑炎性衰老大鼠认知功能及机制探索: 2024年; 目的探讨亚甲基蓝(MB)改善脑炎性衰老大鼠认知功能及机制。方法选用健康12月龄SD大鼠38只,随机分为健康对照组8只,脂多糖组、MB溶剂组和MB组各10只。建立脂多糖诱导的脑慢性炎性衰老模型,MB经皮下缓释泵注射1周[0.5 mg/(kg·d)]。采用T型迷宫实验和新物体识别实验测试大鼠的空间学习记忆;使用免疫荧光染色检测大鼠海马CA1区小胶质细胞和星形胶质细胞的激活;应用酶联免疫吸附测定试剂盒检测炎性因子白细胞介素(IL)1β和IL-6的释放;检测海马CA1区神经元死亡数量。结果脂多糖组和MB溶剂组探索新、旧物体时间比较无显著差异(P>0.05),MB组探索新物体时间显著多于旧物体[(22.50±4.32)s vs(11.60±3.01)s,P=0.000]。与健康对照组比较,脂多糖组和MB溶剂组新臂交替选择率、神经元核抗原(NeuN)表达显著降低,离子钙接头蛋白1(Iba-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达和IL-1β、IL-6表达显著升高(P<0.05)。与MB溶剂组比较,MB组新臂交替选择率、NeuN表达显著升高,Iba-1、GFAP表达和IL-1β、IL-6表达显著降低(P<0.05)。结论MB皮下给药能显著抑制脂多糖诱导的脑炎性衰老对空间学习记忆的损害,其机制可能与MB对炎性小胶质细胞的抑制以及海马体神经元保护紧密相关。; 王剑涛赵旭东邓丽葛梦君高贝贝李雷; 关键词：亚甲蓝脂多糖类

有氧运动上调硫氧还蛋白系统抑制衰老大鼠心肌细胞凋亡: 2024年; 背景:研究表明,心肌细胞凋亡与心脏功能减退及心脏衰老过程密切相关,适宜的运动可以改变心力衰竭患者的心泵功能以及减轻衰老引起的心肌细胞凋亡、肥大和纤维化损伤。目的:探究长期有氧运动对衰老大鼠心肌细胞凋亡及硫氧还蛋白系统的影响。方法:选取雄性SD大鼠36只,按照鼠龄分为青年组(3月龄)、中年组(9月龄)、老年组(18月龄),每组12只;每组又分为安静、运动2个亚组,每组6只,安静组常规饲养,运动组进行有氧运动训练(45 min/d,5 d/周,训练10周)。末次训练后24 h,采用ELISA法检测大鼠血清肌钙蛋白Ⅰ和血清肌酸激酶同工酶MB水平,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡,Western Blot检测大鼠心肌组织中Bax、Bcl-2、Caspase 3、硫氧还蛋白1、硫氧还蛋白2、硫氧还蛋白还原酶1、硫氧还蛋白还原酶2、硫氧还蛋白相互作用蛋白、凋亡信号调节激酶1、P38丝裂原活化激酶的蛋白表达。结果与结论:(1)老年安静组大鼠血清肌钙蛋白Ⅰ和肌酸激酶同工酶MB水平高于青年安静组、中年安静组、老年运动组(P <0.01),老年运动组大鼠血清肌钙蛋白Ⅰ和肌酸激酶同工酶MB水平高于青年运动组、中年运动组(P <0.01);(2)无论是安静状态还是运动训练后,随着鼠龄的增加,大鼠凋亡心肌细胞数量及Bax、Caspase 3蛋白表达逐渐升高,Bcl-2蛋白表达逐渐降低;与同龄段安静组相比,运动组大鼠凋亡心肌细胞数量及Bax、Caspase 3蛋白表达均不同程度降低,Bcl-2蛋白表达均不同程度升高;(3)老年安静组大鼠心肌硫氧还蛋白1、硫氧还蛋白2、硫氧还蛋白还原酶1、硫氧还蛋白还原酶2蛋白表达低于青年安静组、中年安静组、老年运动组(P <0.05,P <0.01);老年运动组大鼠心肌硫氧还蛋白1、硫氧还蛋白2、硫氧还蛋白还原酶2蛋白表达低于青年运动组(P <0.05,P <0.01),硫氧还蛋白还原酶1、硫氧还蛋白还原酶2蛋白表达低于中年运动组(; 徐政赵晓琴陈肖丹王嘉璞鲍粉苗于亮李俊平魏延; 关键词：有氧运动衰老大鼠细胞凋亡硫氧还蛋白

