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猪源CXCL17的原核表达及其对猪巨噬细胞的趋化作用
2024年
[目的]本研究旨在探究CXC趋化因子配体17(CXC motif chemokine ligand 17,CXCL17)对巨噬细胞的趋化作用并解析其分子机制。[方法]构建表达猪CXCL17蛋白的重组菌,该菌经IPTG诱导后高效表达CXCL17蛋白,并主要以包涵体形式存在;包涵体经过变性、纯化和复性获得重组蛋白,利用SDS-PAGE和Western blot对纯化的CXCL17蛋白进行验证。通过CCK-8法筛选CXCL17蛋白对猪巨噬细胞的最佳作用浓度范围,并以此设置浓度梯度处理猪巨噬细胞,用Transwell试验检测CXCL17对巨噬细胞的趋化活性。通过免疫荧光和Western blot检测细胞微丝骨架的变化及相关通路的激活情况,以揭示CXCL17趋化巨噬细胞迁移的作用机制。[结果]重组菌在IPTG终浓度为1.0 mmol·L^(-1)及37℃诱导条件下表达7 h,获得高表达量的重组猪CXCL17蛋白。该蛋白纯化后的纯度可高达95%。重组猪CXCL17蛋白可以剂量依赖诱导猪巨噬细胞迁移,其机制为通过激活微丝骨架下游的LIMK/Cofilin信号通路引起细胞微丝骨架重排,促进细胞微丝骨架解聚、聚合,从而有利于巨噬细胞迁移。[结论]本研究重组表达了猪CXCL17蛋白,并发现CXCL17蛋白调控细胞微丝骨架诱导猪巨噬细胞迁移的分子机制,为CXCL17作为黏膜免疫增强剂提供了试验依据。
齐佳欣钟秋刘芮伶郑健李昱辰杨倩
关键词:原核表达巨噬细胞黏膜免疫
乳酸在脓毒症炎性骨髓中性粒细胞趋化作用的研究
目的:探讨脓毒症(Sepsis)时乳酸对免疫炎症及骨髓内皮细胞通透性的影响,明确其对促中性粒细胞(PMN)趋化作用的机制,为脓毒症发病研究提供实验数据。  方法:1、临床研究:分为Spesis组和健康对照组(各10例),...
玉桥
关键词:脓毒症乳酸水平中性粒细胞趋化作用
UhpABC调控CheY降低杀鱼爱德华菌趋化作用的研究
叶廷崎
Phe112、Trp86和Tyr108对CCR5与趋化因子CCL5结合及趋化作用的影响
2023年
目的:揭示人趋化因子受体5(human C-C chemokine receptor 5,hCCR5)中与人趋化因子配体5(hu⁃man C-C motif chemokine ligand 5,hCCL5)结合并影响hCCL5趋化作用的关键氨基酸。方法:根据生物信息学分析提示的信息,采用定点突变技术,对CCR5受体中Phe112、Trp86和Tyr108分别构建了CCR5-F112A、CCR5-W86A和CCR5-Y108A突变体质粒,并通过慢病毒感染技术感染人胚胎肾细胞HEK293T,分别获得了CCR5-F112A、CCR5-W86A和CCR5-Y108A突变体细胞株。通过激光共聚焦显微镜技术,进一步检测了这些突变对CCR5受体与趋化因子CCL5结合的影响。此外,通过CCK8细胞增殖和Transwell侵袭实验,检测了这些突变对趋化因子CCL5对CCR5受体所带来的肿瘤细胞增殖和侵袭的影响。结果:实验结果显示,CCR5中的Phe112或Trp86位点发生突变后,CCR5受体与CCL5的结合能力以及CCL5的趋化作用均显著减弱,但Tyr108并不显著。结论:CCR5受体中Phe112和Trp86是影响CCR5与CCL5结合的关键氨基酸。此外,这些构建的突变体,也可为进一步揭示CCL5/CCR5生物轴对其在肿瘤疾病中重要生物学功能的研究提供实验研究工具。
宋晓旭陈玲于晶
关键词:CCR5CCL5定点突变肿瘤生长肿瘤侵袭
Rg1皂苷单体对人参锈腐病菌(Ilyonectria robusta)的趋化作用及酶活性的影响
2022年
收集吉林省人参主产区锈腐病病样,对其进行病原菌的分离鉴定,确定优势病原菌。采用菌丝生长速率法、孢子萌发法、菌丝干质量测量法3种方法相结合,测定Rg1不同质量浓度条件下对人参锈腐病菌(Ilyonectria robusta)的致病力影响。通过测定施加不同质量浓度Rg1后人参粗壮柱孢菌(I.robusta)侵染相关酶活力测定试验确定最佳Rg1添加量。开展了Rg1最适质量浓度条件下,pH值以及碳氮源对人参锈腐病菌菌丝生长的影响。研究结果表明,当Rg1质量浓度为2 mg/L时对粗壮柱孢菌的生长具有较强的促进作用。在此条件下,病原菌最适生长pH值为5.0,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为硝酸钾。明确了Rg1对人参锈腐病菌(I.robusta)具有明显的趋化性。
陈彦霏张善铭许永华宫赫阳田义新张连学卢宝慧
关键词:趋化作用酶活测定
虫体抗原与细胞因子对两型棘球绦虫-宿主肝脏界面淋巴细胞/浆细胞趋化作用的研究
目的:棘球蚴病(Echinococcosis)是棘球绦虫幼虫(metacestode)寄生于中间宿主肝脏、肺脏等器官引起的一种人兽共患寄生虫病,呈世界性流行,严重危害人类生命健康。人类棘球蚴病主要包括两种类型,分别是由细...
