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杜仲提取物增强骨髓基质细胞移植对创伤性脑损伤治疗效能相关性研究: 2024年; 目的探讨杜仲(EU)提取物对骨髓基质细胞(BMSCs)生物学特性及其移植治疗创伤性脑损伤(TBI)效能的影响。方法体外实验:将C57BL/6小鼠来源BMSCs分为EU组和Control组(每组各8只),分别给予EU提取物(100μg/ml)和等量溶剂。通过相差显微镜观察和CCK-8试验检测细胞形态增殖情况。通过免疫荧光(IF)染色和定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞神经分化相关基因[Oct4、神经原纤维轻链(Nefl)、神经分化因子(Neurod1)、神经生长因子(Ngf)]表达情况。体内实验:将32只3月龄雄性C57BL/6小鼠随机分为Sham surgery组、TBI组、TBI+BMSCs组和TBI+EU_BMSCs组(每组各8只)。对TBI组、TBI+BMSCs组和TBI+EU_BMSCs组进行TBI手术,术后7 d,TBI组给予100μl PBS,TBI+BMSCs组经眶内静脉注射无特殊处理的GFP转基因小鼠来源BMSCs,TBI+EU_BMSCs组经眶内静脉注射等量EU提取物预处理14 d的GFP转基因小鼠来源BMSCs。Sham surgery组接受除TBI手术及细胞注射移植以外的其他操作。通过转棒式疲劳仪和平衡木行走试验检测运动功能。通过IF染色进行组织病理学检测。结果体外实验:EU提取物处理14 d后,相差显微镜图像分析和CCK-8试验结果显示,EU组增殖活性高于Control组(P<0.001);qRT-PCR检测显示,EU组Neurod1和Ngf mRNA表达量高于Control组(P<0.001)。EU提取物处理70 d后,EU组细胞呈神经元样形态;IF染色显示,EU组较高比例细胞表达Nefl和MAP2,而Control组未检出(P<0.001);qRT-PCR分析显示,EU组Oct4 mRNA表达量低于Control组,而Nefl、Neurod1和Ngf转录水平高于Control组(P<0.001)。体内实验:转棒式疲劳仪和平衡木行走试验显示,TBI+BMSCs组小鼠运动功能恢复明显优于TBI组(P<0.001),TBI+EU_BMSCs组小鼠运动功能改善程度较TBI+BMSCs组进一步提高(P<0.001)。脑组织IF染色显示,TBI+BMSCs组小鼠损伤灶内MAP2表达水平高于TBI组(P<0.001),TBI+EU_BMSCs组小鼠MAP2表达量进一步恢复(P<0.001)。TBI+EU_BMSCs组小鼠损伤灶; 刘欣刘亮张旭; 关键词：骨髓基质细胞分化创伤性脑损伤

VEGF/EGFP转基因骨髓基质细胞移植治疗脑出血的实验研究: 目的探讨VEGF/EGFP转基因骨髓基质细胞移植治疗脑出血的治疗效果及其机制。方法本研究采用密度梯度离心与贴壁培养相结合的方法分离纯化扩增MSCs。应用VEGF-EGFP体外转染、筛选、扩增MSCs。采用IV型胶原酶经微...; 张在强吴鑫滕路尚明华; 文献传递

聚吡咯/聚乳酸生物材料联合骨髓基质细胞移植治疗脊髓损伤的基础研究被引量：1: 2018年; 目的研究聚吡咯(polypyrrole,PPy)/聚乳酸(PLA)/骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)复合治疗脊髓损伤的可行性,并探讨其可能机制。方法制备聚吡咯/聚乳酸支架材料。从大鼠骨髓中分离、培养BMSCs;制作大鼠脊髓全横断模型,在T8水平脊髓头尾端完全横断脊髓,用虹膜剪刀去除长度约2.5 mm的脊髓组织。根据植入材料的不同将实验分为PPy/PLA组、PPy/PLA/BMSCs组及损伤组,损伤组无材料及细胞植入。术后6周处死大鼠,观察不同移植组体内轴突和血管生长情况。结果免疫荧光、电镜及q PCR结果证实复合移植可以显著促进轴突和血管生长,同时也提供了神经保护作用。结论 PPy/PLA/BMSCs可以促进大鼠脊髓损伤修复,其机制可能包括材料支架作用和BMSCs在体内促进血管生成,改善局部的微环境,因此促进新轴突生长而保护局部的神经元。; Raynald舒兵黄华周俊峰孙晓丹秦川安沂华; 关键词：骨髓基质细胞脊髓损伤