温和灸足三里穴对自然衰老大鼠肾组织p16 DNA甲基化的影响被引量：1: 2024年; 目的观察温和灸足三里穴对自然衰老大鼠肾组织p16 DNA甲基化的调控作用及潜在机制。方法将Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为12月龄组、24月龄组和艾灸组。24月龄组和艾灸组制备自然衰老模型。12月龄组和24月龄组大鼠不予治疗,待相应时间取材;艾灸组采用温和灸足三里穴至24月龄取材。采用免疫荧光法观察3组大鼠肾组织衰老相关标志物β-半乳糖苷酶的表达。采用酶联免疫吸附法和免疫组织化学法检测3组大鼠肾组织衰老相关p16蛋白及甲基转移酶[甲基转移酶3a(DNA methyltransferase 3a,Dnmt3a)和甲基转移酶3b(DNA methyltransferase 3b,Dnmt3b)]蛋白的表达。采用定量反转录聚合酶连锁反应(quantitative real time-polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测3组大鼠肾组织端粒长度、肾组织衰老相关p16 mRNA及甲基转移酶(Dnmt3a和Dnmt3b) mRNA表达。采用重亚硫酸盐测序技术检测3组大鼠肾组织p16 DNA CpG岛甲基化程度。结果与12月龄组比较,24月龄组大鼠肾组织β-半乳糖苷酶表达、端粒长度的损耗及衰老相关p16蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05),24月龄组大鼠肾组织Dnmt3a和Dnmt3b蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05)。与24月龄组比较,艾灸组大鼠肾组织β-半乳糖苷酶表达、端粒长度的损耗及肾组织衰老相关p16蛋白和mRNA表达显著降低(P<0.05),艾灸组大鼠肾组织Dnmt3a和Dnmt3b蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论温和灸可通过影响自然衰老大鼠肾组织衰老相关甲基转移酶的表达调控p16 DNA CpG岛整体甲基化水平,降低肾组织p16蛋白及mRNA在衰老机体肾组织的表达,延缓肾组织衰老进程。; 刘文博赵舒羽殷之光杨秋红崔云华黄艳焦丹丽吴焕淦赵琛; 关键词：温和灸艾条灸衰老 DNA甲基化

基于PI3K/AKT通路探讨左归丸改善卵巢衰老大鼠卵巢生殖干细胞干性的机制: 2024年; 目的基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路探讨左归丸通过缝隙连接蛋白43(Cx43)磷酸化改善卵巢衰老大鼠卵巢生殖干细胞(OSCs)干性的机制。方法将8周龄雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、脱氢表雄酮(DHEA)组、左归丸组,每组6只。采用环磷酰胺腹腔注射15 d复制卵巢衰老大鼠模型。模型复制结束后,DHEA组大鼠灌胃DHEA 8.1 mg·kg^(-1),左归丸组大鼠灌胃左归丸1.85 g·kg^(-1),每日1次,连续30 d。采用HE染色法观察大鼠卵巢组织病理变化及各级卵泡计数;ELISA法检测大鼠血清抗缪勒管激素(AMH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_(2))水平;Western Blot法检测卵巢组织中相关蛋白(PCNA、MVH、Oct4、Cx43、p-Cx43、EGFR、AKT、p-AKT)的表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量明显下降(P<0.05),卵巢湿质量明显降低(P<0.05),始基卵泡数显著减少(P<0.01);血清FSH水平显著升高(P<0.01),E_(2)、AMH水平呈下降趋势(P>0.05);卵巢组织中Oct4、MVH、PCNA、EGFR、p-AKT/AKT、p-Cx43(Ser368)/Cx43、Cx43蛋白表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,左归丸组大鼠体质量明显升高(P<0.05),卵巢湿质量、卵巢指数均显著升高(P<0.01),始基卵泡数显著增加(P<0.01);血清E2水平明显升高(P<0.05);卵巢组织中Oct4、MVH、PCNA、EGFR、p-AKT/AKT、p-Cx43(Ser368)/Cx43、Cx43蛋白水平表达均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论左归丸可能通过维持OSCs干性改善卵巢衰老,其作用机制与PI3K/AKT信号通路及缝隙连接蛋白磷酸化相关。; 梁蕴仪陈婷婷曾丽华李祖昂李堉成朱玲; 关键词：左归丸卵巢衰老缝隙连接蛋白

