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用于精准快速鉴定水稻转基因后代纯合株系的扩增引物及其鉴定方法
本发明提供用于精准快速鉴定水稻转基因后代纯合株系的扩增引物及其鉴定方法,根据载体插入基因组的情况,在单拷贝株系中T‑DNA插入位点的两侧侧翼序列分别设计跨插入位点的引物wing F/R,同时在T‑DNA区域设计一对引物m...
郭芾舒庆尧曾文卓汪庆钱秋冯云艳
高温胁迫下陆地棉GhCIPK6转基因后代生理生化分析
2023年
【目的】研究高温胁迫条件下陆地棉GhCIPK6转基因后代幼苗体内光合特性指标、抗性指标、植物激素的变化,为陆地棉响应高温胁迫奠定基础。【方法】以构建GhCIPK6转基因后代超表达、RNAi和对照野生型为材料,采用温室培养的方法,在4、12、24、48 h测定生理生化指标。【结果】通过幼苗叶片比较,高温下超表达叶片已经发黄,出现大量斑点,野生型叶片发黄程度次之,RNAi叶片只轻微发黄;光合特性中,高温胁迫下随着时间延长净光合速率、气孔导度、蒸腾速率、细胞间CO_(2)浓度均呈先下降后上升,超表达材料在光合指标中增幅较慢,RNAi和野生型增幅较快,叶绿素相对含量变化趋势缓慢;在抗性指标中,高温胁迫下,超表达随着时间延长MAD含量逐渐增加,SOD含量呈先增加后降低后上升,POD含量表现出较高水平,RNAi中MAD含量呈先增加后下降,SOD含量呈先上升后下降,POD含量缓慢增加,可溶性蛋白含量和Pro含量在整个时期相对呈现较高的水平;植物激素中,随着时间延长超表达材料IAA含量呈上升趋势,ABA含量较低,JA含量先缓慢增加后下降,SA先增加后下降,RNAi材料中IAA含量逐渐上升,ABA含量呈先增加后下降,JA含量先增加后下降,SA含量先下降后上升后下降,野生型中IAA含量先上升后下降,ABA含量呈先上升再下降后上升,JA含量先增加后下降,SA含量先下降后上升后下降。3种材料抗高温能力由强到弱为RNAi,野生型,超表达。【结论】在高温下可通过提高蒸腾速率来减弱逆境胁迫的危害,提高生长素含量来积极调控植物生长,提高细胞的渗透调节能力来减轻细胞遭受的损伤。
王辉郭金成宋佳张庭军何良荣
关键词:陆地棉高温胁迫生理生化
一种座因子载体及获得其无选择标记转基因后代的方法
本发明涉及一种座因子载体及获得其无选择标记转基因后代的方法,该载体通过以下步骤构建:1)将绿色荧光蛋白基因(GFP)、红色荧光蛋白基因(mCherry)潮霉素抗性选择标记基因(HPT)、来源于玉米的Ac座酶基因(Ac...
瞿绍洪李莘潘龙玉毕冬玲李利华田旭丹王岚岚龙文莉许赵蒙刘中来赵建华邹小维高晓庆杨海河曲海艳
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花生AhPEPC1基因抑制表达的转基因后代录组分析被引量:1
2019年
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvatecarboxylase,PEPC)是控制油料作物种子中蛋白质/油脂含量比率的一个关键酶。本研究检测了花生AhPEPC1基因抑制表达的转基因株系种子含油量,与非转基因花生相比,转基因花生种子含油量提高了5.7%~10.3%。利用录组测序(RNA-Seq)技术分析花生中AhPEPC1基因的抑制表达是否影响其他基因的功能。结果表明,录组分析筛选到110个基因差异表达,其中25个基因上调表达,85个基因表达下调。对110个差异表达基因进行了KEGG富集分析,其中有34个基因成功获得了KEGG注释,发现氨基酸的生物合成途径中有2个基因(Aradu.M0JX8,Aradu.FE0Z7)下调表达。利用荧光定量PCR分析了15个DEG(differential expressed gene)在非转基因对照和转基因花生种子中的表达情况,发现其趋势与录组测序结果基本一致。研究结果可在一定程度上解析AhPEPC1基因调控花生种子含油量的分子机制。
潘丽娟陈娜陈明娜王通王冕陈静杨珍万勇善禹山林迟晓元刘风珍
关键词:花生转基因
大豆真核翻译起始因子eIFE4基因的功能验证及转基因后代的抗病性选择
大豆[Glycine max(L.)Merr.]起源于中国,在我国已有五千多年的栽培历史,是全球重要的油料作物和粮食作物之一。大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)属于马铃薯Y病毒属,SMV广泛...