髋关节镜下钻孔减压自体松质骨联合自体骨髓基质细胞移植手术护理配合效果探析被引量：2: 2018年; 目的:探讨髋关节镜下钻孔减压自体松质骨联合自体骨髓基质细胞移植手术的护理配合方法及干预效果,为临床护理提供参考依据.方法:选取2014年8月-2015年10月我院收治的68例股骨头坏死患者,随机分为2组各34例,2组均行髋关节镜下钻孔减压自体松质骨联合自体骨髓基质细胞移植术,对照组给予常规手术护理配合,观察组给予综合手术护理配合,比较2组护理效果.结果:观察组手术时间及并发症发生率均显著优于对照组,远期随访显示观察组髋关节疼痛症状完全消失,不需服用镇痛药物,步态正常,对照组有7例(20.59%)髋关节疼痛症状明显,需服用镇痛药物,2组近远期效果差异显著(P<0.05).结论:围术期护理配合是改善髋关节镜治疗股骨头坏死疗效的重要因素,需要引起临床重视.; 孙莹莹; 关键词：股骨头坏死髋关节镜钻孔减压术

骨髓基质细胞移植对缺血性大鼠治疗效果及VEGF表达的影响被引量：1: 2017年; 目的研究骨髓基质细胞(BMSCs)对缺血性大鼠的治疗效果。方法将30只成年雌性SD大鼠制备成大脑中动脉缺血2h再灌注24h动物模型,按随机原则分为对照组和实验组,对照组模型制备成功后,不给予任何干预,自由饮食。实验组于缺血再灌注24h后经尾静脉给予BMSCs 3×106,所有大鼠于缺血再灌注1d、3d和7d进行神经功能评分,免疫组化法测定VEGF表达水平。结果神经功能评分:再灌注3d、7d后实验组神经功能评分明显低于梗死对照组(P<0.05)。VEGF免疫组织化学染色:再灌注后3d、7d实验组缺血区表达VEGF的细胞较梗死对照组明显增多(P<0.05)。结论 BMSCs可显著促进脑缺血大鼠的神经功能恢复,促进VEGF的表达,以减少神经细胞的凋亡。; 朱磊韩丽朱亚楠龙翠英郑春玲; 关键词：脑梗死大脑中动脉闭塞骨髓基质细胞血管内皮生长因子

绿色荧光标记的骨髓基质细胞移植治疗脑损伤的实验研究: 2016年; 目的:探讨骨髓基质细胞移植在脑损伤后神经功能恢复中的作用及其机制。方法:制作大鼠创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)模型,将培养成功的骨髓基质细胞(bone marrow stroma cells,BMSCs)通过慢病毒转染至大鼠体内,进行放射形迷宫觅水实验。结果:(1)荧光显微镜下观察,移植后2周、4周、6周GFP-BMSCs切片中,脑损伤处GFP标记的细胞呈绿色荧光,移植细胞散在位于损伤灶内,细胞存活。(2)单纯损伤组大鼠觅水时间、重复次数、错误次数等测试结果分别与正常对照组和移植组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);移植组上述指标与单纯损伤组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);移植组与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);移植后6周组分别与移植后2周组、4周组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:BMSCs移植能促进TBI后神经功能的恢复,其机制可能与BMSCs分化为神经元和神经胶质细胞有关。; 赵晓程郑春芳冯云李海龙郝风玲麻晓融董宇峰; 关键词：创伤性脑损伤骨髓基质细胞分化绿色荧光蛋白

