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搜索到235篇“ 酶切分析“的相关文章

一种基于固相糖蛋白T抗原糖肽富集和酶切分析的方法: 本发明公开了一种基于固相糖蛋白T抗原糖肽富集和酶切分析的方法，包括步骤：从样本中提取蛋白；蛋白酶解获得多肽；半乳糖和N‑乙酰半乳糖氧化；酰肼树脂固定与PNGase F酶切；半乳糖苷酶处理与质谱分析。该方法获得三种结构，核...; 杨霜徐明明岳爽

利用β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶快速酶切分析中国仓鼠卵巢细胞表达的西妥昔单抗抗原结合区的聚糖比例被引量：1: 2022年; 西妥昔单抗具有较复杂的糖基化修饰,在抗原结合片段(Fab)和可结晶片段(Fc)的重链上都含有2个N-糖基化位点,其中Fab段的糖基化最为复杂,要研究清楚该位点的糖基化修饰,开发专一性切糖技术和稳定的聚糖比例分析方法是当前迫切需要解决的难题。以中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达的西妥昔单抗为研究对象,使用β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(Endo F2)开发了一种快速Fab段聚糖释放的方法,利用超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)进行了定性和聚糖比例分析。第一步对抗体原液进行非变性酶切,抗体原液经超纯水稀释后,加入糖苷酶Endo F2进行酶切,通过质谱对质量数的解析,结果表明Endo F2酶切时间5 min,Fab段的聚糖就能完全切除,而Fc段的聚糖不受影响,实现了快速酶切,而且切糖具有很好的专一性。第二步对Fab段聚糖进行比例分析,将释放的聚糖经对氨基苯甲酰胺(2-AB)荧光标记后使用超高效液相色谱联用荧光检测器(FLR)进行检测,在亲水作用色谱(HILIC)柱上得到良好的分离并可以进行稳定地聚糖比例分析。3次独立试验结果表明,酶切后的质谱图基本一致,且聚糖的比例结果也基本一致,表明Endo F2酶切方法和聚糖比例分析方法都具有较好的稳定性和可靠性。此外,通过测定来自两个不同工艺生产的样品,数据显示两者的糖谱上具有非常明显的差异,表明利用开发的方法可以实现对抗体生产工艺进行监测研究,对抗体生产工艺的评估具有非常重要的意义。; 程倩贾戴辉张博慧许俊彦邵喆黄应峰邹洵; 关键词：高分辨质谱糖基化糖苷酶西妥昔单抗

一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法: 本发明公开了一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法，包括步骤：提取得到蛋白质，然后将蛋白水解得到多肽和糖肽，接着用糖苷内切酶处理，包括①将肽段用糖苷内切酶处理，然后将糖肽氧化结合到酰肼树脂上，通过岩藻糖...; 杨霜蒋军红高子媛徐明明葛威

利用扩增片段酶切分析法检测基因组编辑的同源重组效率: 基因组编辑技术的快速发展，使得人们能够按照意愿对基因组位点进行编辑修饰，实现基因的敲入和敲除。基因组编辑技术能够利用分子生物学手段实现对基因的改造，从而帮助人们深层次地理解基因的内部结构、基因功能与生物表型之间的关系，是...; 魏思; 关键词：细胞融合同源重组

粤西地区5种荔枝nrDNA ITS基因扩增及酶切分析研究: 2015年; 对广东省粤西地区的5个荔枝品种进行核糖体DNA（rDNA）内转录间隔区（ITS）的PCR扩增,并用限制酶HhaI、HaeⅢ、EcoRⅠ、HindⅢ、RsaⅠ对扩增产物进行酶切分析。5种荔枝属植物的ITS基因序列长度为600-800bp,PCR产物经过5种酶切后,5种荔枝属植物的PCR产物均切出位于600-800bp之间的主带,妃子笑的主带与其余4种差异明显;结果表明,荔枝品种中的白糖罂、新兴、糯米糍、尚书怀4种的亲缘性比较近,妃子笑与这4种的亲缘性较远。; 黎翠萍陈玉莹袁长春黎海利刘锴栋; 关键词：荔枝 ITS基因酶切分析基因扩增

“重组质粒的转化、提取及酶切分析”综合性实验在医学检验专业分子诊断学教学中的实施被引量：1: 2013年; 本文从实验设计思路、实验实施、实验效果、实验体会等方面对"重组质粒的转化、提取及酶切分析"综合性实验在医学检验专业分子诊断学教学中的实施进行阐述,并针对实验教学中存在的问题,提出了具体的解决措施。; 李江滨林锦琼李育超侯敢; 关键词：质粒分子诊断教学

猪传染性胸膜肺炎的PCR快速诊断及基因组酶切分析被引量：1: 2011年; 为了建立猪胸膜肺炎放线杆菌(Actionbacillus pleuropneumoniae,APP)快速PCR诊断方法,试验依据APP的毒素基因Apx ⅣA的序列设计引物,对江西农业大学动物科学技术学院预防兽医学教研组保存的4个血清型APP菌株以及大肠埃希杆菌、沙门杆菌进行PCR扩增,同时对提取的4个血清型菌株的基因组DNA用EcoRⅠ酶切。结果表明:4个APP菌株均成功扩增出预期大小的基因片段,而其他G-菌没有扩增出;4个血清型菌株的基因组DNA经EcoRⅠ酶切后酶切片段有所不同。; 肖根辉宋德平王萍何后军邓舜洲张文波戴益民邬向东朱芝秀; 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌

山羊痘病毒基因组DNA的提取及酶切分析被引量：1: 2008年; 对山羊痘病毒贵州分离株(LD株和QL株)和参考株(Y株和B株),采用Vero细胞增殖和差速离心浓缩后,以SDS-蛋白酶K法提取病毒基因组DNA,以3种核酸内切酶EcoRⅠ、HindⅢ和PstⅠ进行酶切图谱分析。接种山羊痘病毒48 h^60 h后,Vero细胞呈现典型的细胞病变;病毒基因组提取样本的纯度在1.8~1.9之间,经琼脂糖凝胶电泳均出现一条纯净的DNA条带;经3种内切酶酶切后,贵州分离株的酶切图谱与参考疫苗毒株Y株基本一致,比参考弱毒株B株少3条~4条酶切片段。这为山羊痘病毒毒力基因的进一步研究奠定了基础。; 罗阿东岳筠程振涛周碧君文明; 关键词：DNA 酶切分析

黄鳝线粒体DNA的提取及其酶切分析: 2008年; 用碱裂解法从黄鳝肝脏组织中提取线粒体DNA,并对提取的线粒体DNA纯度、完整性进行了检测。结果表明,其紫外吸收比值为OD260/280在1.72～1.96之间,纯度较高,琼脂糖凝胶电泳表明提取线粒体的完整性好;用EcoRⅠ和HindⅢ对黄鳝线粒体DNA进行酶切,用琼脂糖凝胶电泳检测,均能检测出两套不同的酶切片段,证明黄鳝线粒体DNA存在多态性。; 袁思霓张碧乾; 关键词：黄鳝线粒体DNA 多态性限制性内切酶

基于生物芯片全基因组测序的酶切分析平台开发及应用: 研究人类基因组的个体差异进而了解个体疾病易感性及对药物敏感度，对个体基因组的再测序势在必行。目前实用的基因组测序方法费时费力，于是发展快速低成本的基因组测序方法正成为国际学术界研究热点。本实验室正在开发的快速低成本全基因...; 张群; 关键词：酶切分析生物信息学生物芯片; 文献传递

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