落金艳
关键词:大豆花叶病毒抗性鉴定
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花生AhFAD2基因抑制表达的转基因后代分析被引量:4
2018年
FAD2(Δ^(12) fatty acid desaturase,Δ^(12)FAD或FAD2)是催化油酸在脂肪酸碳链Δ^(12)位脱氢生成亚油酸的关键酶。在花生中,FAD2酶活性下降或失活可提高籽粒中油酸的相对含量,改善花生籽粒及制品的品质和氧化稳定性。通过将种子特异性表达Lectin启动子和Ca MV35S启动子驱动的倒位重复Ah FAD2基因RNAi干扰结构入花生,获得了以丰花1号(FH1)和花育23(HY23)为受体、携带上述2种化结构、稳定遗传的花生转基因纯合体株系,转基因花生主要农艺性状与非转基因对照基本一致。实时荧光定量分析发现,各转基因株系发育种子中Ah FAD2基因录水平普遍下调。气相色谱法进一步测定了部分转基因后代株系种子的脂肪酸含量及组成,籽粒中油酸含量分别平均提高了15.09%(HY23为受体)、36.40%(FH1为受体),相应地,亚油酸含量平均下降了16.19%、29.81%,油亚比平均增加了38.02%、98.10%。各转基因株系的油酸含量显著提高;且在以FH1为受体的转基因株系后代籽粒以及种子特异性启动子驱动的化结构中,RNAi的抑制效果更明显。通过RNAi技术抑制花生FAD2基因的表达,可以有效提高花生籽粒油酸含量。该技术体系可以为花生品质育种提供借鉴。
徐平丽唐桂英唐桂英柳展基毕玉平
关键词:花生RNA干扰转基因
与SMV--P3互作的GmEF1A和GmVATP的大豆遗传化及转基因后代抗SMV鉴定
大豆花叶病毒(soybeanmosaicvirus,SMV)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的一种病毒,能侵染大豆并引起花叶、皱缩和坏死等症状,在全球大豆产区造成了严重的减产和品质下降。以传统育种方式培育抗SMV新...
廖文林
关键词:大豆花叶病毒
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快速筛选单拷贝转基因后代纯合家系的方法及应用
本发明属于植物转基因领域,涉及一种快速筛选单拷贝转基因后代纯合家系的方法。利用农杆菌介导的遗传化方法化载体,用southern筛选阳性单拷贝化植株,从T0代转基因株上收种子,播于苗床,取三叶期叶片,CTAB法抽提小...
林拥军陈太钰
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水稻OsSRT基因转基因后代的遗传特性及生理表现的研究
真核生物中,核小体为染色体的结构单位,它是由DNA和组蛋白组成。组蛋白存在于染色质中,为碱性蛋白质,在细胞核中起到着重要的作用。近些年蛋白质修饰成为研究的热点,包括甲基化、糖基化和乙酰化等。其中组蛋白乙酰化修饰目前研究较...
冉繁骉
关键词:水稻生理表现
水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析
2015年
为了研究水稻Os CERK2基因的功能,构建了Os CERK2基因过表达和RNAi载体,利用农杆菌介导的遗传化获得转基因植株,经多代筛选和分子检测,获得了4个超量表达的过表达纯系和2个录水平下降的RNAi纯系。转基因植株经病原微生物细胞壁成分喷雾处理,采用半定量RT-PCR方法分析转基因植株中病程相关(PR)基因的表达情况,结果发现,诱导后过表达植株中PR基因表达增强,而RNAi植株中表达下降;抗病性鉴定结果表明,过表达转基因植株对白叶枯菌致病小种PXO99的抗性增强,而RNAi植株与野生型差异不显著。结果表明,过量表达Os CERK2基因可能是水稻抗病的有效途径。
肖晓蓉苏桐慧廖华兰黎秀琼汪德锋符秀梅陈银华牛晓磊
关键词:转基因几丁质植物抗病反应

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瞿绍洪
作品数:26被引量:58H指数:5
供职机构:浙江省农业科学院
研究主题:水稻 纹枯病 接种 红色荧光蛋白 转基因水稻
赵建华
作品数:8被引量:4H指数:1
供职机构:浙江省农业科学院
研究主题:无选择标记 转基因后代 共转化 转基因水稻 潮霉素抗性
殷丽青
作品数:168被引量:800H指数:16
供职机构:上海市农业科学院
研究主题:水稻 快速繁殖 非洲菊 增殖 培养基
刘中来
作品数:11被引量:21H指数:3
供职机构:浙江省农业科学院
研究主题:无选择标记 水稻 转基因水稻 转基因后代 T-DNA
全建章
作品数:97被引量:142H指数:8
供职机构:河北省农林科学院
研究主题:谷子 锈病 基因 锈菌 抗锈