大鼠骨髓基质细胞移植治疗急性脊髓损伤的实验研究: 2014年; 目的:本实验在大鼠脊髓损伤后经原位移植骨髓基质细胞(bone marrow stroma cell-s,BMSCs),证明植入的BMSCs在损伤的脊髓内能分化为神经元样细胞,并通过对远期运动能力测试,探讨移植后神经功能障碍恢复的情况。方法:①采用Alien重物坠落法制作改良型大鼠Alien’s脊髓损伤模型(重量10g,高度30mm),苏木精-伊红(Haematoxyli-n/eosin,HE)染色鉴定脊髓损伤情况。②采用体外骨髓贴壁法培养大鼠BMSCs,进行细胞染色观察细胞形态,检测CD44从而对骨髓基质细胞进行鉴定。细胞进行三次培养传代后用携带绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)基因的慢病毒转染。③传代细胞移植及移植后细胞存活:将GFP标记的BMSCs原位(损伤区)植入损伤模型,分别对2w、4w、6w后处死大鼠行脊髓组织切片,免疫荧光显微镜下观察表达GFP的细胞。④随机入组的各组大鼠行改良Rivlin斜板实验和脊髓运动功能BBB评分法,比较单纯损伤组、移植后2w组、移植后4w组及移植后6w组大鼠的运动能力的改变。结果:①采用Alien’s重物坠落法造模,制造改良型大鼠Alien’s脊髓损伤模型,效果可靠、稳定。②BMSCs经过3次传代后增殖能力已趋于稳定,细胞在体外培养、扩增后,细胞形态改变为胞体呈锥形,突起交织成网,故可作为脊髓损伤后细胞移植的来源;染色观察细胞形态,检测CD44呈阳性。③由携带GFP基因的慢病毒转染BMSCs移植入脊髓损伤模型后,在6w内可见到细胞表达GFP。④通过改良Rivlin斜板实验和脊髓运动功能BBB评分法对单纯损伤组大鼠测试结果均明显差于移植对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);移植后2w、4w及6w组均能改善远期运动功能,以6w后神经功能障碍恢复最好,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:BMSCs移植能促进SCI后神经功能障碍的恢复,其机制可能与BMSCs分化为神经元和神经胶质细胞及移植诱导后的BMSCs可与周围的神; 刘来兴朱玉德王翔毅栗济深邓轶鑫隋欣; 关键词：脊髓损伤骨髓基质细胞

同种异体骨髓基质细胞移植治疗大鼠肢体缺血的实验研究: 2014年; 目的探讨同种异体骨髓基质细胞(MSCs)移植对SD大鼠缺血肢体治疗机制和规律,为MSCs移植治疗肢体缺血提供理论基础。方法体外全骨髓培养法培养雄性SD大鼠MSCs至三代。60只SD大鼠经结扎腹主动脉及双侧腹壁阴部动脉造成双下肢缺血模型,随机分为对照组(n=30)及移植组(n=30),造模后3天度过反应期后移植组右下肢腓肠肌及股二头肌内分5点注射移植含1×106个MSCs细胞悬液0.5ml,对照组同法注射生理盐水0.5ml。按移植后1周、2周、4周、6周、8周时两组再随机分为5个亚组(n=6),分别取动物麻醉后穿刺双侧髂静脉血行血氧分压测定,处死动物取左前肢,左后、右后肢骨骼肌标本4%多聚甲醛固定,制切片。行Y染色体性别决定区(SRY)原位杂交,血管内皮生长因子(VEGF)-mRNA原位杂交、HE染色,计数VEGF-mRNA阳性细胞数和毛细血管数。对照组仅作右后肢的相关检测。结果 SRY:移植组右后肢、左后肢、骨骼肌间间隙内有阳性细胞构成血管样结构,有的在血管周围,未见到呈阳性的骨骼肌细胞。左前肢的骨骼肌周围筋膜内偶尔可见到阳性细胞。对照组无阳性细胞发现。VEGF-mRNA原位杂交:对照组和移植组右后肢、左后肢VEGF-mRNA呈进行性升高(P<0.001),而左前肢则无明显升高(P=0.694)。在第1周时对照组与移植组相比无统计学差异(P=0.079),随后移植组明显高于对照组(P<0.001)。静脉血氧分压:对照组及移植组髂静脉血氧分压呈进行性升高(P<0.001),移植组右后肢髂静脉氧分压较左后肢及对照组明显高(P<0.05)。毛细血管计数:对照组及移植组右后肢、左后肢的毛细血管计数呈进行性增高(P<0.05),而左前肢则无统计学意义(P=0.055),移植组中右后肢毛细血管计数明显高于左后肢及对照组(P<0.05)。HE染色:未见明显组织细胞核异常分裂改变。结论移植的MSCs可以在同种异体动物体内长期生存、分化,促进缺血肢体的VEGF-m; 刘坤罗军王洋李新喜白超; 关键词：骨髓基质细胞原位杂交细胞培养肢体缺血

