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人EGFR基因双位点突变细胞肺癌细胞株HC5720及其应用
本发明公开了一种人EGFR基因双位点突变细胞肺癌细胞株HC5720及其应用。该细胞株有EGFR基因L858R和V834L两个位点的突变,EGFR(L858R Mutant Specific)、角蛋白Pan‑Kerat...
胡野荣周杨钊谭凌
一种耐阿美替尼的细胞肺癌细胞株HCC827/AR及其应用
本发明涉及细胞生物学技术领域,尤其涉及一种耐阿美替尼的细胞肺癌细胞株HCC827/AR及其应用。所述耐阿美替尼的细胞肺癌细胞株的保藏编号为CCTCC NO:C2023317。所述耐阿美替尼的细胞株在EGFR 19...
翟林柱陶佳豪郑创杰王科张翠芬陈静林腾蛟林曼迪
EP联合方案耐药细胞肺癌细胞株的构建及机制探讨
2024年
目的构建依托泊苷(etoposide,VP-16)联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗方案(EP联合方案)耐药的细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株H446/EP,并进行耐药特性鉴定及机制探讨。方法以药物浓度递增法,使用VP-16联合DDP处理NCI-H446细胞构建H446/EP细胞株。以H446/EP与NCI-H446细胞为研究对象,MTT法检测细胞活力,计算H446/EP细胞耐药指数(resistance index,RI);细胞克隆实验、Incucyte细胞增殖(无标记)法检测细胞增殖能力;转录组学测序后,对2种细胞差异表达基因进行富集分析;Western blot检测细胞耐药、DNA损伤修复(repair of DNA damage,DDR)、自噬标志分子的蛋白表达量。结果MTT结果显示,H446/EP细胞对VP-16、DDP与DOX的RI分别为6.14、3.43与1.96;细胞克隆实验与Incucyte细胞增殖(无标记)法结果显示,H446/EP细胞增殖能力显著高于NCI-H446细胞(P<0.01);转录组学测序、通路富集分析显示差异表达基因在肿瘤化疗耐药、DDR、自噬相关通路富集;Western blot结果显示,相比NCI-H446细胞,H446/EP细胞MRP1、BCRP、RAD51、γ-H2AX及LC3-II/LC3-I蛋白表达量显著升高,p62蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论EP联合方案耐药的SCLC细胞株H446/EP构建成功,增殖能力增强;细胞外排转运蛋白表达量增加、DDR及自噬水平升高可能是SCLC对EP联合方案产生耐药的机制。
刘明菩王红梅王红梅周端方周维英
关键词:小细胞肺癌多药耐药顺铂依托泊苷
一种人ALK重排细胞肺癌细胞株HC4773及其应用
本发明公开了一种人ALK重排细胞肺癌细胞株HC4773及其应用,保藏编号为CCTCC NO:C202370。该细胞株有EML4‑ALK基因重排,重排型号为EML4‑ALK variant 3(E6;A20),为人...
胡野荣周杨钊谭凌
一种耐阿美替尼的细胞肺癌细胞株H-1975/AR及其应用
本发明涉及细胞生物学技术领域,尤其涉及一种耐阿美替尼的细胞肺癌细胞株H‑1975/AR及其应用。所述耐阿美替尼的细胞肺癌细胞株的保藏编号为CCTCCNO:C2022376。所述耐阿美替尼的细胞株在EGFR21号外...
翟林柱陶佳豪王科郑创杰张翠芬陈静林曼迪
一种耐奥希替尼的人细胞肺癌细胞株H1975/OR及其应用
本发明公开了一种耐奥希替尼的人细胞肺癌细胞株,命名为耐奥希替尼的人肺癌细胞系H1975/OR,保藏编号为CCTCC NO:C2019300,该细胞株保留了对奥希替尼敏感的EGFR exon21:c.T2573G:p....
张力潘慧袁泽占建华黄岩
扁塑藤素对细胞肺癌细胞株A549恶性生物学行为的影响
2023年
目的分析扁塑藤素(Pristimerin)对细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)细胞株A549恶性生物学行为的影响,分析可能机制。方法MTT法检测不同浓度(1、2、4、8、16μmol/L)扁塑藤素对NSCLC细胞株A549增殖的抑制作用,随机分为对照组、扁塑藤素组(扁塑藤素16μmol/L)、激活剂组[磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路特异性激活剂类胰岛素样生长因子(IGF-1)100 ng/ml]、联合组(扁塑藤素16μmol/L联合IGF-1100 ng/ml)。作用24 h后,Transwell实验检测细胞侵袭能力;血管拟态形成实验检测细胞血管生成拟态;Western blot法检测细胞p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR。结果扁塑藤素能抑制NSCLC细胞株A549的增殖,呈量效关系;与对照组比较,扁塑藤素组透膜细胞数目/视野、血管数量/视野减少(P<0.01),激活组透膜细胞数目/视野、血管数量/视野增加(P<0.01);与扁塑藤素组比较,联合组透膜细胞数目/视野、血管数量/视野增加(P<0.01);与激活剂组比较,联合组透膜细胞数目/视野、血管数量/视野减少(P<0.01)。与对照组比较,扁塑藤素组p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR降低(P<0.01),激活剂组p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR升高(P<0.01);与扁塑藤素组比较,联合组p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR升高(P<0.01),与激活剂组比较,联合组p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR降低(P<0.01)。结论扁塑藤素可抑制NSCLC细胞株A549增殖、侵袭及血管生成拟态,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT通路有关。
王小燕韩崇兰
关键词:非小细胞肺癌增殖
一种L858R突变三代TKI耐药的人细胞肺癌细胞株及其应用
本发明提供了一种L858R突变三代TKI耐药的人细胞肺癌细胞株及其应用。本发明从患者术后组织样本中提取残余获得性三代TKI一线耐药细胞株,该细胞株除携带<I>EGFR</I> 21号外显子L858R突变外,同时携带<...