张慧
关键词:棘球蚴病细胞因子淋巴细胞浆细胞趋化作用
溃疡性结肠炎中B细胞对巨噬细胞趋化作用的初步研究被引量:4
2022年
目的观察B细胞与巨噬细胞在溃疡性结肠炎疾病进展过程中在结肠组织中的浸润比例变化,探讨两种细胞间趋化作用机制。方法使用经典氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(azoxy-methane/dextran sodium sulfate,AOM/DSS)小鼠溃疡性结肠炎癌变模型作为研究对象,分别获取不同疾病阶段小鼠外周血及结肠组织,利用流式细胞法检测免疫细胞比例,利用real-time PCR法及免疫荧光法检测趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP1/CCL2)。结果随着溃疡性结肠炎相关结肠癌小鼠疾病进展,结直肠组织中B细胞和巨噬细胞的浸润比例逐渐增加,而当B细胞缺乏时,巨噬细胞的浸润会明显减少。B细胞是巨噬细胞的趋化因子CCL2的重要来源之一。结论在溃疡性结肠炎疾病进展过程中,B细胞可通过上调表达CCL2趋化巨噬细胞至结直肠组织。
张兴华邢洁孙灿张希王拥军
关键词:溃疡性结肠炎B细胞巨噬细胞
梅毒螺旋体重组蛋白Tp0768通过TLR2/ER应激途径增强HUVECs促中性粒细胞趋化作用
目的:本研究以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为靶细胞,探讨了梅毒螺旋体重组蛋白Tp0768增强HUVECs促进中性粒细胞趋化作用,并确定了TLR2和ER应激等信号分子在HUVECs趋化因子分泌中的作用,为研究Tp076...
曹婷
关键词:梅毒螺旋体趋化
DLX5对牙源性间充质干细胞迁移及趋化作用的研究
2022年
目的 探究distal-less homeobox 5 (DLX5)对牙源性间充质干细胞(dental tissue-derived mesenchymal stem cells, DT-MSCs)迁移及趋化作用。方法 利用逆转录病毒对根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla, SCAPs)进行转染,构建稳定过表达及敲减DLX5的细胞系。通过体外细胞划痕实验、transwell实验,探究DLX5对SCAPs迁移及趋化的影响。进一步观察DLX5过表达的SCAPs的条件培养基对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells, PDLSCs)迁移及趋化的影响。结果 (1)逆转录病毒转染DLX5过表达的质粒后,DLX5在SCAPs中有效过表达;逆转录病毒转染DLX5敲减的质粒后,有效抑制了DLX5在SCAPs中的表达,与对照组相比,差异具有显著性。(2)过表达DLX5能明显促进SCAPs的迁移及趋化能力。(3)敲减DLX5能明显抑制SCAPs的迁移及趋化能力。(4)过表达DLX5的SCAPs的条件培养基促进了PDLSCs的迁移及趋化能力。结论 DLX5对SCAPs的迁移及趋化具有正向调控作用,过表达DLX5的SCAPs条件培养基可以促进PDLSCs的迁移及趋化能力。
武涛涛张钰珩郑小雨刘畅马华瑞高润涛
关键词:迁移趋化条件培养基
软坚清脉颗粒促进骨髓间充质干细胞增殖及趋化作用的实验研究
目的:探讨软坚清脉颗粒促进骨髓间充质干细胞的增殖及其向血管内皮细胞趋化的影响。挖掘软坚清脉颗粒治疗动脉硬化闭塞症的可能作用机制。方法:实验一:首先采用血清药理学方法制备软坚清脉颗粒含药血清。分离骨髓间充质干细胞(BMSC...
宗媛
关键词:骨髓间充质干细胞内皮细胞趋化

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顾大勇
作品数:217被引量:621H指数:12
供职机构:深圳市第二人民医院
研究主题:基因芯片 肺微血管内皮细胞 表面等离子体共振 纳米金 疟疾
李取生
作品数:120被引量:1,102H指数:20
供职机构:暨南大学
研究主题:松嫩平原 重金属 松嫩平原西部 植物根际 土壤
陈莉
作品数:144被引量:453H指数:11
供职机构:中国人民解放军
研究主题:肺微血管内皮细胞 外周血淋巴细胞 血液流变学 LPS PMN
曾祥元
作品数:117被引量:363H指数:10
供职机构:成都军区总医院
研究主题:肺微血管内皮细胞 血液流变学 多抗甲素 LPS PMN
文景芝
作品数:169被引量:1,298H指数:19
供职机构:东北农业大学
研究主题:大豆疫霉 大豆疫霉菌 大豆 大豆疫霉根腐病 生理小种