高表达血管生长素的自体骨髓基质细胞移植治疗猪缺血性心脏病被引量：1: 2014年; 目的将高表达血管生长素(ANG)的自体骨髓基质细胞移植于慢性心肌缺血猪模型,观察移植后血管新生程度及对心功能的影响。方法建立猪慢性缺血性心脏病动物模型,随机分为3组:转染ANG重组腺病毒载体(Ad-ANG)的自体骨髓基质细胞移植组(组Ⅰ,n=11),单纯自体骨髓基质细胞移植组(组Ⅱ,n=10),注射无血清DMEM培养液的对照组(组Ⅲ,n=10)。体外培养自体骨髓基质细胞,利用Ad-ANG转染培养细胞,用CM-DiI标记细胞,移植于模型猪心脏的缺血区域。观察指标包括:冠状动脉(冠脉)造影Rentrop分数及心脏射血分数、梗死区百分数、荧光显微镜下标记细胞、血管数量及ANG的表达和分泌。结果与组Ⅱ及组Ⅲ相比,组Ⅰ冠脉造影Rentrop分数、心脏射血分数增高;缺血心肌区新生血管计数增高,可见大量CM-DiI标记的移植成活细胞,梗死区面积较小,ANG蛋白表达增高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论高表达ANG的自体骨髓基质细胞移植于慢性缺血心肌,移植细胞成活率高,能明显改善缺血心肌局部血运,改善心功能。; 徐驯宇陈前顺黄郴林兴黄盛东韩涛; 关键词：缺血性心脏病骨髓基质细胞血管生长素细胞移植腺病毒

骨髓基质细胞移植对脊髓缺血再灌注损伤后细胞间黏附分子-1表达和血脊髓屏障的影响被引量：1: 2014年; 目的探讨鞘内移植骨髓基质细胞（BMSCs）对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达和血脊髓屏障的影响.方法 SD大鼠90只,按随机数字表法分为3组,每组30只.假手术组（Sham组）、缺血再灌注损伤组（I/R组）和BMSCs移植组（BMSCs组）.I/R组和BMSCs组阻断左颈总动脉和左锁骨下动脉之间主动脉弓14 min建立脊髓缺血再灌注损伤模型,Sham组暴露主动脉弓,但不阻断.损伤前2d蛛网膜下腔置管,BMSCs组注入2×10^6 BMSCs,I/R组注入等容量PBS.分别于再灌注损伤后1、3和7d进行神经功能评分,取脊髓损伤腰骶节段,western blot测定脊髓组织中ICAM-1表达水平,并根据伊文思蓝外渗情况测定血脊髓屏障通透性.结果与Sham组比较,I/R组神经运动功能评分降低：1 d（F=38.59,P=0.001）,3 d（F =31.34,P=0.001）,7d（F =27.71,P=0.001）;脊髓组织ICAM-1表达增加：1 d（F=34.33,P =0.001）,3 d（F=29.76,P=0.001）,7 d（F=23.65,P=0.001）;血脊髓屏障通透性增加：1 d（F=42.57,P=0.001）,3 d（F =32.75,P=0.001）,7d（F =26.89,P=0.001）.与I/R组比较,BMSCs组神经运动功能评分增高：1 d（F=16.62,P =0.001）,3d（F=21.54,P=0.001）,7d（F=12.84,P=0.002）;脊髓组织ICAM-1表达减少：1 d（F=19.84,P=0.018）,3d（F =17.38,P=0.008）,7d（F =22.46,P=0.007）;血脊髓屏障通透性降低：1 d（F=22.38,P=0.016）,3d（F =27.59,P=0.009）,7 d（F=23.25,P=0.001）.结论鞘内移植骨髓基质细胞能够抑制ICAM-1表达,保护血脊髓屏障,降低血脊髓屏障通透性,进而降低脊髓缺血再灌注损伤.; 方波谭文斐程明张颖马虹; 关键词：骨髓移植细胞移植再灌注损伤脊髓缺血

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