搜索到23294篇“ 逆转录-聚合酶链反应检测“的相关文章
- 人乳腺癌特异性基因1 mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测试剂盒的建立及应用被引量：1
- 2014年
- 目的建立人乳腺癌特异性基因1(BCSG1)mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)检测试剂盒,并评价其在乳腺癌循环肿瘤细胞检测中的应用价值。方法优化试剂盒中各组分的浓度、确定试剂盒的稳定性、灵敏度及特异性,并检测外周血样品中BCSG1 mRNA的表达水平。结果优化了试剂盒中的引物、探针,成功制备了定值标准品,通过设立阴、阳性质控品的方法,解决了试剂盒的特异性、灵敏性、准确性及质量控制等关键技术问题,特异度及准确性均为95%以上,灵敏度为100拷贝/ml(全血)。外周血标本中BCSG1 mRNA的检测结果为,12例临床确诊已转移的乳腺癌患者均为阳性,21例临床未确诊转移的乳腺癌患者中12例为阳性,其余9例为阴性,15例乳腺良性疾病患者、10例正常人均为阴性。结论建立的BCSG1 mRNA实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒具有很高的临床应用价值,可用于检测外周血样品中BCSG1mRNA的表达量,检测结果可作为乳腺癌患者诊疗过程中的重要监测指标。
- 程民沈国栋卞庚徐婷娟徐维平沈干胡世莲
- 关键词：逆转录聚合酶链反应
- 流行性腮腺炎病毒疏水蛋白基因一步法逆转录-聚合酶链反应检测方法的建立
- 2010年
- 目的建立一种简便、快速的鉴定流行性腮腺炎病毒(Mumps Virus,MuV)基因的方法,即一步法逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)。方法在MuV小疏水蛋白(Small-hydrophobin Protein,SH)基因两端设计引物,同时对所建立的一步法RT-PCR方法进行敏感性和特异性实验。结果一步法RT-PCR方法至少能检测出MuV100.7TCID50(Median Tissue Culture Infective Dose,50%组织培养感染剂量),5株MuV均呈阳性,而4株非MuV呼吸道病毒RT-PCR结果均未见阳性条带。结论一步法RT-PCR是一种快速、简便的鉴定MuV SH基因的方法。
- 常新周剑惠王爽刘桂艳陈超张晓磊崔爱丽许文波
- 关键词：流行性腮腺炎病毒敏感性特异性
- SYBR Green荧光逆转录-聚合酶链反应检测流行性腮腺炎病毒基因被引量：1
- 2009年
- 目的建立SYBRGreen荧光逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reation,RT-PCR)方法,用于检测流行性腮腺炎(腮腺炎)病毒(Mumps Virus,MuV)基因。方法针对MuV小疏水蛋白(Small Hydrophobic Protein,SH)基因保守区域设计特异性引物,优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件;并应用该方法对5株MuV进行基因检测。结果SYBRGreen荧光RT-PCR方法具有良好的敏感性和特异性,与其它呼吸道病毒均无交叉反应;检测敏感性为10TCID50/0.2ml。SYBR Green荧光RT-PCR与传统RT-PCR检测MuV的敏感性相同,但大大缩短了检测时间。并可通过对SYBR Green荧光RT-PCR产物直接测序分析,进行基因型别鉴定。结论SYBR Green荧光RT-PCR方法具有特异、敏感、快速等特点,为MuV的早期快速检测和基因型快速鉴定提供了一种新的检测技术。
- 崔爱利朱贞王常银王艳许文波
- 关键词：流行性腮腺炎病毒SYBR基因定型
- 半定量逆转录-聚合酶链反应检测肺癌组织S100C基因的表达及其原核表达载体的构建和鉴定
- 2008年
- 目的分析S100C基因在肺癌组织中的表达情况,并构建S100C蛋白的原核表达载体。方法以β-actin为内参,运用半定量RT-PCR技术检测26例肺癌组织和配对癌旁组织S100C基因mRNA的表达水平;运用RT-PCR技术克隆S100C基因的cDNA全长片段,与PET30a连接构建原核表达载体,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,进行阳性克隆筛选鉴定。结果肺癌组织中S100C mRNA表达水平低于癌旁组织(P<0.05)。成功构建了S100C原核表达载体,序列同源性达100%。结论S100C基因表达下调在肺癌的发生中可能起重要作用;成功构建了S100C原核表达载体。