抗衰延年方对衰老大鼠学习记忆及细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax表达的影响被引量：1: 2024年; 目的通过观察抗衰延年方对衰老大鼠细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax表达的影响,探讨抗衰延年方延缓衰老的可能机制。方法健康SD雄性大鼠40只,将其随机分为正常组、衰老模型组、中药组和吡拉西坦组;正常组不做任何处理,衰老模型组、中药组和吡拉西坦组每日颈背部皮下注射D-半乳糖500 mg/kg,连续注射30 d;经过30 d治疗后以Morris水迷宫进行大鼠行为学测试后取材应用原位杂交法检测其Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠行动迟缓,逃避潜伏期增多(P<0.05),Bcl-2 mRNA的表达降低(P<0.05),Bax mRNA的表达增高(P<0.05);与模型组相比,中药组大鼠活力增强,逃避潜伏期时间减少(P<0.05),Bcl-2 mRNA的表达增强(P<0.05),Bax mRNA的表达降低(P<0.05)。结论抗衰延年方可改善衰老大鼠空间学习记忆能力,其机制可能与其上调抑制细胞凋亡因子Bcl2表达,下调促凋亡关键因子Bax表达有关。; 李志亮周敏唐中生蒙潇王佑乾韦杰尹; 关键词：衰老原位杂交法 BCL-2/BAX

艾灸“足三里”对衰老大鼠氧化应激和肠道菌群的影响被引量：3: 2024年; 目的:观察艾灸“足三里”对亚急性衰老模型大鼠氧化应激和肠道菌群的影响,探讨艾灸延缓衰老的可能作用机制。方法:将30只SD大鼠随机分为空白组、模型组、足三里组,每组10只。模型组、足三里组大鼠按500 mg/kg剂量腹腔注射D-半乳糖制备亚急性衰老模型,每日1次,连续42 d。足三里组艾灸双侧“足三里”,每日1次,每次每穴3壮,连续28 d。采用ELISA法检测各组大鼠干预后血清超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量;采用16S rRNA测序检测各组大鼠肠道菌群。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清SOD含量减少(P<0.01),MDA含量增加(P<0.01);与模型组比较,足三里组大鼠血清SOD含量增加(P<0.01),MDA含量减少(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠Chao1、Shannon指数降低(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,足三里组大鼠Chao1、Shannon指数升高(P<0.01,P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠厚壁菌门、密螺旋体属_2及毛螺菌科NK4A136相对丰度升高(P<0.05,P<0.01),普雷沃氏菌科UCG-003相对丰度及拟杆菌门与厚壁菌门相对丰度比值(B/F值)降低(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,足三里组厚壁菌门、密螺旋体属_2相对丰度降低(P<0.01),拟杆菌门、乳杆菌属、普雷沃氏菌科UCG-003相对丰度及B/F值升高(P<0.05,P<0.01)。结论:艾灸“足三里”可有效改善衰老大鼠氧化应激水平,调节肠道菌群结构,维持肠道菌群微生态平衡,从而起到延缓衰老的作用。; 赵彩娇谌桑妮李鑫苗芙蕊曾念鹏邝玉莲; 关键词：衰老艾灸足三里氧化应激肠道菌群

枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响: 2024年; 目的探索枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响。方法将60只8周龄♂SD大鼠中的50只(空白组10只)颈部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg^(-1),持续8周建立亚急性衰老大鼠模型,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)观察衰老细胞,HE观察睾丸形态,ELISA检测血清中睾酮(testosterone,T)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平,免疫组化和Western blot检测衰老、氧化损伤和Nrf2/ARE通路相关因子表达。结果模型鉴定成功后,经枸杞籽油干预,改善了睾丸形态,下调β-gal和γH2AX表达;升高血清中SOD、GSH以及T、FSH水平及降低MDA和LH水平(P<0.05);上调睾丸组织Nrf2、GCLC、NQO1和SOD2蛋白表达水平(P<0.05)以及支持细胞中Nrf2核表达。结论枸杞籽油激活亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE信号通路表达,降低其氧化损伤,改善其激素水平。; 田瑞莹邢莎莎虎娜马文欣刘畅刘自钰马彪李佳阳刘虎军白长财陈冬梅马会明; 关键词：亚急性衰老氧化应激生殖激素睾丸

