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神经生长因子促进兔骨髓间充质干细胞软骨分化并抑制肥大分化
2025年
背景:神经生长因子是一种诱导神经生长的蛋白质,能调节间充质干细胞的增殖、分化等生物学行为。目的:探讨神经生长因子对骨髓间充质干细胞成软骨分化的促进作用。方法:分离培养兔骨髓间充质干细胞,将神经生长因子通过慢病毒转染的方式转染到骨髓间充质干细胞,以转染空载病毒为对照,CCK-8法、细胞划痕实验、茜素红染色、Western blot检测神经生长因子对骨髓间充质干细胞增殖、迁移、肥大分化、成软骨分化的影响。为进一步探讨神经生长因子对骨髓间充质干细胞成软骨分化的促进作用,转染空载病毒和转染神经生长因子的骨髓间充质干细胞分别加入白细胞介素1β诱导培养14 d,Western blot检测成软骨分化、肥大分化相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8检测结果表明神经生长因子对骨髓间充质干细胞增殖没有明显影响;(2)与对照组相比,过表达神经生长因子后细胞迁移能力增强,成软骨相关蛋白Ⅱ型胶原、SOX9的表达上调(P<0.05),肥大相关蛋白Ⅹ型胶原、RUNX2的表达下调(P<0.05);(3)与空载病毒+白细胞介素1β组相比,过表达神经生长因子+白细胞介素1β组成软骨相关蛋白Ⅱ型胶原、SOX9的表达上调(P<0.05),肥大相关蛋白Ⅹ型胶原、RUNX2的表达下调(P<0.05);(4)结果表明,神经生长因子可促进骨髓间充质干细胞成软骨分化
杨治航孙祖延黄文良万喻陈仕达邓江
关键词:神经生长因子骨髓间充质干细胞软骨分化骨关节炎软骨细胞
淫羊藿苷含药血清促进3种细胞共培养体系中软骨细胞增殖和干细胞成软骨分化
2025年
背景:关节软骨损伤修复能力十分有限,组织工程技术为修复受损软骨提供了新的治疗方案,其中软骨细胞、骨髓间充质干细胞和滑膜间充质干细胞之间的相互影响和诱导作用是自体软骨损伤愈合的基础。目的:构建软骨细胞-骨髓间充质干细胞-滑膜间充质干细胞共培养体系用以模拟软骨细胞体内微环境,并探究其最佳细胞接种比例,同时观察淫羊藿苷含药血清对该体系中软骨细胞增殖和干细胞成软骨分化的影响。方法:提取、培养、鉴定大鼠膝关节软骨细胞、骨髓间充质干细胞和滑膜间充质干细胞,按不同细胞接种比例构建软骨细胞-骨髓间充质干细胞-滑膜间充质干细胞非接触共培养体系,共培养72 h后观察软骨细胞增殖活性和表型能力,选择综合效应最佳的共培养体系;用淫羊藿苷溶液(0.25 mg/m L)灌胃新西兰大白兔制备淫羊藿苷含药血清,对照组共培养体系用含体积分数为10%胎牛血清、1%双抗的高糖DMEM培养液培养,实验组共培养体系在此基础之上加入体积分数为10%淫羊藿苷含药血清进行干预,24,48 h后检测两组软骨细胞增殖活性和Ⅱ型胶原表达,14 d后采用免疫荧光染色检测骨髓间充质干细胞、滑膜间充质干细胞成软骨分化情况。结果与结论:(1)3种细胞以不同比例共培养时均可正常贴壁生长,当软骨细胞、骨髓间充质干细胞、滑膜间充质干细胞接种比例为2∶1∶1时,共培养体系中软骨细胞表现出最佳增殖活性和表型能力;(2)与对照组相比,实验组培养24 h后软骨细胞增殖活性和Ⅱ型胶原表达显著升高(P<0.01),48 h后两组仍有差异(P<0.05),培养14 d后两组骨髓间充质干细胞和滑膜间充质干细胞出现明显的软骨分化,部分细胞呈现圆形或椭圆形,胞浆Ⅱ型胶原免疫荧光染色为阳性,实验组荧光强度明显高于对照组(P<0.01);(3)结果表明,以非接触共培养方法可以成功建立软骨细�
刘琪李林臻李玉生焦泓焯杨程张君涛
关键词:滑膜间充质干细胞共培养成软骨分化
牡荆素在制备促进软骨分化产品中的应用
本发明属于医药技术领域,具体为牡荆素在制备促进软骨分化产品中的应用。牡荆素能不同程度的促进ATDC细胞的表达蛋白聚糖,增加软骨标志物Sox9的表达量和软骨标志物COL2的表达量,从而确定了牡荆素促进ATDC5细胞成软骨分...