- 赵向锋张慧珍金蕾杨继要刘桂芝陈景涛吴逸明
- 关键词：RT-PCR原核表达载体
- 多重逆转录-聚合酶链反应检测麻疹风疹流行性腮腺炎病毒基因的研究被引量：1
- 2005年
- 目的 探索麻疹、风疹、流行性腮腺炎 (腮腺炎 )病毒感染的快速诊断方法。方法 利用多重逆转录 聚合酶链反应 (MRT PCR)方法对麻疹、风疹、腮腺炎病毒的相关基因检测进行研究。结果 直接从麻疹疫苗沪1 91 株 ,风疹疫苗BRDⅡ株 ,腮腺炎疫苗S79株 ,冻干麻疹、腮腺炎、风疹联合减毒活疫苗及临床麻疹、风疹、腮腺炎患者的标本中 ,同时检测出麻疹、风疹、腮腺炎病毒 6 3 5bp、4 1 1bp、5 1 9bp的特异性核酸片段 ,MRT PCR 1次扩增灵敏度均可分别达到 1TCID50 。结论 该方法能特异、敏感地检测临床标本中麻疹、风疹、腮腺炎病毒 ,是快速诊断麻疹、风疹。
- 李敏红严菊英卢亦愚冯燕史雯龚黎明葛琼
- 关键词：麻疹病毒风疹病毒流行性腮腺炎病毒
- 逆转录-聚合酶链反应检测人脑星形细胞瘤中短蛋白聚糖mRNA的表达
- 2004年
- 韩晞董艳胡国汉卢亦成
- 关键词：逆转录-聚合酶链反应人脑星形细胞瘤MRNA
- 逆转录-聚合酶链反应检测风疹病毒基因被引量：7
- 2003年
- 针对风疹患者发病早期血清中特异性风疹IgM抗体阳性率低的特点 ,以及对胎儿风疹病毒感染检测的需要 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)直接从风疹减毒活疫苗BRDⅡ株、风疹GOS株、临床风疹患者的含漱液和咽拭子中检测出 411bp特异性片段 ;而麻疹、流行性腮腺炎、流行性感冒病毒均未检测出相应片段。通过对RT PCR一次产物的再次扩增 ,可以使检测的灵敏度达到 0 1TCID50 。该技术可作为风疹酶联免疫吸附试验 (ELISA)的一种补充 ,同时对控制先天性风疹综合征与优生优育工作具有积极的作用。
- 陈国亮卢亦愚严菊英
- 关键词：逆转录-聚合酶链反应风疹
- 逆转录—聚合酶链反应检测胃癌淋巴结微转移被引量：1
- 2003年
- 目的 检测胃癌常规病理检查阴性的淋巴结微转移的发生及与其它临床参考指标的关系。方法 利用逆转录—聚合酶链反应 (RT -PCR)方法检测 6 8枚胃癌胃周淋巴结癌胚抗原 (CEA)mRNA基因表达 ,同时比较RT -PCR与免疫组化 (IHC)方法的检测敏感性。结果 CEAmRNART -PCR是一种很敏感的方法 ,可以检测1/10 6个转移的癌细胞 ;检测 19例胃癌患者取材的 6 8枚胃周淋巴结 ,IHC阳性率 2 8% (19/6 8) ,RT -PCR阳性率5 7% (39- 6 8) ,两组之间差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1) ;RT -PCR阳性率与胃癌临床参考指标密切相关 ,且随着病期进展而增大。结论 CEAmRNART -PCR是比免疫组化更敏感的方法 ,可以预测胃癌淋巴结微转移 。
- 杨万勇韩跃武苏刚
- 关键词：逆转录-聚合酶链反应淋巴结微转移胃癌
- 用逆转录-聚合酶链反应检测乳腺癌患者骨髓微转移30例报道被引量：4
- 2003年
- 目的 :通过分子生物学技术检测乳腺癌患者的微转移灶。方法 :患者常规行乳癌根治术 ,在完成皮瓣游离后 ,于胸骨柄处行骨穿 ,吸取骨髓 3～ 4ml,所采骨髓行RT -PCR检测其细胞角蛋白 19(KT19)含量。切除标本常规送病理。结果 :30例患者临床病理汇报同侧腋窝淋巴结转移阳性 17例 ,胸骨骨髓KT19阳性 7性 ,占4 1.12 % ,其中 3例肿块直径≥ 5 .0cm ,位于内乳内 ,临床未触及锁骨上淋巴结肿大 ;同侧腋窝淋巴结转移阴性13例 ,胸骨骨髓KT19阳性 3例 ,占 2 3.0 7%。总阳性率 33.33%。结论 :在术中游离皮瓣后于胸骨柄处进行骨穿获取骨髓 ,并转应用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)检测细胞角蛋白 19(KT19)在胸骨骨髓中的表达 ,可以早期诊断乳腺癌的微转移。
- 张国利杨中祥王勋孙晶波和利稼
- 关键词：乳腺癌骨髓微转移
- 甲肝减毒活疫苗滴度的逆转录－聚合酶链反应检测法
- 本发明是一种检测甲肝减毒活疫苗滴度的逆转录—聚合酶链反应检测法。该法选用编码甲肝病毒结构蛋白3羧基端的基因区为目标区，设计合成引物，并严格的运用逆转录—聚合酶链反应技术对甲肝活疫苗的滴度进行检测。该技术的检测灵敏度与组织...
- 陈勇罗永能洪艳杨连华毛江森
- 文献传递