针刺脾俞对衰老大鼠腰骨骼肌萎缩Akt/NF-κB信号通路的影响: 2024年; 目的观察针刺脾俞对衰老大鼠Akt/NF-κB信号通路的影响,探讨针刺脾俞改善骨骼肌萎缩以防治腰痛的可能机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、阳性药物组,每组8只。空白组大鼠每日项背部皮下注射0.9%生理盐水[300 mg/(kg·d)],其余3组大鼠每日项背部皮下注射等量的D-半乳糖,连续12周。第9周开始,针刺组取双侧脾俞进行针刺,阳性药物组采用混合氨基酸灌胃,连续4周。用HE染色对骨骼肌组织形态进行观察,TdT-mediated dUTP nick-end labeling(TUNEL)法检测骨骼肌细胞凋亡情况,ELISA检测IL-1β、IL-6T、NF-α释放量,Western Blot检测Akt、p-Akt、NF-κB、p-NF-κB的蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组骨骼肌细胞间隙变宽,部分肌细胞圆形化,肌细胞凋亡数量增多,炎性因子IL-1β、IL-6T、NF-α水平显著上升(P<0.001、P<0.01和P<0.05),p-Akt、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达水平升高(P<0.001);与模型组比较,针刺组和阳性药物组,肌间隙窄,肌细胞排列更紧密,凋亡数量减少,炎性因子IL-1β、IL-6T、NF-α水平下降(P<0.01、P<0.01和P<0.05),p-Akt、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达水平下调(P<0.001)。结论针刺脾俞可改善D-半乳糖诱导的骨骼肌衰老,并通过抑制Akt/NF-κB信号通路,降低炎症反应,减少骨骼肌细胞凋亡,这可能是针刺脾俞治疗腰痛的潜在作用机制之一。; 陈艺敏杨正瑜陈群金京郑其开王和鸣陈少清; 关键词：针刺脾俞

青蒿鳖甲汤加减方对围绝经期衰老大鼠模型皮肤屏障功能的影响被引量：1: 2024年; 目的探讨青蒿鳖甲汤加减方对围绝经期衰老大鼠模型皮肤屏障功能的影响。方法采用随机数字表法将雌性大鼠分为假手术组、模型组、青蒿鳖甲汤加减方组(中药组),每组各6只。卵巢切除后连续灌胃热性中药和饲喂“五三粉”饲料建立肝肾阴虚型围绝经期大鼠模型,结合血清性激素变化和体质量进行模型验证。采用青蒿鳖甲汤加减方干预2周后,用酶联免疫血清法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)检测各组大鼠血清雌激素(Estradiol,E2)、卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成激素(Luteinizing hormone,LH)含量并进行比较。用MPA6多功能皮肤测试仪测皮肤角质层含水量(Stratum corneum hydration,SCH)及经表皮水分流失量(Transepidermal water loss,TEWL),用逆转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测各大鼠皮肤组织中水通道蛋白3(Aquaporin 3,AQP3)mRNA的相对表达量。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清中E2含量显著下降(P<0.01),FSH和LH含量显著上升(P<0.01);干预前,与假手术组比较,模型组大鼠SCH显著下降(P<0.01),TEWL显著上升(P<0.05);与假手术组大鼠皮肤组织相比模型组大鼠皮肤组织表皮层厚度变薄,真皮层厚度降低,胶原纤维减少、增粗老化,排列紊乱,腺体、毛囊萎缩;大鼠皮肤组织中AQP3mRNA的相对表达量明显降低(P<0.05)。与模型组比较,中药组大鼠血清中E2含量明显上升(P<0.05),FSH、LH含量显著下降(P<0.05),干预后,与模型组比较,中药组大鼠SCH明显升高,TEWL明显下降(P<0.05);与模型组相比中药组大鼠皮肤真皮层厚度增加,胶原纤维增多,腺体和毛囊较多;与模型组相比中药组大鼠皮肤组织中AQP3mRNA的相对表达量明显升高(P<0.05)。结论青蒿鳖甲汤加减方在滋阴养血润燥之功的基础上,提高皮肤屏障功能,且能通过提高AQP3mRNA的表达,增加皮肤角质层含水量,改善围绝经期�; 张普李彤武亦阁刘爱玲周光; 关键词：肝肾阴虚围绝经期皮肤衰老

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