李谨冯凤兰
氟西汀通过p21相关通路增加顺铂对细胞肺癌细胞株的抗肿瘤作用被引量:3
2023年
目的 探究氟西汀联合顺铂是否具有抗肺癌细胞的作用及其作用机制。方法 通过CCK8实验检测H460细胞株细胞活力,并筛选合适的氟西汀和顺铂作用浓度;通过Transwell实验评估迁移和侵袭能力;通过流式细胞仪和免疫荧光染色检测细胞周期和细胞自噬;通过Western blot检测相关蛋白的表达;通过siRNA实验沉默p21表达,验证p21通路对氟西汀联合顺铂抗肿瘤作用的影响。结果 氟西汀和顺铂影响细胞增殖、迁移、侵袭能力,两药联合可以产生更明显的抑制作用。相较于顺铂组,联合组中G0/G1期细胞比例(32.96%±4.78%vs.24.51%±3.61%,P=0.042)及自噬增加,Western blot结果显示p21及LC3蛋白在联合组中增加更为明显。挽救实验发现,敲低p21减弱了氟西汀联合顺铂对细胞侵袭能力的抑制作用(26.00±6.16 vs. 60.33±7.59,P=0.004),同时降低了联合组中G0/G1期的百分比(52.46%±2.53%vs. 44.34%±3.32%,P=0.043),p21还通过影响p62蛋白进而影响自噬。结论 氟西汀可能通过p21依赖的信号传导通路增加顺铂对肺癌细胞的敏感性,为氟西汀作为临床辅助治疗提供了有力的实验依据。
邵莎莉庄喜兵乔田奎
关键词:氟西汀顺铂P21细胞周期
苍术素调节Notch信号对EGFR-TKI耐药的细胞肺癌细胞株H1975增殖、凋亡的影响被引量:4
2023年
目的探讨苍术素对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)耐药的细胞肺癌(NSCLC)细胞株H1975增殖、凋亡的影响以及可能的作用机制。方法以人肺腺癌H1975细胞为亲本细胞,采用低浓度逐步加量诱导法构建EGFR-TKI耐药细胞株H1975/吉替尼耐药(GR)。H1975/GR细胞分为正常组(不添加任何药物)、苍术素(低、中、高)浓度组(20、40、60μmol/L苍术素)、Notch抑制剂组(7.8 nmol/L Notch抑制剂1),MTT法检测各组H1975/GR细胞增殖活力;流式细胞仪检测各组H1975/GR细胞周期分布和凋亡率;qRT-PCR和Western Blot检测各组H1975/GR细胞中Notch信号通路相关基因和蛋白表达水平。结果吉替尼抑制H1975/GR细胞的IC_(50)显著高抑制H1975细胞的IC_(50)(P<0.05),表明本研究所构建的EGFR-TKI耐药细胞株H1975/GR可以用于后续实验。药物干预48 h后,与正常组比较,苍术素(低、中、高)浓度组和Notch抑制剂组H1975/GR细胞增殖活力、G0/G1细胞比例以及细胞中Notch1、Notch3、Hes1、HEY1 mRNA和蛋白表达水平降低(P均<0.05),而G2/M细胞比例、凋亡率升高(P均<0.05),且苍术素各浓度组呈浓度依赖性(P均<0.05);与苍术素(低、中)浓度组比较,Notch抑制剂组H1975/GR细胞增殖活力、G0/G1细胞比例以及细胞中Notch1、Notch3、Hes1、HEY1 mRNA和蛋白表达水平降低(P均<0.05),G2/M细胞比例、凋亡率升高(P均<0.05);与苍术素高浓度组比较,Notch抑制剂组H1975/GR细胞G2/M细胞比例降低(P<0.05)。结论苍术素可抑制EGFR-TKI耐药的NSCLC细胞株H1975增殖,并诱导细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制可能与抑制Notch信号通路激活有关。
张琳朱琳李晨
关键词:苍术素非小细胞肺癌表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药

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施广霞
作品数:124被引量:289H指数:9
供职机构:大连医科大学
研究主题:榄香烯 榄香烯复合瘤苗 HSP70 CD3AK 树突状细胞
张明霞
作品数:4被引量:0H指数:0
供职机构:大连医科大学
研究主题:非小细胞肺癌细胞株 ASPP P53 非小细胞肺癌 顺铂
李士军
作品数:80被引量:270H指数:8
供职机构:大连医科大学附属第一医院
研究主题:血清 非小细胞 聚合酶链反应 非小细胞肺癌 P16基因甲基化
周彩存
作品数:437被引量:2,914H指数:22
供职机构:上海市肺科医院
研究主题:非小细胞肺癌 非小细胞 肺肿瘤 肺癌 晚期非小细胞肺癌
廖海
作品数:39被引量:170H指数:8
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