任文杰王磊程彬峰简少钦董玉倩
IDH1突变通过影响软骨分化促进软骨肿瘤的发生
2024年
目的:研究IDH1突变在软骨肿瘤发生过程中对软骨分化能力的影响。方法:利用Sanger测序法,检测收集的人软骨肿瘤石蜡标本中IDH1的突变情况;诱导小鼠胚胎间充质干细胞向成骨细胞分化,转染IDH1 R132H位点突变的质粒,观察细胞分化情况;分离培养IDH1突变小鼠的原代软骨细胞,Real-time PCR方法检测软骨分化标志分子Sox9和Col-II以及软骨细胞肥大标志分子Runx2和Col-X基因的表达水平;构建软骨组织特异性突变的IDH1-KI小鼠,采用阿尔新蓝-茜素红全骨架染色,研究IDH1突变如何影响软骨细胞的分化功能。结果:IDH1突变是软骨肿瘤中常见的遗传学改变;IDH1 R132H位点突变之后,细胞分泌的2-HG浓度显著增高;加入成骨细胞分化诱导液之后,胚胎间充质干细胞能够向成骨细胞分化,而当IDH1 R132H位点突变后,干细胞无法正常分化;IDH1突变小鼠的软骨细胞中,软骨分化标志性分子Sox9和Col-II基因表达无差异,然而软骨细胞肥大标志性分子Runx2和Col-X基因表达显著高于野生组小鼠,利用5 mmol/L的2-HG刺激模拟IDH1突变,得到相似结果;IDH1-KI小鼠整个骨骼中软骨含量明显增多,且有明显的骨化异常。结论:IDH1突变促进了软骨细胞的生长,抑制了软骨到成骨的分化过程。
袁媛高星杨莹赵元琳张秀敏
关键词:软骨肿瘤软骨分化
异欧前胡素在制备促进软骨分化产品中的应用
本发明属于属于医药技术领域,具体为异欧前胡素在制备促进软骨分化产品中的应用,异欧前胡素能不同程度的促进ATDC细胞的表达蛋白聚糖,增加软骨标志物Sox9的表达量和软骨标志物COL2的表达量,从而确定了异欧前胡素促进ATD...
程彬峰任文杰王磊简少钦董玉倩
一种试剂盒及其在诱导hUCMSC成软骨分化中的用途
本发明公开了一种试剂盒及其在诱导hUCMSC成软骨分化中的用途,包括试剂盒本体,试剂盒本体包括成软骨分化基础培养基、第一成软骨分化培养添加剂、第二成软骨分化培养添加剂、泊洛沙姆407和透明质酸,本发明采用本试剂盒诱导的h...
苑春慧谢广宝
异欧前胡素在制备促进软骨分化药物中的应用
本发明属于属于医药技术领域,具体为异欧前胡素在制备促进软骨分化药物中的应用,异欧前胡素能不同程度的促进ATDC细胞的表达蛋白聚糖,增加软骨标志物Sox9的表达量和软骨标志物COL2的表达量,从而确定了异欧前胡素促进ATD...
程彬峰任文杰王磊简少钦董玉倩
一种用于间充质干细胞成软骨分化定量检测的方法
本发明提供一种间充质干细胞成软骨分化定量检测方法,其中番红O染料脱色液(即CPC脱色液)是由磷酸钠、柠檬酸、CPC和纯水组成,配制过程简单;该方法可高效快速地洗脱细胞内番红O染液,通过检测脱色液OD值,可准确定量与细胞结...
王智辉黄彤舸廉云飞陆晓马进刘梦丽姚惠庄敏艳
生长分化因子5诱导兔骨髓间充质干细胞的软骨分化被引量:1
2024年
背景:生长分化因子5属于转化生长因子超家族成员之一,也是关节发育的最早标志之一,对软骨修复具有重要作用。目的:探讨生长分化因子5诱导骨髓间充质干细胞向软骨分化的作用机制。方法:分离培养兔骨髓间充质干细胞,CCK-8法检测不同质量浓度生长分化因子5对骨髓间充质干细胞增殖活性的影响,RT-PCR检测不同质量浓度生长分化因子5诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化相关基因的表达;为进一步探讨生长分化因子5诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化的作用机制,加入Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV-939和激活剂Laduviglusib诱导培养14 d,RT-PCR和Western blot检测软骨相关基因和Wnt/β-catenin信号通路中相关蛋白的表达。结果与结论:①CCK-8结果表明生长分化因子5对骨髓间充质干细胞增殖没有明显影响;②生长分化因子5促进了软骨相关基因Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9的表达,其中以50 ng/mL组软骨相关基因上调明显;③加入Wnt/β-catenin信号通路激活剂Laduviglusib之后,Sox9、β-catenin和Ⅱ型胶原表达上调(P<0.05),加入Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV939之后,Sox9、β-catenin和Ⅱ型胶原表达下调(P<0.05);④综上,生长分化因子5诱导骨髓间充质干细胞向软骨分化可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。
李飞非王布雨杨治航董晓宇邓江
关键词:生长分化因子5骨髓间充质干细胞软骨分化软骨细胞WNTΒ-CATENIN
一种促进间充质干细胞的成软骨分化试剂盒及其应用
本发明提供了一种促进间充质干细胞的成软骨分化试剂盒及其应用,属于细胞培养领域。本发明发现将白芨多糖可以明显增强间充质干细胞的成软骨分化诱导效果,当白芨多糖与间充质干细胞成软骨诱导分化试剂联用时,能大幅度提升干细胞的成软骨...
崔家鸣

相关作者

杨述华
作品数:1,752被引量:5,881H指数:30
供职机构:华中科技大学同济医学院
研究主题:股骨头坏死 骨肉瘤 手术治疗 关节镜 内固定
周广东
作品数:213被引量:566H指数:14
供职机构:上海交通大学医学院附属第九人民医院
研究主题:软骨 软骨细胞 骨髓基质干细胞 组织工程化软骨 体外构建
曹谊林
作品数:647被引量:3,225H指数:29
供职机构:上海交通大学医学院附属第九人民医院
研究主题:软骨细胞 骨髓基质干细胞 种子细胞 软骨 体外构建
张宇坤
作品数:43被引量:95H指数:5
供职机构:华中科技大学同济医学院附属协和医院
研究主题:骨髓基质干细胞 基质干细胞 软骨分化 小鼠骨髓 生长分化因子5
崔磊
作品数:415被引量:2,067H指数:24
供职机构:河南科技大学医学技术与工程学院
研究主题:软骨细胞 骨髓基质干细胞 成纤维细胞 脂肪干细胞 体外构建